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豬流行性腹瀉病毒病的診治

2016-03-11 08:42:49王曉明
甘肅畜牧獸醫(yī) 2016年15期
關(guān)鍵詞:檢測方法

王曉明

(山東省博興縣畜牧獸醫(yī)局,山東博興 256500)

豬流行性腹瀉病毒病的診治

王曉明

(山東省博興縣畜牧獸醫(yī)局,山東博興256500)

山東省博興縣某規(guī)模豬場新生仔豬發(fā)生了一起以嚴重腹瀉、脫水、嘔吐為主要特征的疫病,通過發(fā)病情況、臨床癥狀、病理變化等臨床診斷以及RT-PCR等實驗室檢測,最終確定致病原為豬流行性腹瀉病毒。通過采取系列針對性治療措施,病情得到了有效控制。

豬流行性腹瀉病毒;診斷;治療

豬流行性腹瀉(porcine epidemic diarrhea,PED)是由豬流行性腹瀉病毒(porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)引起豬的一種急性、高度接觸性腸道傳染病[1],該病可以導(dǎo)致豬的嚴重腹瀉,引起生產(chǎn)性能下降,嚴重的可導(dǎo)致死亡,是威脅養(yǎng)豬業(yè)的重要病毒性傳染病。近幾年,我國豬場發(fā)生豬流行性腹瀉病毒感染的報道日益增多[2.3],給我國養(yǎng)豬業(yè)帶來了嚴重的經(jīng)濟損失。2015年10月,山東省博興縣某規(guī)模豬場新生仔豬發(fā)生了一起以嚴重腹瀉、脫水、嘔吐為主要特征的疫病,通過發(fā)病情況、臨床癥狀、病理變化等臨床診斷以及RT-PCR等實驗室檢測,最終確定致病原為豬流行性腹瀉病毒。根據(jù)診斷結(jié)果,對豬場發(fā)病豬采取對癥治療,全部豬群進行緊急疫苗免疫接種,同時對豬場進行嚴格的衛(wèi)生消毒,豬場的病情得到有效控制。

1 發(fā)病情況

2015年10月,山東省博興縣某豬場所飼養(yǎng)的哺乳仔豬率先發(fā)病,主要表現(xiàn)為嘔吐、腹瀉、脫水,同圈仔豬發(fā)病率達100%,隨后向不同圈仔豬蔓延,發(fā)病后曾用抗生素治療無效,該豬場未進行過豬病毒性腹瀉疫病相關(guān)疫苗的免疫。

2 臨床癥狀

發(fā)病仔豬精神沉郁,食欲下降,水樣腹瀉,糞便黃綠色,脫水,嘔吐,機體極度消瘦,但體溫正常。仔豬發(fā)病后2~3d內(nèi)死亡,發(fā)病率達80%以上,死亡率在50%以上。

3 病理變化

取病死仔豬進行剖檢,可見病變主要在小腸,尸體脫水明顯,胃內(nèi)有尚未消化的乳凝塊,胃底黏膜出血,腸內(nèi)充滿黃綠色液體,腸壁變薄,腸管變透明,腸系膜充血嚴重,淋巴結(jié)腫脹。

4 實驗室檢測

取病死豬的腸黏膜等病變組織剪碎,以1∶3比例加入滅菌生理鹽水后研磨,12 000 rpm/min離心10 min,取上清液利用病毒基因組RNA提取試劑盒(購自北京百泰克生物技術(shù)有限公司)提取病料組織的基因組RNA。根據(jù)參考文獻[4]分別合成擴增PEDV、TGEV、RV的特異性檢測引物,以提取的組織病料病毒基因組RNA為模板,按照參考文獻[4]中的RT-PCR反應(yīng)程序,利用一步法RT-PCR擴增試劑盒(購自大連寶生物工程有限公司)進行RT-PCR擴增,RT-PCR擴增產(chǎn)物經(jīng)1%瓊脂糖凝膠電泳顯示,RT-PCR擴增產(chǎn)物在347 bp的位置出現(xiàn)特異性的擴增條帶,與PEDV檢測引物的預(yù)期擴增片段大小一致,而TGEV、RV的檢測引物均沒有擴增產(chǎn)物。

5 綜合診斷結(jié)果

經(jīng)發(fā)病情況、臨床癥狀、病理變化等臨床診斷以及RT-PCR等實驗室檢測,確診此次疫病由感染豬流行性腹瀉病毒所致。

6 治療措施

確診豬場致病原為豬流行性腹瀉病毒后,采取了仔豬保溫、豬場嚴格消毒、仔豬及時補液、緊急免疫接種等一系列措施:消毒措施,對圈舍、器具等進行全面徹底消毒;保溫,保持豬舍溫度高于正常溫度1℃以上;補液,發(fā)病豬群普遍使用優(yōu)質(zhì)口服補液鹽(購自重慶方通動物藥業(yè)有限公司),防止進一步脫水;防繼發(fā)感染,發(fā)病豬群普遍使用痢菌凈(購自重慶方通動物藥業(yè)有限公司),防止繼發(fā)細菌感染;疫苗免疫,對全場豬群緊急免疫接種豬流行性腹瀉病毒活疫苗(購自哈爾濱維科生物技術(shù)開發(fā)公司)。采取上述治療措施后,豬場的發(fā)病率和死亡率迅速大幅度降低,2周后疫情得到緩解,豬場重新步入穩(wěn)定狀態(tài)。

7 討論

PEDV與豬傳染性胃腸炎病毒(Transmissible gastroenteritis virus,TGEV)、輪狀病毒(Rotavirus,RV)感染的臨床癥狀和病理變化均極其相似,且常常存在混合感染以及一些細菌的繼發(fā)感染,增加了臨床鑒別診斷的難度,僅憑發(fā)病情況、臨床癥狀、病理變化等很難作出確診,確診還需借助實驗室診斷方法。其中RT-PCR檢測方法能夠檢測到病毒基因組特定的核苷酸序列,具有血清學(xué)診斷方法無法比擬的準確性,且該方法操作簡單、檢測快速、敏感性高、特異性強,是目前動物疫病診斷中常用的快速檢測技術(shù)[5]。故本研究利用曹玉琴等[4]的PEDV-TGEV-RV多重RT-PCR鑒別檢測方法對臨床病例進行了確診,曹玉琴等[4]方法對PEDV、TGEV和RV能分別擴增出大小為347、779和510 bp的預(yù)期片段,靈敏度高,最低可以檢測約1.5× 105拷貝的陽性RNA模板,特異性強,對豬瘟病毒、豬繁殖與呼吸綜合征病毒、日本腦炎病毒和偽狂犬病病毒的檢測均為陰性,是一種簡便、快速、鑒別檢測PEDV、TGEV和RV的有效方法。故本研究選擇曹玉琴等[4]的方法作為PEDV感染的確診方法,使本研究診斷的可靠性和準確性大大提高。

本病目前還沒有特效治療藥物,應(yīng)采取以加強飼養(yǎng)管理和疫苗免疫接種為主的綜合性預(yù)防控制措施,豬場一旦發(fā)生豬流行性腹瀉病毒感染后應(yīng)采取對癥療法,減輕失水和酸中毒,防止細菌繼發(fā)感染,加強護理,做好防寒保暖,可以按照仔豬體重肌肉注射高免血清進行被動治療,對失水過多的病豬,靜脈滴注葡萄糖和格林氏液。

[1]劉政龍,王金良,沈志強.豬流行性腹瀉病毒研究進展[J].中國畜牧獸醫(yī),2015,42(9):2506-2511.

[2]劉小蘭,賀筍,陳蘭玲,等.豬流行性腹瀉病毒(XJ-DB2)株的分離鑒定[J].中國獸醫(yī)雜志,2016,52(1):19-21.

[3]張生祥,馬文瑞,包守泰,等.一例豬流行性腹瀉病毒的分離與鑒定[J].黑龍江畜牧獸醫(yī),2015,(20):109-110.

[4]曹玉琴,付丹,楊堯,等.PEDV-TGEV-RV多重RT-PCR鑒別檢測方法的建立及應(yīng)用[J].中國獸醫(yī)科學(xué),2015,45(9):5-11.

[5]楊麗梅,馬力,徐倩倩,等.我國豬病毒性腹瀉的診斷與流行病學(xué)調(diào)查研究概況[J].動物醫(yī)學(xué)進展,2014,35(2):115-119.

(編輯:晏兵兵)

S858.28

A

1006-799X(2016)15-0062-02

王曉明(1976-),男,山東博興人,助理獸醫(yī)師,主要研究方向為畜牧獸醫(yī)。

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