某品牌國產化學發光儀檢測降鈣素原的性能評價

龍　琴，肖亞雄，唐靈通，盧靈鋒

(1.四川省宜賓市第一人民醫院檢驗科　644000；2.四川省宜賓市宜賓縣人民醫院　644000)

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某品牌國產化學發光儀檢測降鈣素原的性能評價

龍琴1，肖亞雄1，唐靈通1，盧靈鋒2

(1.四川省宜賓市第一人民醫院檢驗科644000；2.四川省宜賓市宜賓縣人民醫院644000)

摘要:目的對某品牌國產化學發光儀檢測降鈣素原(PCT)的性能進行評價。方法在新產業MAGLUMI4000化學發光儀上檢測PCT，對其精密度、線性、攜帶污染率進行評價，并與梅里埃(mini-VIDAS)酶聯免疫熒光法檢測PCT進行相關性分析。結果化學發光法檢測PCT的低、中濃度樣本的CV批內分別為1.56%、2.23%；CV批間分別為2.30%、3.05%。PCT在0.5～98.0 ng/mL濃度范圍內線性良好(Y=0.997 22X+0.173 77，r2=0.998 12)。攜帶污染率為0.89%，樣本間交叉污染小。新產業MAGLUMI4000化學發光儀檢測系統與梅里埃mini VIDAS熒光免疫分析儀檢測系統測定PCT的結果呈明顯相關(Y=1.004X+0.005 59，r2=0.999 58)。結論新產業MAGLUMI4000化學發光儀檢測系統測定PCT的性能良好，可供臨床使用。

關鍵詞:降鈣素原；化學發光法；酶聯免疫熒光法；性能評價

降鈣素原(PCT)是降鈣素的激素原，是一種由116個氨基酸組成的糖蛋白，相對分子質量為13×103。健康人血清PCT濃度極低(<0.05 ng/mL)，當機體受到促炎反應刺激，特別是細菌感染時，PCT表達普遍增加，并且從實體組織和各種類型的細胞中(如肝、腎、脂肪細胞和肌細胞等)不斷釋放入血[1]，且炎癥越重，血漿PCT濃度越高[2]。作為一種新型炎癥標志物，PCT常用于診斷和鑒別診斷細菌性和非細菌性感染及用于感染嚴重程度的判斷[3]。目前國內PCT檢測多采用進口試劑及配套儀器，但存在成本昂貴的問題，因而限制了該項目在基層醫院的開展。而國產的新產業PCT試劑及配套MAGLUMI4000化學發光儀檢測具有成本低，批量檢測速度快等優點，但其檢測性能如何，目前國內有關報道較少見，本試驗就該檢測系統進行相關性能評價，現報道如下。

1資料與方法

1.1一般資料精密度試驗采用新產業PCT檢測試劑盒配套質控品，其余樣本來自宜賓市第一人民醫院臨床新鮮血清樣本，無明顯溶血、脂血及黃疸。

1.2儀器與試劑PCT化學發光法測定試劑盒及配套校準品、質控品為深圳新產業生物工程股份有限公司生產(批號：068150610)，檢測儀器為新產業MAGLUMI4000化學發光儀及其配套試劑：底物液1+2(批號：302151120)，清洗液(批號：303151021)；PCT熒光免疫分析法測定試劑盒及配套校準品、質控品為梅里埃生產(批號：1004108560)，檢測儀器為梅里埃mini VIDAS熒光免疫分析儀。

1.3方法

1.3.1精密度參考美國國家臨床實驗室標準化研究所(CLSI)的EP5-A2文件指南[4]，做精密度試驗。采用2個濃度質控品進行檢測，每天2批，每批檢測2次，每日每批至少間隔2 h，共進行20 d，2個濃度樣本分別獲得80個測試結果。使用經離群值檢驗合格的數據進行批內、批間及總不精密度的計算。

1.3.2線性范圍參考CLSI的EP6-A文件[5]，將PCT的低、高值分別是0.5、98.0 ng/mL的2個樣本，按0.5∶0、0.4∶0.1、0.3∶0.2、0.2∶0.3、0.1∶0.4、0∶0.5(單位：mL)配成6個系列濃度樣本，在MAGLUMI4000化學發光儀上每個樣本重復測3次，以樣本預期值為X軸，以實測均值為Y軸繪圖。計算線性回歸方程。

1.3.3攜帶污染率選擇高值(H)和低值(L)樣本各1份，依次測高值3次(H1、H2、H3)、低值3次(L1、L2、L3)，計算攜帶污染率。攜帶污染率(%)=(L1-L3)/(H3-L3)×100。

1.3.4相關性分析參考EP9-A2文件[6]，每天選擇8個新鮮患者樣本，在室內質控合格的情況下，2 h內分別在新產業MAGLUMI4000化學發光儀和梅里埃mini VIDAS熒光免疫分析儀上測定PCT，每個樣本重復測定2次，連續5 d，以梅里埃mini VIDAS熒光免疫分析儀2次測定結果的均值為X軸，以MAGLUMI4000化學發光儀2次測定結果的均值為Y軸繪圖，進行方法比對。

2結果

2.1精密度試驗結果PCT低值樣本檢測均值為0.55 ng/mL，變異系數(CV)分別為：CV批內=1.56%，CV批間=2.30%；PCT中值樣本檢測均值為8.30 ng/mL，CV批內=2.23%，CV批間=3.05%；低值和中值樣本CV批內、CV批間均符合廠家提供的標準(CV批內≤5%，CV批間≤10%)。

2.2線性評價結果PCT的多點線性回歸方程為：Y=0.997 22X+0.173 77，r2=0.998 12。新產業化學發光法檢測PCT在0.5～98.0 ng/mL濃度范圍內線性良好。

2.3攜帶污染率選擇PCT高值(H)為60.0 ng/mL和低值(L)為5.0 ng/mL的樣本進行檢測，H1～H3結果分別為61.5、59.6、60.8 ng/mL，L1～L3結果分別為5.2、5.1、4.7 ng/mL；攜帶污染率(%)=(5.2-4.7)/(60.8-4.7)×100=0.89。高值樣本對低值樣本的結果無明顯攜帶污染。

2.4相關性分析結果以梅里埃熒光免疫分析法2次測定結果均值為參比，新產業化學發光法2次測定結果均值為比較方法，直線回歸方程為Y=1.004X+0.005 59，r2=0.999 58，兩種方法測定相關性良好。

3討論

據WHO統計數據顯示，感染是造成人類死亡最重要的因素之一，約占全球每年總體病死率的25.5%。感染性疾病在臨床主要包括細菌性和病毒性感染，傳統的實驗室診斷包括白細胞計數、淋巴細胞計數、CRP等炎癥指標、胸部影像及相關病原菌培養，但存在不能客觀反映感染嚴重程度、敏感性不高、特異性差、陽性率低、耗時長等諸多缺點[7]，不利于疾病的早期診斷及治療干預。而PCT在感染發生3 h即可測得，6～12 h可達高峰，且幾乎不受腎功能狀態、激素治療的影響，可反映炎癥活動情況及嚴重程度，具有更高的敏感性和特異性[8]，作為一種新型炎癥標志物，近年來在臨床應用十分廣泛。

目前，PCT檢測方法眾多，且多以進口試劑為主，如羅氏、西門子、生物梅里埃等，但這些試劑與所用儀器采用封閉式系統，即儀器與試劑必須配套使用方可保證檢驗結果的準確性，因此檢驗試劑價格昂貴，故而如果在基層醫院采用進口儀器設備進行該項目的檢測，無疑增加了醫療成本。與之相對的是，成本較低的國產儀器及試劑盒，但國產試劑盒的檢測效能需要進行驗證。本次試驗采用國產儀器及配套試劑進行PCT的檢測，試驗結果顯示：采用品牌為新產業的化學發光檢測系統進行PCT的檢測，其精密度良好，低值樣本的不精密度為CV批內=1.56%，CV批間=2.30%；中值樣本為CV批內=2.23%，CV批間=3.05%，均小于廠家提供的CV批內≤5%，CV批間≤10%，完全符合有關規定要求。在0.5～98.0 ng/mL濃度范圍內線性良好，Y=0.997 22X+0.173 77，r2=0.998 12，該濃度范圍為臨床患者檢測的常見范圍，可以滿足臨床診斷要求。檢測系統攜帶污染率為0.89%，低于3%的要求，樣本間交叉污染小，不會因為上一個較高濃度的PCT樣本，引起下一個低濃度樣本升高，因此可以滿足檢測要求；通過與靶標儀器梅里埃mini VIDAS熒光免疫分析儀進行比較，結果呈明顯相關，Y=1.004X+0.005 59，r2=0.999 58。

綜上所述，在新產業MAGLUMI4000化學發光儀上檢測PCT的性能良好，不會出現不正確或錯誤的檢驗結果，且成本較進口試劑低廉，操作簡便，可以單個或批量檢測，每小時可完成上百個測試，完全可滿足臨床使用，對于提高臨床細菌感染的診斷水平，降低醫療成本都具有十分重要的意義。

參考文獻

[1]曹艷林，劉德貝，夏先考．新生兒肺炎合并膿毒癥患兒檢測血清降鈣素原和高敏C反應蛋白的臨床價值[J]．檢驗醫學，2014，29(10)：1000-1003．

[2]曹校校，李強，陳榮．降鈣素原與 C-反應蛋白聯合檢測在成人細菌性肺炎中的臨床評價[J]．中華醫院感染學雜志，2014，24(19)：4933-4935．

[3]Ramirez P,Garcia MA,Ferrer M,et al.Sequential measurements of procalcitonin levels in diagnosing ventilator-associated pneumonia[J].Euro Respir J,2008,31(2):356-362.

[4]CLSI.EP5-A2 Evaluation of percision perfirmance of quantitative measurement methods[S].2nd ed.Wayne，PA:CLSI,2004.

[5]CLSI.EP6-A Evaluation of the linearity of quantitative measurement procedures:A statistical approach[S].Wayne，PA:CLSI,2003.

[6]CLSI.EP9-A2 Method comparision and bias estimation using patient samples[M].2nd ed.Wayne， PA:CLSI,2002.

[7]陸一鳴．降鈣素原PCT感染診治新技術[J]．國際檢驗醫學雜志，2013，34(20)：2641-2642．

[8]吳修宇，鄧夢，黎楊楊，等．降鈣素原在感染性疾病中的臨床意義[J]．檢驗醫學與臨床，2014，11(1)：75-77．

DOI:10.3969/j.issn.1673-4130.2016.14.040

文獻標識碼：A

文章編號：1673-4130(2016)14-1998-02

(收稿日期：2016-01-11修回日期：2016-03-20)