不同抗凝劑對5種特定蛋白檢測結果的影響

黃　瑩，劉敬喜

(1.白銀市第一人民醫院檢驗科,甘肅白銀 730900；2.寧波美康生物科技股份有限公司,浙江寧波 315100)

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·論著·

不同抗凝劑對5種特定蛋白檢測結果的影響

黃瑩1，劉敬喜2

(1.白銀市第一人民醫院檢驗科,甘肅白銀 730900；2.寧波美康生物科技股份有限公司,浙江寧波 315100)

摘要:目的觀察常見的4種血樣采集管對C3、C4、IgA、IgG、IgM這5項生化項目檢測結果的影響，探討能否用抗凝血漿替代血清用于生化檢測。方法對43名體檢人員的靜脈血管，連續用乙二胺四乙酸二鉀(EDTA-K2)抗凝管、肝素鋰抗凝管、普通血清管、枸櫞酸鈉抗凝管各抽取一管血液，經混勻、離心分離后提取血清或血漿在儀器上同時用C3、C4、IgA、IgG、IgM試劑盒進行測定。結果在相同條件下，5個項目中肝素鋰抗凝管與普通血清管比較差異無統計學意義(P>0.05)，枸櫞酸鈉抗凝管與用普通血清管的結果比較差異有統計學意義(P<0.05)，EDTA-K2抗凝管與用普通血清管的結果比較，IgA、IgM、IgG差異無統計學意義(P>0.05)，C3、C4差異有統計學意義(P<0.05)。結論IgA、IgM、IgG生化檢驗項目可用肝素鋰抗凝血漿和EDTA-K2血漿代替血清，C3和C4生化檢驗項目可用肝素鋰抗凝血漿代替血清，但C4應建立血漿參考區間。

關鍵詞:補體；免疫球蛋白；抗凝劑

樣本采集過程是保證樣本質量的關鍵環節,其中就有抗凝劑的使用和樣本容器的要求[1]。現在醫院廣泛使用一次性真空采血管采集樣本進行生化項目檢測，可能在實際操作過程中，為了減少采血管數量,常會統一使用一種或兩種采血管,或者是為了使患者盡快拿到檢測報告而使用抗凝血漿進行檢測。而一般的C3、C4、IgA、IgG、IgM試劑說明書上均要求使用血清，所以本文對常見的3種抗凝血漿與普通血清在生化檢驗分析上進行對比試驗，現將本次試驗所檢測情況報道如下。

1資料與方法

1.1儀器與試劑東芝TBA-2000FR型全自動生化分析儀，由日本東芝醫療系統公司提供。維護完成后對5個試劑進行校準，質控結果在控后待用。補體C3檢測試劑盒(免疫比濁法)，批號為20111103。補體C4檢測試劑盒(免疫比濁法)，批號為20120309。免疫球蛋白IgA檢測試劑盒(免疫比濁法)，批號為20120116。免疫球蛋白IgG檢測試劑盒(免疫比濁法)，批號為20120621。免疫球蛋白IgM檢測試劑盒(免疫比濁法)，批號為20120109。5種試劑均由寧波美康生物科技股份有限公司生產。抗凝劑的選用[2]：臨床檢驗常用的3種抗凝劑，枸櫞酸鈉(檸檬酸鈉)，枸櫞酸與血液的比例為1∶9；乙二胺四乙酸二鉀(EDTA-K2)；肝素：本次所用為肝素鋰抗凝管。普通血清管：所用血清管為不加任何促凝劑的紅色普通管。所有采血管均由美康國賓體檢中心提供。

1.2方法在體檢中，對自愿獻血的43人抽4管靜脈血(EDTA-K2抗凝管、肝素鋰抗凝管、普通血清管、枸櫞酸鈉抗凝管各一管)。所有血樣都是一針見血，以防止組織損傷外源性凝血因子進入試管影響試驗結果[3]。立即將3種抗凝管進行混勻、編號、分類、靜置。選擇4 000 r/min(約1 160×g)的轉速，離心10 min[4]。離心完成后，將4種采血管，每管用一次性吸管輕輕吸取中段血清或血漿，放入生化分析儀中進行檢測并記錄結果。

1.3統計學處理采用Microsoft Excel 2003軟件對數據進行處理。

2結果

2.13種抗凝血漿與血清生化檢驗結果見表1。5個項目的肝素鋰血漿管結果與普通血清管結果比較，差異均無統計學意義(P>0.05)；枸櫞酸鈉抗凝管結果與普通血清管結果比較，差異均有統計學意義(P<0.05)；3個免疫球蛋白IgA、IgG、IgM的EDTA-K2抗凝管結果與普通血清管結果比較，差異無統計學意義(P>0.05)；補體C3和C4的EDTA-K2抗凝管結果與普通血清管結果比較，差異均有統計學意義(P<0.05)。

2.2結果分析血清和3種抗凝血漿生化檢測結果的相關性和回歸方程、血漿檢測結果與血清檢測結果的平均偏倚見表2、3。

表1　　血清與3種抗抗凝血漿的結果(g/L)

表2　　血清和3種抗凝血漿生化檢測結果的相關性和回歸方程

表3　　偏倚要求

3討論

首先對每個項目的血清和血漿檢測結果進行統計學分析，從表1結果可知，5個項目的肝素鋰血漿管結果、IgA、IgG、IgM的EDTA-K2抗凝管結果與普通血清管的差異均無統計學意義(P>0.05)；而5個項目的枸櫞酸鈉抗凝管結果、補體C3和C4的EDTA-K2抗凝管結果與普通血清管差異均有統計學意義(P<0.05)。

對有統計學意義的項目進行相關性分析，對相關系數r2<0.95，計算每份血清和血漿樣本的相對偏倚，再計算其平均偏倚。對r2≥0.95，以血清檢測結果為X,血漿檢測結果為Y，計算回歸方程Y=a+bX,以臨界水平的值帶入回歸方程,計算血漿(Y)與血清(X)檢測結果之間的臨界水平偏倚。本文的臨界水平偏倚或平均偏倚需同時滿足小于或等于1/2的說明書偏倚要求和美國臨床實驗室修正法規對室間評估偏倚[5]的要求(見表3)。若符合要求，則對生化檢測結果的影響在臨床可接受范圍之內，可用血清參考區間解釋血漿檢測結果。因此，可以發現IgA、IgG、IgM的肝素與EDTA-K2血漿、C3的肝素血漿的偏倚均符合要求。而C4的肝素血漿的偏倚雖然符合說明書要求，但偏差超過了1/2的要求，有點偏大，故需要建立血漿參考區間。而枸櫞酸鈉抗凝管測定的5個項目結果均偏低應該與血液被稀釋有關。

通常，血清樣本中有纖維蛋白絲遺留及分離過程中血液有形成分易發生破壞等缺點[6]，而且肝素鋰、EDTA-K2等血漿能為更快速f 的回報檢測結果提供很多方便[7]。涉及血液的液體成分,究竟應當選擇血漿抑或血清,主要取決于該指標的性質和檢測的目的[8]；涉及免疫成分的指標,絕大多數宜選用血清。可能受到凝血過程影響的指標,應當盡量選擇血漿；待檢物既不受凝血過程影響,也不會因制備血清而改變的指標,可以使用血清或血漿[9]。

通過本次實驗，發現寧波美康生物科技股份有限公司生產的IgA、IgM、IgG生化檢驗項目可用肝素鋰抗凝血漿和EDTA-K2血漿代替血清，C3和C4生化檢驗項目可用肝素鋰抗凝血漿代替血清；C4項目的血清和肝素鋰抗凝

血漿相比有差異，臨床實驗室應為C4項目確定可靠的參考區間[10]，方可使用肝素鋰抗凝血漿代替血清。

參考文獻

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[10]楊有業,張秀明.臨床檢驗方法學評價[M].北京:人民衛生出版社,2008:235.

Impact on the measurement results of five different specialty protein blood collection tube project

HuangYing1,LiuJingxi2

(1.DepartmentofClinicalLaboratory,theFirstPeople′sHospitalofBaiyin,Baiyin,Gansu730900,China;2.NingboMedicalSystemBiotechnologyCo.Ltd.,Ningbo,Zhejiang315100,China)

Abstract:ObjectiveTo investigate the effects of a common four kinds of blood collection tubes for C3,C4,IgA,IgG,IgM test results of five biochemical projects,exploring the possibility of using an alternative anticoagulant plasma serum for biochemical testing.MethodsVein 43 medical personnel,continuous tube with EDTA-K2anticoagulant,heparin lithium anticoagulant tube,normal serum tubes,sodium citrate anticoagulation a tube of blood drawn each tube,after mixing,extracted after centrifugation the serum or plasma to the instrument while in using C3,C4,IgA,IgG,IgM kit were measured.ResultsUnder the same conditions,lithium heparin anticoagulant tube with normal serum tube difference five projects was not statistically significant (P>0.05),sodium citrate anticoagulation tube and pipe the results with normal serum difference was statistically significance (P<0.05),EDTA-K2anticoagulated tubes and compare the results with normal serum tubes,IgA,IgM,IgG was no significant difference (P>0.05),C3,C4 difference was statistically significant (P<0.05).ConclusionIgA,IgM,IgG biochemical test items available lithium heparin anticoagulant plasma and EDTA-K2plasma instead of serum,C3 and C4 biochemical test items available plasma instead of serum lithium heparin anticoagulant,but C4 should establish plasma reference range.

Key words:complement； immunoglobulin；anticoagulants

(收稿日期：2015-09-28)

DOI:10.3969/j.issn.1673-4130.2016.04.015

文獻標識碼：A

文章編號：1673-4130(2016)04-0468-03