75例唐氏綜合征胎兒的產前診斷分析*

黃　寧，劉艷秋，袁慧珍，黃婷婷

(江西省婦幼保健院產前診斷中心，江西南昌 330006)

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·臨床研究·

75例唐氏綜合征胎兒的產前診斷分析*

黃寧，劉艷秋，袁慧珍，黃婷婷

(江西省婦幼保健院產前診斷中心，江西南昌 330006)

摘要:目的探討羊水細胞染色體分析在唐氏綜合征產前診斷中的應用價值。方法通過羊水細胞培養和染色體核型分析，對近3年來該院接受產前診斷的孕婦進行檢測。結果3 702例產前診斷病例羊膜腔穿刺成功3 700例，成功率99.95%，培養成功3 664，成功率99.03%；檢出75例唐氏綜合征，其中標準型21三體型70例，易位型21三體2例，嵌合體3例；其中唐氏篩查高風險孕婦50例，占66.67%，無創產前檢測陽性孕婦18例，占24.00%，其他占9.33%。結論聯合唐氏篩查、胎兒DNA無創產前檢測及羊水細胞染色體分析是一套安全、有效的產前診斷方法，對唐氏綜合征的檢出具有重要應用價值，可能成為產前檢測和產前診斷的新模式。

關鍵詞:產前診斷；唐氏綜合征；核型分析；羊水

唐氏綜合征(DS)又稱21三體綜合征，是一種最常見的先天性染色體疾病，臨床表現為智力低下，身體發育遲緩，并可能伴有不同程度的器官畸形，如心臟畸形，至今尚無有效的治療方法。由于部分DS患兒可以存活至成人，給家庭帶來巨大的心理負擔和經濟負擔。近年來，隨著血清學篩查和無創胎兒DNA檢測的聯合應用，越來越多的DS胎兒被檢出，降低了DS患兒的出生率，減輕了社會負擔。近3年本院進行胎兒細胞染色體產前診斷中，共檢出75例DS胎兒，本文回顧總結了這75例DS胎兒的產前診斷，現報道如下。

1資料與方法

1.1一般資料2012～2014年來本院遺傳咨詢的3 702例孕婦，孕婦年齡19～49歲，孕周17～30周。孕婦均有不同的產前診斷指征，在知情同意的原則下進行了羊水穿刺術和胎兒細胞染色體核型分析。

1.2方法孕婦取仰臥位，于B超下定位后，先抽取1～2 mL羊水棄去，再繼續抽取約20 mL羊水，置于無菌離心管中，立即送檢。將羊水標本離心后，取0.2～0.5 mL沉淀細胞接種，培養7～14 d，視羊水細胞生長情況選擇適當時機換液，收獲。按傳統方法制片，行常規G顯帶染色體分析。

1.3統計學處理采用Excel2007軟件進行數據處理及統計學分析。

2結果

2.1產前診斷結果3 702例行羊膜腔穿刺孕婦，穿刺成功3 700例，成功率99.95%，羊水細胞培養成功3 664例，成功率99.03%，檢出異常核型198例，檢出率5.40%(198/3 664)，其中21三體綜合征75例，占產前診斷胎兒的2.05%(75/3 664)，占異常核型37.88%(75/198)。

2.275例DS胎兒的產前診斷指征75例DS產前診斷中血清學唐氏篩查高風險50例，占66.67%(50/75)；無創胎兒DNA21三體陽性18例，占24.00%(18/75)；B超異常3例，占4.00%(3/75)；不良產史1例，占1.33%(1/75)；唐氏篩查臨界風險1例，占1.33%(1/75)；高齡未行唐氏篩查檢測的2例，占2.67%(2/75)。見表1。

2.3孕婦年齡因素75例DS產前診斷中，高齡孕婦(≥35歲)32例，占42.67%(32/75)；年齡小于 35歲者43例，占57.33%(43/75)。

2.4染色體核型結果及妊娠結局隨訪21三體型70例，占93.33%(70/75)；易位型2例，占2.67%(2/75)；嵌合體3例，占4.00%(3/75)。75例DS胎兒病例均與孕婦及家屬交流，告知DS的臨床表現，建議3例嵌合體病例進行進一步臍血染色體檢查及夫婦外周血染色體檢查。見表2。

表1　　75例DS胎兒的產前診斷指征

表2　　產前診斷染色體核型分析

3討論

自1966年Steele等[1]首次報道培養羊水細胞成功，并應用于胎兒染色體疾病的產前診斷以來，至今此項技術仍在產前診斷中起著無可替代的作用。Wu等[2]總結了5 304例羊膜腔穿刺病例，其中167例進行了二次穿刺(121例羊膜腔穿刺失敗，23例染色體嵌合體，21例羊水細胞培養失敗，2例核型需要再次確認)，結果14例為異常染色體核型，4例嵌合體得到了進一步確診，結論提示重復侵入性產前診斷技術不會進一步增加胎兒流產風險。近年來，羊水細胞培養技術和染色體制片技術得到了不斷改進，形成了一套成熟而穩定的羊水產前診斷技術，并在臨床產前診斷工作中得到了很好的驗證，羊水培養成功率達到了99%以上。一般認為，16～21孕周羊水細胞活性大，為羊水細胞培養適宜時期。本院進行產前診斷病例孕周在17～30周，孕周過大的仍然能培養成功，由此可見，只要具有合適的培養體系和成熟的細胞培養技術，孕周并非是影響羊水細胞培養的決定因素，羊水細胞培養依然能成功。對于部分孕周超過21周的孕婦，而又不愿接受臍血產前診斷的，依然可以選擇羊水產前診斷。

隨著社會發展，人們優生優育意識增強，血清學篩查逐步普及，越來越多的孕婦進行了唐氏篩查。由于血清學方法的局限性，假陽性和假陰性人群不可避免地逐漸擴大，其中大約50%唐氏篩查假陰性者風險值為1/300～1/1 000，增加唐篩臨界風險孕婦(風險范圍1/300～1/10 000)進行產前診斷，對血清學檢測假陰性者起到了很好的補充作用[3-6]。隨著二代測序手段的迅速發展，在母血中進行胎兒DNA的分析應用于非整倍體染色體產前檢測。無創產前檢測具有更安全、更快捷、準確度高、靈敏度高等優勢，被大部分孕婦所接受[7]。如果所有的唐氏篩查高風險、臨界風險者均進行有創產前診斷，現行的有創產前診斷力量是遠遠不足的。無創胎兒DNA檢測不僅可以減少假陽性患者的比例，減輕有創產前診斷的壓力，而且更大范圍地鎖定了21三體綜合征目標人群，降低了這類孕婦的經濟和精神負擔[8]。但Chen等[9]報道了2例無創產前檢測假陽性病例，結果顯示無創產前檢測用于性染色體與18號染色體檢測時與實際染色體核型不符，仍需與傳統核型分析技術相結合。本研究中75例DS胎兒有50例為唐氏篩查高風險，18例為無創DNA陽性，共占90.67%。唐氏篩查、無創胎兒DNA和有創產前診斷聯合應用無疑將成為以后產前篩查和產前診斷的新模式。

目前，普遍認為隨著孕婦年齡的增加，卵子質量下降，卵巢環境改變，胎兒染色體異常的風險率增加。然而資料顯示，僅約30%的DS胎兒發生在高齡孕婦，70%的DS胎兒發生在年齡小于35歲的孕婦中[10]。本研究中75例DS產前診斷，高齡孕婦(≥35歲)占42.67%；年齡小于 35歲者占57.33%。可見非高齡孕婦所妊娠的胎兒依然有著較高DS發生率，產前診斷中也不容忽視。醫務工作者務必做好孕婦宣教工作，提高備孕人群對DS的認知度[11]。

在產前診斷中如何正確分析真假嵌合體，對孕婦做出合理的解釋及進一步處理非常重要。Sahin等[12]報道了2例羊水染色體數目異常嵌合體和2例結構異常嵌合體，1例報告為47,XY,+mar[10]/46,XY[10]，經熒光原位雜交(FISH)技術確認標記染色體為15號染色體的一個片段，該胎兒宮內發育遲緩、伴腦血栓形成，于出生后29 d死亡；1例報告為45,X[4]/46,XX[26]，孕婦拒行臍血染色體進一步檢查；1例B超顯示雙側脈絡膜囊腫，羊水染色體46,XX,dup(1)(q22-q32)[9]/46,XX[21]，夫婦染色體正常，該胎兒于23孕周流產；1例報告為46,XX,t(6;11)(q23;p13)[3]/46,XX[20]，異常染色體核型僅在一個培養瓶中發現，另一培養瓶為正常核型，該孕婦繼續妊娠，于產后復查血染色體核型為46,XX。提示產前診斷中檢出嵌合體核型，不僅需要進一步詳細檢查以確診，還要繼續跟蹤隨訪。本研究中75例DS，共檢出21三體嵌合體3例，其中2例為唐氏篩查高風險孕婦，1例為無創胎兒DNA陽性。2例唐氏篩查高風險孕婦未行進一步確認即引產，1例無創胎兒DNA陽性者經臍血染色體核型分析及胎兒出生后外周血染色體分析均無異常，后經進一步檢測胎盤胎兒面及臍帶組織為正常核型，母胎面為21三體嵌合體核型，為胎盤限制性嵌合體所致。提示無創DNA產前檢測存在假陽性，無創DNA陽性者必須通過羊水或臍血染色體核型分析進行確認，羊水嵌合體需通過臍血進一步檢查確診，并進行產后隨訪。

經典的細胞培養和細胞染色體分析是染色體病診斷的金標準，具有不可替代的優勢，隨著分子遺傳學技術的不斷發展，衍生了多項染色體診斷技術，這些新技術實驗周期短，分辨率高，可以對常見的非整倍體染色體異常作出快速檢測，可以有效緩解孕婦緊張情緒[13]。將傳統的唐氏篩查、無創胎兒DNA檢測與羊水細胞染色體分析結合起來，必成為產前篩查和產前診斷的新模式。遺傳咨詢醫師要對孕婦做出清晰合理的解釋，尤其針對嵌合體核型檢測結果，尊重患者自己的選擇，并對再次妊娠做出建議。加強醫患溝通，做好孕婦宣傳與教育工作，合理引導，對提高出生人口素質具有重要意義。

參考文獻

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(收稿日期：2015-11-12)

DOI:10.3969/j.issn.1673-4130.2016.03.044

文獻標識碼：A

文章編號：1673-4130(2016)03-0387-03

*基金項目：江西省衛生與計劃生育委員會基金資助項目(20161115)。