MEK-8222k血細胞分析儀性能驗證及評價

禚金花，劉振軍，吳　冰，劉秀榮

(山東省交通醫院檢驗科，山東濟南 250031)

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·臨床研究·

MEK-8222k血細胞分析儀性能驗證及評價

禚金花，劉振軍，吳冰，劉秀榮

(山東省交通醫院檢驗科，山東濟南 250031)

摘要:目的評價MEK-8222k血細胞分析儀的主要性能。方法通過本底檢測、準確度、精密度、攜帶污染率、線性范圍及WBC分類的重復性、正確度、異常標本的報警等試驗對MEK-8222k血細胞分析儀性能進行驗證。結果MEK-8222k血細胞分析儀的本底值低，WBC、RBC、Hb、HCT、PLT的批內、批間精密度均在允許范圍以內，攜帶污染率低，準確度高，線性范圍良好，WBC分類與顯微鏡分類的相關性隨細胞種類有差異。結論MEK-8222k全自動血細胞分析儀各方面性能良好，符合實驗室血細胞分析儀的性能要求，適用于臨床血細胞分析的檢驗。

關鍵詞:血細胞分析儀；精密度；準確度；攜帶污染率；線性范圍

MEK-8222k全自動血細胞分析儀是由日本光電公司生產的多功能、多參數、全自動血細胞分析儀器，該儀器應用流式細胞技術和電阻抗技術的雙重原理進行血細胞計數，并可對幼稚細胞、異形淋巴、有核紅細胞及血小板聚集等多種異常情況進行報警和提示，具有檢測速度快、標本需要量少、檢測項目全、自動化程度高、操作維護簡便等特點。按照新版CNAS-CL43 2012《醫學實驗室質量和能力認可準則》[1]，參考有關資料[2-6]，結合實際工作，筆者對本院的MEK-8222k全自動血細胞分析儀檢測白細胞(WBC)、紅細胞(RBC)、血紅蛋白(Hb)、血小板(PLT)、紅細胞壓積(HCT)等主要項目進行性能評價，現將結果報道如下。

1材料與方法

1.1標本來源收集本院門診和住院患者不同濃度范圍內標本進行檢測。

1.2儀器與試劑日本光電公司生產MEK 8222k全自動血細胞分析儀，以及配套試劑和配套質控品。

1.3本底計數

1.3.1本底計數檢測要求血細胞分析儀本底計數各參數的結果應符合以下要求：WBC≤0.5×109/L，RBC≤0.05×1012/L，Hb≤2.0 g/L，PLT≤10×109/L。

1.3.2驗證方法用稀釋液作為標本在分析儀上連續檢測3次，3次檢測結果的最大值應在允許范圍內。

1.4精密度評價

1.4.1批內精密度取濃度分別處于正常和病理水平的新鮮臨床標本，按照相同的檢測方法，同批次內檢測相同的21份混合新鮮臨床標本。剔除第一個數據，記錄后20次結果并計算均值、標準差和批內變異系數(CV)。

1.4.2批間精密度取濃度分別處于正常和病理水平的室內質控品，連續檢測20 d。記錄結果，計算均值、標準差和批間精密度CV。

1.4.3結果判斷批內、批間精密度要求相應范圍內，見表1。批內精密度CV≤1/4室間質量評價標準(EQA)，批間精密度CV≤1/3EQA，各檢測項目批內及批間精密度若符合以上標準，代表驗證通過，可以進行該項目常規檢測。若不符合，需進一步分析儀器的批內和批間精密度與廠家給出的相關精密比較差異有無統計學意義，并聯系生產廠家查找可能的原因。

表1　　精密度判定標準(%)

1.5準確度根據原衛生部臨檢中心室間質評結果對血細胞分析項目進行準確度評估，成績100分的在80%以上者即為驗證通過。

1.6攜帶污染率

1.6.1試驗方案取高濃度血液標本，混合均勻后連續檢測3次，檢測值分別為H1、H2、H3；再取低濃度血液標本，連續檢測3次，檢測值分別為L1、L2、L3。按下列公式計算攜帶污染率：攜帶污染率(%)=[(L1-L3)/(H3-L3)]×100%。

1.6.2要求各參數攜帶污染率結果必須符合相關要求[2]：WBC≤3.0%，RBC≤2.0%，Hb≤2.0%，PLT≤4.0%。

1.6.3臨床標本的要求不同檢測項目所選高、低濃度標本的濃度水平應符合相關要求，見表2。

表2　　攜帶污染率驗證標本的濃度要求

1.7線性范圍

1.7.1試驗方案收集臨床上各參數的高值標本(也可以用商業線性品替代)，要求高值越接近儀器線性高限越好，使用配套稀釋液分別按照100%、80%、60%、40%、20%的濃度進行稀釋，每個濃度測試3次，取測試均值，將測試均值與理論值進行比較，計算r2和回歸方程式。

1.7.2判定標準r2≥0.95，斜率在1.00±0.05范圍內，則判斷為線性范圍驗證通過。

1.8WBC分類的鑒定

1.8.1重復性取1份抗凝血在MEK 8222k重復檢測10次，計算CV值。

1.8.2正確度取20份住院患者的抗凝血分別在MEK 8222k儀器上檢測，每份標本重復檢測2次取均值。同時每份血液標本推2張符合質控要求的血片，染色后由2位有經驗的技師在體尾交界處進行WBC分類，分為中性粒細胞、淋巴細胞、單核細胞、嗜酸性粒細胞和嗜堿性粒細胞，每張血片油鏡分類計數200個WBC，共計400個WBC取均值，再與MEK 8222k儀器的WBC分類值進行比較。以MEK 8222k儀器WBC分類值為X軸、顯微鏡WBC分類值為Y軸，進行線性回歸，計算20份非白血病標本2種方法的MEK 8222k結果。

1.8.3異常細胞的檢測取40份顯微鏡下WBC分類異常血液標本，將這些標本在MEK 8222k儀器上檢測，檢測是否有相應報警信息。

2結果

2.1本底值用稀釋液作為標本在分析儀上連續檢測3次，3次檢測結果的最大值分別為WBC:0×109/L，RBC：0×1012/L，Hb：0 g/L，PLT：1×109/L，結果均在允許范圍內。

2.2精密度批內精密度CV≤1/4EQA，批間精密度CV≤1/3EQA，各檢測項目批內及批間精密度均符合標準，精密度試驗驗證通過。見表3(見《國際檢驗醫學雜志》網站主頁“論文附件”)。

2.3準確度準確度驗證結果均在室間質評允許范圍內，PT得分均為100%，見表4(見《國際檢驗醫學雜志》網站主頁“論文附件”)。

2.4攜帶污染率MEK 8222k攜帶污染率檢測結果見表5。

表5　　MEK 8222k攜帶污染率檢測結果

2.5線性范圍各參數的線性范圍見表6。WBC:y=0.986 8x+3.273 6;RBC:y=0.998 3x+0.123 2;Hb:y=0.979 5x+2.291 1;HCT:y=0.999 5x+1.083 9;PLT:y=0.975 1x+15.053。

表6　　MEK-8222K線性范圍

2.6WBC分類的鑒定

2.6.1重復性1份抗凝血重復檢測10次，中性粒細胞、淋巴細胞、單核細胞、嗜酸性粒細胞和嗜堿性粒細胞重復檢測的CV分別為1.93%、1.51%、6.47%、8.91%和19.98%。

2.6.2正確度以MEK 8222k儀器WBC分類值為X軸、顯微鏡WBC分類值為Y軸，進行線性回歸，中性粒細胞：y=0.985 6x+9.131 9，r=0.988 7；淋巴細胞：y=1.034x-4.541 2，r=0.975 8；嗜酸性粒細胞：y=0.939 9x-0.100 4，r=0.831 9；單核細胞：y=0.843 3x+1.662 3，r=0.878 7；嗜堿性粒細胞：y=0.898 7x+0.062，r=0.431 9。

2.6.3異常細胞的檢測40份顯微鏡下WBC分類異常血標本中，異型淋巴細胞比例增高(7%～25%)6份、嚴重感染和腫瘤放化療中出現核左移(晚幼粒細胞1%～7%)14份、白血病初診20份。這些標本在MEK 8222k儀器上檢測，異型淋巴細胞比例升高，嚴重感染和腫瘤放化療中出現核左移的標本既有WBC散點圖異常，又有報警提示；有幼稚細胞的白血病標本均有1個或/和多個報警提示及異常散點圖顯示。

3討論

選擇性能良好的檢測系統是保證患者檢測結果可靠性的前提[7]。根據美國臨床實驗室改進法案修正案(CLIA′88)規定，參加認可的實驗室，在開展某一檢測項目前，需提供并保留相關的方法學驗證實驗數據[8]。本實驗室參考相關資料，對MEK-8222k全自動血細胞分析儀主要性能進行驗證。

通過本次試驗表明，MEK-8222k全自動血細胞分析儀本底計數均在允許范圍內。高、中、低濃度的標本批內精密度均小于1/4EQA，批間精密度均小于1/3EQA，說明儀器的重復性良好，這是進行其他方法學驗證的前提。本試驗采用室間質評的數據作為評價檢測結果準確性的標準，各檢測項目結果均在室間質評的允許范圍內，說明該儀器測得結果準確可靠。攜帶污染率是反映高值標本對低值標本檢測結果影響程度的指標，本次試驗各檢測項目的攜帶污染率均在規定的允許范圍內。WBC、RBC、Hb、HCT、PLT線性良好，各檢測參數在各稀釋度時的實測值與理論值之間密切相關(r>0.95)。對WBC分類進行驗證的結果表明，中性粒細胞、淋巴細胞檢測的重復性好，單核細胞、嗜酸性粒細胞重復性較好，而嗜堿性粒細胞重復差，可能與其在血中數量太少，計數誤差大有關。顯微鏡WBC分類與儀器WBC分類對比，中性粒細胞、淋巴細胞相關性較好(r>0.97),單核細胞、嗜酸性粒細胞、嗜堿粒細胞r小，可能與單核細胞在血涂片中分布不均勻，嗜酸性粒細胞、嗜堿粒細胞數量少有關。儀器異常細胞報警功能真陽性率高，可結合復檢規則做好鏡檢復查工作，基本不影響臨床醫生對結果的判斷。

日本光電MEK-8222k全自動血細胞分析儀采用電阻抗法進行細胞計數，使用流式細胞技術進行WBC分類。儀器使用簡單直觀的觸摸屏操作，自帶質控程序，試劑用量少，成本低。經過驗證表明該儀器空白值低、準確度高、精密度好、攜帶污染率低、線性好，WBC分類的重復性及正確度較好，報警信息真陽性率高。

綜上所述，MEK-8222k全自動血細胞分析儀性能良好，可對批量標本快速準確處理，能較好地滿足實驗室需求。

參考文獻

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(收稿日期：2015-11-20)

DOI:10.3969/j.issn.1673-4130.2016.03.049

文獻標識碼：A

文章編號：1673-4130(2016)03-0397-03