乙型肝炎病毒X區基因變異與原發性肝癌的關系研究

楊偉 李增彩 倪秀瑩 王濤

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乙型肝炎病毒X區基因變異與原發性肝癌的關系研究

楊偉 李增彩 倪秀瑩 王濤

【摘要】目的 初步研究乙型肝炎病毒（HBV）X區基因變異與原發性肝癌的關系。方法 收集39例HBV感染患者的肝（癌）石蠟組織標本，其中慢性乙型肝炎（CHB）14例、肝細胞癌（HCC）25例。采用聚合酶鏈式反應（PCR）方法擴增組織中HBVX區基因，并對PCR產物進行DNA測序，分析常見變異位點的變異情況。結果 1. HCC組與CHB組相比，在X區發生插入/缺失變異，聯合變異的位點及例數增多，并且A1762 T與G1764 A常發生雙突變。2. HBVX區變異頻率較高位點依次是C1655 T/G、A1605 C/G、A1762 T、G1764 A、A1772B、A1645 C、C1687 A、G1776 T。結論 HBVX區存在點突變、插入/缺失變異及聯合變異，可能在HCC的發生和發展過程中起重要作用。

【關鍵詞】原發性肝癌；HBVX基因；變異

肝細胞癌（HCC）是最常見的惡性腫瘤之一，乙型肝炎病毒（HBV）的慢性感染是其最重要因素。研究資料證明HBVX區病毒變異與HCC發生和發展有關。本研究對慢性HBV感染者，其中慢性乙型肝炎（CHB）14例、HCC25例，共39例石蠟組織標本的HBVX區基因變異情況進行檢測，以初步探討HBVX區基因變異與HCC的關系。

資料和方法

一、標本來源及分組

收集39例慢性HBV感染者肝（癌）組織標本，其中CHB組肝組織14例、HCC組肝癌組織25例。

二、主要儀器和試劑

PCR擴增儀：雙螺旋牌PTC-51 DNA溫度循環器（軍事醫學科學院放射醫學所總后勤部衛生部監制），PCR擴增試劑盒購自上海生工生物工程技術有限公司，DL2000 DNAMarker購自日本Ta KaRa公司。

三、石蠟組織中HBVDNA提取

采用傳統的酚-氯仿提取法，提取后置-20℃冰箱保存。除了石蠟組織樣品外，每次提取過程都以1份雙蒸水樣品，作為全程的污染監控?！?br>