羅非魚鏈球菌病的診治技術

○唐建玲

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羅非魚鏈球菌病的診治技術

○唐建玲

近年來，鏈球菌病已成為羅非魚養殖的主要病害，給羅非魚養殖業造成極大的危害，甚至威脅到羅非魚養殖產業的穩定發展。為此，筆者結合生產實踐，就羅非魚鏈球菌病的診斷及防治技術進行探討，供廣大羅非魚養殖者參考。

一、流行病學

羅非魚鏈球菌病主要流行于春、夏和秋季，水溫25～37℃時較為流行，在32℃以上時尤為多發，發病率達20%～30%，發病魚的死亡率可高達60%～100%。水溫降至20℃以下時則發病較少；在高水溫季節時，病魚的死亡高峰期可持續2～3周；在低水溫季節，病魚呈慢性發病，死亡率降低，但持續時間長。疾病流行高峰為5月～9月，主要危害100g以上的稚魚到1kg左右的成魚。傳染性強，造成了嚴重的經濟損失。無乳鏈球菌病主要以水平方式傳播，體表有損傷或受環境應激過大的魚易感染發病。

二、典型癥狀

體色發黑，吻端發紅，體表黏液增多，失去食欲，靜止于水底，或離群獨自漫游于水面，有時作旋轉游泳后再沉入水底。最明顯的癥狀是病魚眼球突出，其周圍充血，鰓蓋內側發紅、充血或強烈出血。在夏季高溫時期癥狀發展迅速。在水溫較低時，除出現以上主要癥狀外，各鰭均發紅、充血或潰爛，體表局部特別是尾柄往往潰爛或有帶膿血的疥瘡。

解剖病魚，幽門垂、肝臟、脾臟、腎臟或腸管均有點狀出血。肝臟因出血和脂肪變形而褪色甚至組織破損。腎臟腎小球及褐色素巨噬細胞中心以及腎小管間質組織侵染細菌并大量繁殖引起腎臟腫大、壞死。中腸道上皮的固有層破損，引起腸炎，腸絨毛的基部在革蘭氏染色時可看到聚集的菌落。病原菌如侵入腦組織，可引起血細胞浸潤，出血。

三、病理變化

羅非魚患鏈球菌病后，主要影響腦組織，組織切片顯示腦組織的蛛網膜下出血和薄壁單核細胞浸潤。鏈狀的球菌見于蛛網膜間，并且位于腦組織的膿腫中。巨大細胞的直徑為100μm，散布的細胞嗜酸性顆粒呈線狀排列，平行于出血區域。羅非魚的主要病癥是出血和形成膿腫的腦膜炎癥。

四、診斷方法

對于羅非魚無乳鏈球菌病的確診可以結合臨床癥狀、病原檢測和分子快診技術：首先，觀察發病魚是否具有如嗜睡打轉、眼球突出或渾濁發白、腦膜炎、內臟器官及體表出血等典型病理變化；其次，采集發病魚的組織，制備組織觸片進行吉姆薩染色，借助光學顯微鏡油鏡觀察是否存在成雙或成鏈狀的球性細菌；然后，在無菌條件下，從發病魚的組織中是否分離到致病性鏈球菌，有條件的可采用生化方法、免疫學方法或分子生物學方法對分離細菌進行準確鑒定來確診。

目前鏈球菌的商用鑒定系統有RAPIDStrepStrip，Vitecksystem，API20STREP和ATBExpression，這些商用鑒定系統使用方便，準確可靠。本實驗室以無乳鏈球菌的具有高度保守性的莢膜多糖基因和CAMP因子基因為檢測序列，成功建立了快速檢測羅非魚無乳鏈球菌的PCR方法，這個方法具有簡便、快速、靈敏、準確和特異性等優點。

五、病因分析

1.目檢鰓的顏色和病癥，判斷水質狀況。鰓顏色鮮紅、鰓絲分布均勻無異常，表明水質正常；而鰓顏色灰白或暗黑、鰓上有病灶或異物、鰓絲末端腐爛、鰓絲變形，表明水質有問題，應進行水質檢測。

2.剖檢觀察肝、脾、腎的病變程度，判斷飼料的質量水平。如果肝臟有花肝、水腫、壞死（紅、白點）、質地變脆等現象，脾、腎有腫大、顏色異常等現象，表明飼料質量或投喂技術有問題，可通過“看、聞、嘗”來初步判斷飼料的好壞：看——就是把飼料充分溶化后，看其粉碎細度及其紫色（多為菜子餅）與黑色（多為棉籽餅）成分的多少，以粉碎細度越細、紫色和黑色成分越少的飼料為好；聞——就是抓把飼料靠近鼻子聞，以聞到魚粉清香（新鮮魚肉曬干的香味）為好，若聞到植物油腳的味道則是飼料中的脂肪已經變性，對魚類有毒；嘗——取少量飼料放到嘴里慢慢嚼爛、品嘗，吐出后嘴巴有發麻或辛辣現象，表明飼料中添加有對魚類有毒的原料。

六、防治措施

1.堅持預防用藥原則。平時預防時的用藥原則：能不用藥則不用，必須用則少用；盡量使用中草藥而不是用化學藥物，一旦使用化學藥物，必須使用制劑，不使用原藥，嚴格遵守休藥期。

2.鏈球菌疫苗免疫。免疫接種是一種相對健康安全的疾病預防措施，雖然魚類的特異性免疫機制還很不完善，但國內外研究已證實魚類免疫疫苗對魚體能夠產生免疫保護力。目前在羅非魚上研究最多的是鏈球菌疫苗，其中廣西水產研究所的口服和注射疫苗已在推廣試驗,推廣比較好的是口服疫苗。一般來說，魚類疫苗最好效果的免疫方式是注射免疫，其次是浸泡免疫，最差是口服疫苗，浸泡疫苗一般只有注射疫苗的1/5～1/10的效果，而口服疫苗只有浸泡疫苗的1/5～1/10。

3.改善和優化水環境。水環境是魚類賴以生存的必要條件，水質的好壞直接決定著羅非魚能否健康、快速生長。盲目擴大魚類的養殖密度、強化投餌量都會加重水體的負擔，破壞原有的生態平衡。換水條件好的地方可適當換掉部分池塘底層水；藻類生長不佳，pH值低于7.5，混濁的水體，先使用凈水類產品凈水，3小時后使用有機酸或腐植酸鈉解毒；若水體不混濁，藻類生長良好，直接使用有機酸或腐植酸鈉解毒即可；第二天天氣晴好時，用“肥爽+先得純芽胞桿菌”或“調水王2號+肥水靈”肥水調水；兩天后藻類生長良好，水色發亮時，再用二氧化氯或苯扎溴銨溶液消毒水體。

4.減少投喂或禁食。當鏈球菌病暴發時，減少投料或不投料，可以降低病魚的死亡率，待魚群穩定，基本不死亡才逐漸恢復投料。

5.降低水溫。高水溫是造成魚群應激和細菌繁殖的條件。所以，在可能的情況下降低水溫有助于控制鏈球菌病的發生。小的魚池可以在上面建遮陽棚，或者在夜間開攪水機，以適當降低水溫。

6.中草藥治療。Pongsak和Parichat研究了大蒜、穿心蓮、對葉豆、山竺、番石榴和鵲腎樹六種草藥對尼羅羅非魚無乳鏈球菌感染的抗菌作用，發現這六種草藥對無乳鏈球菌均有不同程度的抗菌作用。

7.抗菌素治療。化學藥物治療疾病是最直接和簡便的措施手段，但長期使用或使用不當就難免使病原體產生耐藥性導致防治失敗，不僅破壞了養殖微生態環境，而且存在的藥物殘留也會危及人類健康。采用抗菌素治療羅非魚鏈球菌病一定要做到早期用藥，一旦發現魚群發病，及早用藥，越早用藥效果越好。此外，藥物要經過飼料喂服進入魚體內方能有效，對已經發病而不吃飼料的病魚，投喂藥物是沒有效果的。再者，藥物的質量和細菌對藥物的抗藥性是決定藥物效果的關鍵因素，有些水產用藥物的有效成分含量極低，當然沒有多少效果；即便藥物的量足質佳，但發病魚體中的鏈球菌抗藥性很強，藥物也不會有效。所以，對于有條件的養殖場，可以通過了解并掌握養殖場內病原菌耐藥狀況的變化，來篩選有效的疾病預防和治療用藥物。

8.可調整飼料配方。通過對飼料配方調整，可減輕鏈球菌病的嚴重程度。如羅非魚飼料油脂水平不要超過6%；高溫季節要適當增加飼料中維生素的使用量，可以在原有基礎上增加20%-30%的使用量，其中維生素C可以添加0.3kg/t飼料。

七、注意事項

1.要根除病因。病情發生后，首先停止喂料2天，并根據分析的病因，及時采取措施根除病因。是飼料中有對魚類有毒物質引起的，及時更換飼料。是水質惡化引起的，應根據水質監測結果采取相應措施：水質偏酸，潑灑生石灰水；氨氮超標的，用腐植酸鈉改水，并延長開機增氧時間。

2.要徹底消毒水體。第一天到第三天，用生石灰或二氧化氯消毒水體，每天一次，切斷病原菌傳播。

3.要注意內服敏感藥物。根據實驗室藥敏試驗結果篩選敏感藥物（鏈球菌對青霉素、先鋒必敏感程度較高）和黃芪多糖（還可添加一種保肝護肝中藥），每天一次，連喂15天，內服藥物期間，每天只喂料一次，日投喂量為正常日投喂量的60%。養有豬或鴨的水體，其鏈球菌對青霉素、先鋒必的敏感程度大大降低，療效不顯著，只能通過內服黃芪多糖來提高抗病力達到治療效果。

4.要確保療效。確診為鏈球菌病的，因鏈球菌已經侵入魚的腦部，內服的藥物要殺滅腦部的病菌比較難、也比較慢，所以用藥時間相對比較長，建議內服15天；同時治愈后每15～20天再內服3～5天，確保不復發。

（通聯：537500，廣西容縣容州鎮水產畜牧獸醫站）