不同卵巢儲備功能患者血清GnSAF水平比較

田陽，謝鐵男，扈聰，鄧萍，劉彥紅

(1吉林大學第一醫院生殖產前中心，長春 130021；2 吉林省腫瘤醫院)

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不同卵巢儲備功能患者血清GnSAF水平比較

田陽1，謝鐵男1，扈聰1，鄧萍2，劉彥紅1

(1吉林大學第一醫院生殖產前中心，長春 130021；2 吉林省腫瘤醫院)

目的 比較不同卵巢儲備功能患者血清促性腺激素平抑因子(GnSAF)水平。方法 根據卵巢儲備功能將244例患者分為卵巢功能正常組(60例)、卵巢高反應組(111例)、卵巢功能減退組(73例)，采用雙抗體一步夾心法酶聯免疫吸附試驗(ELISA)檢測三組患者血清GnSAF并進行比較。采用Spearman分析所有患者血清GnSAF水平與抗苗勒管激素(AMH)、基礎卵泡刺激素(FSH)、竇狀卵泡數(AFC)的相關性。結果 卵巢功能正常組、卵巢高反應組、卵巢功能減退組血清GnSAF水平分別為25.52(18.51～32.53)、27.56(20.26～34.33)、27.125(22.181～33.281)pg/mL，三組比較，P均>0.05。在244例患者中，血清GnSAF水平與AMH(r=-0.028，P=0.668)、FSH(r=-0.012，P=0.856)、AFC(r=0.022，P=0.728)無關。結論 不同卵巢儲備功能患者血清GnSAF水平無差異。

卵巢儲備功能；卵泡；促性腺激素平抑因子；抗苗勒氏管激素;卵泡刺激素

輔助生育技術尤其是體外受精-胚胎移植技術(IVF-ET)已成為治療不孕癥的最佳手段。控制性超促排卵是輔助生殖技術的關鍵，而促排卵很大程度取決于卵巢的儲備功能。臨床醫生需要對患者的卵巢功能進行預測，選擇最佳的促排卵方案，提高促排卵的成功率。促性腺激素平抑因子(GnSAF)是由卵泡刺激素(FSH)刺激卵巢顆粒細胞產生的一種能夠降低垂體對促性腺激素致敏作用的非甾體類激素。前期研究發現，卵巢儲備功能低下患者卵泡液中的GnSAF水平較正常人低，但由于卵泡液提取相對困難，因此希望尋求一種更為簡單直接的預測卵巢儲備功能的指標[1]。本研究比較了不同卵巢儲備功能患者血清GnSAF水平，探討用血清GnSAF評估患者卵巢儲備功能的可行性。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 選取2015年4月～2016年1月在吉林大學第一醫院生殖中心就診的不孕癥及孕前優生檢查的患者244例，根據卵巢儲備功能[2]將其分為卵巢功能正常組(60例)、卵巢高反應組(111例)、卵巢功能減退組(73例)。卵巢功能正常組、卵巢高反應組、卵巢功能減退組年齡分別為(31.1±4.5)、(27.0±3.9)、(36.1±7.3)歲，抗苗勒管激素(AMH)分別為2.23(1.745～3.30)、9.16(7.05～10.49)、0.51(0.23～0.91)ng/mL，基礎FSH分別為6.295(5.295～7.415)、5.94(5.45～6.63)、8.07(6.34～12.94)mIU/mL，竇狀卵泡數(AFC)分別為14.41(11～16.22)、24.41(23.11～26.16)、5.86(3.85～7.90)個，三組比較，P均<0.01。所有入選對象均提前告知血清將用于臨床科學研究，簽署知情同意書且本研究已獲吉林大學第一醫院倫理委員會批準。

1.2 血清GnSAF檢測 所有研究對象均于月經第2～4天(月經失調或閉經患者時間不限，但需B超監測結果顯示雙側卵巢中無優勢卵泡)清晨空腹抽取靜脈血5 mL，并當日于離心機上3 000 r/min離心10 min，取上清液分裝于離心管中保存于-80 ℃冰箱，避免反復凍融。血清GnSAF測定采用雙抗體一步夾心法酶聯免疫吸附試驗(ELISA)，采用自動酶標儀于波長 450 nm處讀取OD值，繪制標準曲線，根據標準曲線方程計算血清GnSAF水平。

1.3 統計學方法 采用SPSS19.0統計軟件。非正態分布計量資料以中位數(四分位數范圍)表示,比較采用Kruskal-Wallis非參數檢驗。GnSAF水平和其他指標之間的相關性分析采用Spearman分析。P<0.05為差異有統計學意義。

2 結果

卵巢功能正常組、卵巢高反應組、卵巢功能減退組血清GnSAF水平分別為25.52(18.51～32.53)、27.56(20.26～34.33)、27.13(22.18～33.28)pg/mL，三組比較，P均>0.05。在244例患者中，血清GnSAF水平與AMH(r=-0.028，P=0.668)、FSH(r=-0.012，P=0.856)、AFC(r=0.022，P=0.728)無關。

3 討論

卵巢儲備功能是指卵巢皮質中剩余的仍具有功能的生殖細胞的數量和質量，是女性生育潛能的一個重要標志[3]。評估卵巢儲備功能能提供更多的預后信息，間接預測卵巢的反應性，有助于臨床醫生為患者提供咨詢和制定個體化治療方案。前期的研究[1]認為，GnSAF是一種良好的預測卵巢反應性的指標。但血清GnSAF水平在預測卵巢儲備功能方面的價值還沒有定論。

GnSAF是人卵泡液中分離出的一種分子量為12.5 kDa、對應序列為人類血清白蛋白C-末端子區域ⅢB的一段含有95個氨基酸的多肽鏈[4～6]。但目前對于此物質確切的氨基酸序列及物質特征仍需要進一步的研究與探討。同AMH一樣，GnSAF也是由在竇前卵泡和小卵泡的顆粒細胞產生，并且在自然周期為6～8 mm而FSH刺激周期直徑<11 mm的卵泡中GnSAF的生物活性最高。因GnSAF與雌激素的拮抗作用，在卵泡早期雌激素濃度一直維持在低水平，當一個優勢卵泡出現，其他小卵泡自行閉鎖。GnSAF的濃度降低，對垂體的抑制作用開始減弱，從而增加GnRH誘導的黃體生成素(LH)的釋放，但是對基礎的FSH作用不大。相應的卵泡分泌雌激素增加，正反饋效應引起FSH、LH峰的出現。因此GnSAF在控制卵泡發育、調節內源性LH峰以及避免過早黃素化等方面起重要作用[7～9]。

有研究[3]發現，一般大于40歲的女性卵巢儲備功能減退的發生率超過50%，對促性腺激素的反應性也大幅下降，生育力下降速度也更快。本研究發現卵巢功能減退組年齡大于功能正常組、高反應組，差異具有統計學意義，與上述研究觀點相符，因此可以用年齡對卵巢儲備功能進行粗略預測。但由于我們并不能預測卵巢儲備功能下降的速度及質量，故而相似年齡段的女性的卵巢儲備功能卻不一定相同。基礎FSH水平即是指月經周期第2～4天(即卵泡早期)時血清中FSH的含量。卵巢儲備功能減退的女性卵泡數目減少，從而導致顆粒細胞減少，其產生的抑制素減少，卵泡早期FSH濃度增加。沒有明確的卵巢功能減退患者的FSH閾值，但根據各項研究發現，FSH>10 U/L對預測卵巢功能減退有很高的敏感性(83%～100%)[2]。本研究中的卵巢功能減退組FSH水平明顯高于功能正常組和高反應組，與此觀點相符。但由于FSH在各個周期間及周期內的波動使得它在預測卵巢儲備功能方面存在相對的局限性[10]。AMH是一類肽類生長因子，屬于轉化生長因子β家族，由竇前卵泡及小的竇狀卵泡的顆粒細胞產生，不依賴促性腺激素，在各個時間保持相對一致性，測定時間沒有特殊要求，相對更加方便、簡單。研究[11]發現，在老年女性FSH增加之前,AMH已經開始降低，因此相比較而言，它對于預測卵巢儲備功能更準確。根據目前的研究證據發現，AMH<1.1 ng/mL預示著卵巢反應性降低、妊娠結局差，AMH>4.5 ng/mL則預示著卵巢的高反應性，且敏感性及特異性都很高。

本研究通過檢測不同卵巢儲備功能患者血清GnSAF水平，發現卵巢高反應組血清GnSAF水平高于卵巢功能減退組、卵巢功能正常組，但差異無統計學意義，并沒有出現理論上的卵巢反應低下組GnSAF水平降低的結果，提示不能用血清GnSAF評估卵巢儲備功能，考慮與患者卵泡數增多引起GnSAF稀釋及其生物活性降低有關。有研究發現，患者卵泡液的容量增長了2.6倍，但是GnSAF的生物活性卻降低了22倍[12]。GnSAF由卵泡顆粒細胞產生并分泌到卵泡液中，在入血過程中生物活性可能受到了一定物質的滅活，或者入血過程中發生了GnSAF的丟失。卵巢功能減退組的患者多是在我中心行IVF-ET治療的患者，目前最常用的控制性促排卵藥物即為含FSH及LH成分的藥物，此藥物的應用是否提高了這部分患者GnSAF水平值得深一步的研究，且部分卵巢儲備功能下降者卵泡提前募集可能使得GnSAF峰值提前出現。

綜上所述，不同卵巢儲備功能患者血清GnSAF水平無差異，不能用血清GnSAF評估患者卵巢儲備功能。

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吉林省發改委基金資助項目(2010019-2)。

謝鐵男(E-mail: xietienan@126.com)

10.3969/j.issn.1002-266X.2016.35.024

R711.6

B

1002-266X(2016)35-0073-03

2016-06-22)