檳榔江水?！つ：秃伤固鼓膛Ｑ逯?種激素含量的測定

劉超英，賀珠婷，2，張永云，俞大闊，彭 潔，苗永旺，霍金龍，尹康玲，和紹禹，李衛(wèi)真*

(1.云南農(nóng)業(yè)大學動物科學技術(shù)學院，云南昆明 650201；2.湖南省攸縣畜牧水產(chǎn)局，湖南攸縣 412300；3.云南農(nóng)業(yè)大學，農(nóng)科專業(yè)基礎(chǔ)實驗教學示范中心，云南昆明 650201；4.云南省騰沖市畜牧獸醫(yī)局，云南騰沖 679100；5.云南農(nóng)業(yè)大學，東方蜜蜂研究所，云南昆明 6502014)

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檳榔江水?！つ：秃伤固鼓膛Ｑ逯?種激素含量的測定

劉超英1，賀珠婷1，2，張永云3，俞大闊1，彭 潔1，苗永旺1，霍金龍1，尹康玲4，和紹禹5，李衛(wèi)真1*

(1.云南農(nóng)業(yè)大學動物科學技術(shù)學院，云南昆明 650201；2.湖南省攸縣畜牧水產(chǎn)局，湖南攸縣 412300；3.云南農(nóng)業(yè)大學，農(nóng)科專業(yè)基礎(chǔ)實驗教學示范中心，云南昆明 650201；4.云南省騰沖市畜牧獸醫(yī)局，云南騰沖 679100；5.云南農(nóng)業(yè)大學，東方蜜蜂研究所，云南昆明 6502014)

摘要[目的] 為檳榔江水牛的進一步研究和開發(fā)利用積累理論數(shù)據(jù)。[方法] 采用化學發(fā)光法對檳榔江水牛血清中3種激素(PRL、INS和GH)的含量進行測定，并與摩拉水牛和荷斯坦奶牛進行比較。[結(jié)果] 檳榔江水牛血清中GH含量為0.017 9 ng/mL，低于摩拉水牛(0.023 7 ng/mL)，略高于荷斯坦奶牛(0.017 8 ng/mL)，但差異均不顯著(P>0.05)。檳榔江水牛血清中PRL含量為0.120 0 ng/mL，與荷斯坦奶牛差異不顯著(P> 0.05)，但顯著低于摩拉水牛(P< 0.05)。檳榔江水牛血清中INS含量為0.740 0 μU/mL，均低于荷斯坦奶牛和摩拉水牛，其中與荷斯坦奶牛差異顯著(P< 0.05)。[結(jié)論] 在泌乳方面，檳榔江水牛與摩拉水牛和荷斯坦奶牛有相同的優(yōu)越性。

關(guān)鍵詞檳榔江水牛；摩拉水牛；荷斯坦奶牛；催乳素；胰島素；生長激素

檳榔江水牛是我國唯一一種河流型水牛[1]，而云南省騰沖縣獨特的氣候環(huán)境為其繁育提供了有利的條件，該水牛在亞熱帶及溫帶的氣候條件下均能發(fā)揮其正常的優(yōu)勢，在亞熱帶條件下檳榔江水牛的產(chǎn)奶性能表現(xiàn)突出。2008年7月11日檳榔江水牛通過了國家畜禽遺傳資源委員會鑒定，專家組一致認為它是發(fā)展我國水牛乳業(yè)和云南特色畜牧業(yè)的寶貴種質(zhì)資源[2]。目前，對檳榔江水牛的生產(chǎn)性能[3-4]、種質(zhì)資源[5]、遺傳結(jié)構(gòu)[6-12]等已有一些相關(guān)研究報道，但對其血清中催乳素(Prolactin，PRL)、胰島素(Insulin，INS)和生長激素(Growth hormone，GH)的測定尚未見報道。為了實現(xiàn)對檳榔江水牛的進一步研究和開發(fā)利用，筆者對3種激素(PRL、INS、GH)水平進行了測定，并與摩拉水牛和荷斯坦奶牛的激素水平進行比較，以期為檳榔江水牛的研究和開發(fā)積累更多的理論基礎(chǔ)。

1材料與方法

1.1試驗材料選取年齡、胎次、泌乳時間接近的健康成年泌乳的檳榔江水牛、摩拉水牛和荷斯坦奶牛各10頭。檳榔江水牛從云南省騰沖縣巴福樂檳榔江水牛良種繁育有限公司選取，摩拉水牛從大理州家畜繁育指導站奶水牛場選取，荷斯坦奶牛從彌渡縣金潤良種奶牛場選取。每頭牛于清晨空腹采集血樣10 mL，4 000 r/min離心15 min后分離血清，分裝后于-20 ℃下保存至分析。

1.2試劑與儀器Siemens Healthcare Diagnostics Inc激素測定試劑盒；Sinmens IMMULITE 2000分析儀等。

1.3試驗方法 從檳榔江水牛、摩拉水牛和荷斯坦奶牛采集血清，每頭采集1.8 mL,采用化學發(fā)光法測定3種激素(PRL、INS、GH)的含量。

2結(jié)果與分析

2.1GH含量由表1可知，荷斯坦奶牛血清中GH含量為(0.017 8±0.007) ng/mL，低于檳榔江水牛和摩拉水牛，但差異均不顯著(P> 0.05)。

2.2PRL含量由表1可知，檳榔江水牛血清中PRL含量為(0.120 0±0.069 0) ng/mL,與荷斯坦奶牛差異不顯著(P> 0.05)，但均顯著低于摩拉水牛(P< 0.05)。

2.3INS含量由表1可知，檳榔江水牛血清中INS含量為(0.740 0±0.420 0) μU/mL，均低于荷斯坦奶牛和摩拉水牛，其中與荷斯坦奶牛差異顯著(P< 0.05)，而與摩拉水牛差異不顯著(P> 0.05)。

表1　檳榔江水牛、摩拉水牛和荷斯坦奶牛血清中3種激素的含量

注：同列不同小寫字母表示差異顯著(P< 0.05)。

Note：Different lowercases in the same row indicated significant differences (P< 0.05).

3討論與結(jié)論

迄今為止，檳榔江水牛是我國境內(nèi)發(fā)現(xiàn)的唯一的河流型水牛，這一發(fā)現(xiàn)打破了我國水牛品種均為沼澤型水牛的單一局面，也為我國水牛業(yè)的進一步發(fā)展提供了空間，是發(fā)展高品質(zhì)、高質(zhì)量水牛奶的寶貴資源，因此研究和開發(fā)檳榔江水牛泌乳具有重要意義。有學者認為，PRL、INS與GH在乳腺的泌乳過程中起著重要的作用，其中GH及PRL參與乳腺的生長發(fā)育及泌乳，而INS與營養(yǎng)分配相關(guān)[13]。

PRL是一種重要的泌乳激素，是脊椎動物腺垂體分泌的一種單鏈多肽類激素，存在于動物的乳腺、黃體及肝臟等組織器官中，在乳汁的主要成分(如乳蛋白、乳脂及乳糖等)合成中起著重要的作用。PRL不僅可以促進某些氨基酸的吸收、乳腺小葉腺泡的生長和上皮細胞的增殖，而且能通過內(nèi)分泌、旁分泌和自分泌等方式來維持動物機體的正常免疫功能，同時維持免疫器官的正常生長，調(diào)節(jié)細胞免疫和體液免疫[10,14]。目前，PRL促進乳腺發(fā)育和泌乳主要是作用于乳腺的催乳素受體，上調(diào)雌二醇和孕酮的受體表達、誘導肝或其他組織器官產(chǎn)生催乳素協(xié)同因子。催乳素主要通過影響乳腺的導管系統(tǒng)和腺泡、乳腺上皮細胞等組織來發(fā)揮其作用。PRL的分泌受到下丘腦催乳素抑制因子和催乳素釋放因子及其他因素的影響。研究表明，在小鼠體內(nèi)多巴胺活性的降低可使血清中PRL的含量維持在較高水平上。在不同的生長階段PRL發(fā)揮著不同的作用，從而也導致在不同的年齡發(fā)育階段血清中PRL的含量也會有所不同[14-15]。PRL是一種多效能的激素，對機體中的能量平衡及物質(zhì)代謝都存在一定的影響。該研究結(jié)果表明檳榔江水牛血清中PRL含量與荷斯坦奶牛差異不顯著(P>0.05)，卻顯著低于摩拉水牛(P<0.05)。

INS是一種異二聚體激素，其主要作用是分解葡萄糖來提供組織器官所需的能量和促進脂肪的合成，從而維持血糖的平衡[16-17]。胰島素受體是生長因子受體的家族成員，由2個α和2個β亞基構(gòu)成。INS的主要作用是激活胰島素亞基受體，通過配體的約束力和自動磷酸化的誘導，從而促使胰島素蛋白位點的形成，進一步促進乳腺細胞泌乳的生物合成。在正常的生理條件下，INS對乳腺的發(fā)育沒有形成直接的影響，當其含量超出生理劑量時，對乳腺的發(fā)育又是必需的，INS只與乳腺泌乳營養(yǎng)的分配有關(guān)，血液中INS的濃度與泌乳量呈負相關(guān)[14]。INS的主要作用是通過分解葡萄糖來給機體提供能量，促進機體內(nèi)脂肪的合成。研究表明，牛乳腺中的脂類、糖和蛋白質(zhì)的攝取對INS不產(chǎn)生依賴性，但與乳汁合成和機體組織器官形成有關(guān)；INS對圍產(chǎn)期奶牛的mRNA表達也有著至關(guān)重要的作用[18-19]。該試驗結(jié)果表明檳榔江水牛血清中INS含量低于摩拉水牛，但差異不顯著(P>0.05)，而與荷斯坦奶牛差異顯著(P<0.05)。

GH是控制動物生長發(fā)育的主要激素，促進乳腺的生長發(fā)育。GH對生長的控制必須通過生長激素受體及類胰島素生長因子-Ι(Insulin-like growth factor I，IGF-Ι)的作用才能實現(xiàn)，IGF-Ι是GH促進生長的最重要的介導物。動物試驗表明營養(yǎng)不良導致生長受阻往往伴隨著血漿GH水平升高和IGF-Ι水平下降[20-23]。Connor 等[24]研究表明GH作用主要是通過調(diào)節(jié)乳腺及乳腺外組織間的營養(yǎng)競爭調(diào)控來影響乳腺的發(fā)育，并且在性成熟期GH能協(xié)同雌二醇促進乳腺導管的生長。GH能增強機體代謝的作用，所以在幼畜中含量較高。同時，GH還能抑制脂肪的堆積。Tucker等[25]研究表明性成熟的山羊在妊娠初期激素敏感脂肪酶表達水平很高，脂代謝非常旺盛，乳腺細胞內(nèi)脂肪堆積，GH的低水平表達十分有利于該過程的進行。李真等[13]研究發(fā)現(xiàn)GH在妊娠中后期時含量增加，說明其與體內(nèi)的能量代謝有關(guān)，GH能調(diào)節(jié)血流的分配，增加乳腺內(nèi)的血流量，使得營養(yǎng)成分隨血流向乳腺集中，因此GH含量與泌乳量呈正相關(guān)。該試驗結(jié)果表明，3種牛血清中GH含量差異不顯著(P>0.05)說明檳榔江水牛在泌乳方面與摩拉水牛和荷斯坦奶牛有相同的優(yōu)越性。

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Content Determination of Three Kinds of Hormones in the Serum of Binlangjiang Buffalo，Murrah Buffalo and Holstein Cow

LIU Chao-ying1，HE Zhu-ting1，2，ZHANG Yong-yun3，LI Wei-zhen1*et al (1.College of Animal Science and Technology，Yunnan Agricultural University，Kunming,Yunnan 650201; 2.Bureau of Animal Husbandry and Fishery in Youxian County of Hunan Province，Youxian,Yunnan 412300; 3.Teaching Demonstration Center of the Basic Experiments for Agriculture Discipline，Kunming,Yunnan 650201)

Abstract[Objective] To accumulate theoretical data for further study，development and utilization of Binglangjiang Buffalo.[Method] The content of three kinds of hormones (GH，INS and PRL) in the serum of Binglangjiang Buffalo was determined，and they were compared with Murrah Buffalo and Holstein Cow.[Result] The content of GH in the serum of Binglangjiang Buffalo was 0.017 9 ng/mL，which was lower than that in Murrah Buffalo(0.0237 ng/mL) and higher than that in Holstein Cow(0.0178 ng/mL)，but there was no significant difference(P>0.05).PRL content in the serum of Binglangjiang Buffalo was 0.120 0 ng/mL，which had no significant difference with that in Holstein Cow(P>0.05)，but it was significantly lower than that in Murrah Buffalo (P< 0.05).The content of INS in the serum of Binglangjiang Buffalo was 0.740 0 μU/mL，which was lower than that in Binglangjiang Buffalo and Holstein Cow，and there was significant difference between Binglangjiang Buffalo and Holstein Cow(P< 0.05).[Conclusion] As for the lactating performance，Binglangjiang Buffalo had the same superiority with Murrah Buffalo and Holstein Cow.

Key wordsBinlangjiang Buffalo; Murrah Buffalo; Holstein Cow; PRL; INS; GH

收稿日期2015-12-21

作者簡介劉超英(1992-)，女，河南安陽人，碩士研究生，研究方向：特種經(jīng)濟動物飼養(yǎng)。賀珠婷(1987-)，女，湖南邵陽人，碩士，從事動物生產(chǎn)與疾病防治工作。劉超英和賀珠婷為同等貢獻作者。*通訊作者，教授，碩士，碩士生導師，從事動物生物化學研究。

基金項目國家自然科學基金項目(31460649，31460582)；云南省應(yīng)用基礎(chǔ)研究重點項目(2014FA032);云南農(nóng)業(yè)大學科技創(chuàng)新創(chuàng)業(yè)行動基金項目(2016ZKX037)。

中圖分類號S 852.5

文獻標識碼A

文章編號0517-6611(2016)02-076-03