Vitros5600檢測血漿肌鈣蛋白I 穩定性及假陽性的原因分析

左　軍，宋曉冬，徐建華

(吉林省長春市一汽總醫院/吉林大學第四醫院檢驗科，吉林長春 130011)

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·經驗交流·

Vitros5600檢測血漿肌鈣蛋白I 穩定性及假陽性的原因分析

左軍，宋曉冬，徐建華

(吉林省長春市一汽總醫院/吉林大學第四醫院檢驗科，吉林長春 130011)

摘要:目的探討Vitros5600檢測肌鈣蛋白I(CTNI)中存在的假陽性及不穩定因素。方法選取今年5月份出現重復性差，假陽性的20份標本進行比較分析。結果20份標本中，有些標本首次檢測結果偏高，有的甚至達到危急值，而當再次復檢后結果正常或略高，與第一次檢測結果相差甚遠。結論Vitros5600檢測CTNI重復性差、假陽性及不穩定性結果是多方面因素所致，為了保證結果的準確性和可信度，必須從標本采集到實驗室檢測均嚴格按照操作規程進行。

關鍵詞:肌鈣蛋白I；不穩定性；假陽性

由于心肌肌鈣蛋白(CTN)特異地分布于心肌組織，作為心肌損傷的高敏感和特異性標志物，CTN對于檢測急性冠狀動脈綜合征患者心肌缺血及危險分級具有重要意義。目前檢測CTN的方法很多，如電化學發光免疫檢測法(ECLIA) 、酶聯熒光分析法等[1]。Vitros5600進行血漿CTNI定量檢測已被廣泛應用，它采用的是intelliccheck技術(化學發光法)應用特異性免疫檢測單克隆抗體[2-3]。其敏感度很高，線性范圍在0.003～66.700 μg/L，檢測結果的穩定性顯得尤為重要。本文主要探討關于使用Vitros5600檢測CTNI時，發現的不穩定及其假陽性的一些問題，以示在報告結果時應該加以注意，防止誤報。

1材料與方法

1.1儀器與試劑美國強生Vitros5600生化免疫分析儀及檢測試劑、定標液、質控品。

1.2檢測方法在經過儀器調試定標完成之后，進行質控檢測，質控在控后進行標本檢測。采集患者新鮮無溶血、乳糜、黃疸的全血4 mL，離心，用血清進行直接檢測。

1.3統計學處理采用Excel2007軟件進行數據處理及統計學分析。

2結果

在本院使用Vitros5600 2年期間檢測患者CTNI，選取今年5月份出現重復性差，假陽性的20份標本進行比較分析，研究發現有些標本首次檢測結果偏高，有的甚至達到危急值，而再次復檢后結果正常或略高，與第一次檢測結果相差甚遠，見表1。

表1　　20份重復檢測2次標本及同時定值質控品反測結果

3討論

本研究結果顯示，在使用Vitros5600檢測患者血清CTNI一段時間后，某一階段頻繁出現重復性差、穩定性差及假陽性，而質控和批量檢測對比竟然沒有明顯變化。其中，在今年5～6月份檢測的1 200份標本中假性升高總數為50例，占4.12%，最為明顯。而真正由心肌梗死問題和其他心臟疾病方面原因引起的升高患者僅占35%，其余患者經過二次復檢證實為正常結果。為什么會出現首次檢測結果與再次復檢存在較大差異呢？筆者考慮是不是由于試劑批號不同所引起的差異，然而，采用不同批號的試劑進行比對也沒有發現明顯差異。對此也用健康患者血清進行了比對，也沒有發現很大的差異，連續進行標本的重復性檢測結果顯示穩定。之后筆者考慮是不是由于儀器設備本身的因素，例如光源、檢測模塊、吸樣針、吸樣量等多方面因素造成的，更換相關儀器部件，再進行檢測，也沒有發現具體引起這種現象的主要因素。

從標本采集開始，仔細研究是不是由于采血量、離心力及離心時間不夠，或者由于纖維蛋白凝塊，或者有極微小的凝塊所致。筆者對每一份標本離心后采用手工方式徹底分離血清以達到減少微凝到最低程度的目的。此外，同樣選取無溶血、無乳糜、無黃疸的標本進行檢測，同時也考慮到藥物方面的影響，以及臨床護士采集標本時的一些影響因素，經過分離血清用測試小杯將血清分離進行測試，但還是或多或少，不定期地出現2次檢測結果不符及假陽性的現象。

之后筆者考慮過多的分離步驟也許會影響結果的重復性及穩定性，采用增加標本采集量的方法，每份標本采血量不少于4 mL，離心時間不少于8 min，離心速度不低于4 000 r/min，待血清完全分離好后直接上機檢測。經過這些嘗試后雖然出現假陽性頻率略低，但還是存在一定的假陽性率。

經過和廠家技術人員共同分析，以及從他們那兒吸取經驗，考慮到室內環境的塵埃是不是也會影響到結果的穩定性。因此，本院檢驗科定期清潔空調，并且在機房內加裝空氣凈化器以減少對檢測時的影響。綜合上訴各種原因，筆者認為造成這種重復性差、假陽性及不穩定性結果是多方面因素所致。為了保證結果的準確性和可信度，必須從標本采集到實驗室檢測均嚴格按照操作規程進行。對于這種靈敏度高的檢測項目必須注意結果的監測，一方面在平時要做好儀器設備的保養維護，另一方面對于不同批號的試劑應做對比，堅持做好室內質控及室間質評。

參考文獻

[1]張志榮，李強.老年膿毒癥患者血漿BNP和肌鈣蛋白I檢測的臨床價值[J].中國現代醫生,2015，9(19):19-21.

[2]張振輝，陶麗麗，陳偉燕，等.肌鈣蛋白-I、B型利鈉肽、血乳酸對膿毒癥心功能障礙患者嚴重程度及預后評估的價值[J]. 實用醫學雜志，2014，33(9):1424-1426.

[3]李振華，董磊，王國興，等.腦利鈉肽、肌鈣蛋白T和I監測對重癥膿毒癥和膿毒癥休克預后的意義[J].中華急診醫學雜志, 2012, 21(9):1016-1021.

(收稿日期：2015-10-18)

DOI:10.3969/j.issn.1673-4130.2016.03.063

文獻標識碼：B

文章編號：1673-4130(2016)03-0419-02