血清白細(xì)胞介素-32及降鈣素原表達(dá)水平對(duì)呼吸機(jī)相關(guān)性肺炎早期診斷價(jià)值的研究▲

劉鳳鳴 易文楓 覃慧嬋 黃 貴 梁立劍 覃先連

(廣西南寧市第一人民醫(yī)院重癥醫(yī)學(xué)科，南寧市 530021，E-mail：523151315@qq.com)

臨床創(chuàng)新

血清白細(xì)胞介素-32及降鈣素原表達(dá)水平對(duì)呼吸機(jī)相關(guān)性肺炎早期診斷價(jià)值的研究▲

劉鳳鳴 易文楓 覃慧嬋 黃 貴 梁立劍 覃先連

(廣西南寧市第一人民醫(yī)院重癥醫(yī)學(xué)科，南寧市 530021，E-mail：523151315@qq.com)

目的 探討血清白細(xì)胞介素32(IL-32)及降鈣素原(PCT)表達(dá)水平對(duì)呼吸機(jī)相關(guān)性肺炎(VAP)的早期診斷價(jià)值。方法 采用酶聯(lián)免疫吸附法檢測(cè)30例VAP患者及30例非VAP患者血清IL-32及PCT表達(dá)水平。結(jié)果 VAP組患者血清IL-32、PCT表達(dá)水平均高于非VAP組患者(P均<0.001)。結(jié)論 血清PCT、IL-32表達(dá)水平升高可以作為VAP的早期診斷指標(biāo)。

呼吸機(jī)相關(guān)性肺炎；白細(xì)胞介素32；降鈣素原

呼吸機(jī)相關(guān)性肺炎(ventilator-associated pneumonia，VAP)是指機(jī)械通氣(mechanical ventilation，MV)48 h后至拔管后48 h內(nèi)出現(xiàn)的肺炎，是醫(yī)院獲得性肺炎(hospital-acquired pneumonia，HAP)的重要類型，其中機(jī)械通氣≤4 d內(nèi)發(fā)生的肺炎為早發(fā)性VAP，≥5 d為晚發(fā)性VAP[1]。是機(jī)械通氣過(guò)程中常見(jiàn)而又嚴(yán)重的并發(fā)癥之一，尤其在重癥醫(yī)學(xué)科中更為常見(jiàn)，是導(dǎo)致患者死亡的重要原因。有文獻(xiàn)報(bào)告，VAP的病死率高達(dá)51.6%[2]。然而早診斷、早治療能減少VAP患者的住院時(shí)間、降低治療費(fèi)用、降低病死率及改善預(yù)后，目前VAP的早期診治仍然存在困難，病原菌診斷是公認(rèn)的診斷標(biāo)準(zhǔn)，但臨床上操作較為困難，白細(xì)胞介素32(interleukin-32，IL-32)、降鈣素原(procalcitonin，PCT)是常見(jiàn)的促炎因子[3]，為探討IL-32及PCT早期診斷VAP的價(jià)值，本研究應(yīng)用酶聯(lián)免疫吸附法(enzyme-linked immunosorbent assay，ELISA)檢測(cè)VAP與非VAP患者血清IL-32、PCT的表達(dá)水平，現(xiàn)將結(jié)果報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 收集我院2014年1月至2015年6月收治入住重癥醫(yī)學(xué)科進(jìn)行機(jī)械通氣治療的患者60例，其中發(fā)生VAP 30例(VAP組)，不發(fā)生VAP 30例(非VAP組)。呼吸機(jī)相關(guān)性肺炎的診斷標(biāo)準(zhǔn)[4]：(1)插管48 h后發(fā)熱、膿性痰或氣管、支氣管分泌物涂片染色可見(jiàn)細(xì)菌；(2)外周血白細(xì)胞總數(shù)升高大于10×109/L或較原先基礎(chǔ)值增加25%；(3) 肺泡動(dòng)脈氧分壓差升高；(4) X線胸片提示肺部出現(xiàn)新的或進(jìn)展中的浸潤(rùn)病灶；(5)氣管吸出物定量培養(yǎng)陽(yáng)性，菌落計(jì)數(shù)大于106/ml，若痰培養(yǎng)作為細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)標(biāo)本，則必須低倍鏡視野下白細(xì)胞大于25個(gè)，鱗狀上皮細(xì)胞小于10個(gè)。VAP組男14例，女16例，年齡34～78(48.45±6.82)歲；均為腦出血術(shù)后患者，通氣時(shí)間50～80(68.12±9.35)h。非VAP組男15例，女15例；年齡33～81(49.54±7.12)歲；均為腦出血術(shù)后患者，通氣時(shí)間49～78(67.36±8.74)h。實(shí)驗(yàn)組、對(duì)照組年齡、性別、所患原發(fā)病、通氣時(shí)間上差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，具有可比性。

1.2 檢測(cè)方法 采集兩組患者空腹靜脈血4 ml，靜置1 h后于4℃、3 000 r/min 離心10 min，取血清置于-80℃冰箱凍存待測(cè)。采用酶聯(lián)免疫吸附法檢測(cè)血清IL-32及PCT含量，嚴(yán)格按照試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作：(1)將凍存的血清標(biāo)本解凍后分別取出100 μl備用。(2)分別取標(biāo)準(zhǔn)品100 μl依次加入1排7孔中，1孔只加樣品稀釋液作為零孔。(3)酶標(biāo)板加上蓋，37℃反應(yīng)120 min。(4)甩去酶標(biāo)板內(nèi)液體，再對(duì)著吸水紙拍幾下，不洗。(5)每孔依次加入抗體工作液100 μl，37℃反應(yīng)30 min。(6)用洗滌液洗滌3次，每次浸泡1 min左右，甩去多余液體。(7)每孔依次加入TMB顯色液100 μl，37℃避光反應(yīng)20～25 min。(8)每孔依次加入3，3′，5，5′-四甲基聯(lián)苯胺(TMB)終止液100 μl，此時(shí)藍(lán)色立即轉(zhuǎn)為黃色。(9)用酶標(biāo)儀在450 nm波長(zhǎng)處測(cè)定光密度值。(10)作標(biāo)準(zhǔn)曲線，并根據(jù)吸光值計(jì)算出相應(yīng)孔的濃度。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 應(yīng)用SPSS 17.0統(tǒng)計(jì)軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析，計(jì)量資料以(x±s)表示，采用t′檢驗(yàn)，以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

VAP組血清IL-32、PCT濃度均明顯高于非VAP組(P均<0.05)。見(jiàn)表1。

表1 兩組血清IL-32、PCT濃度比較(x±s，μg/L)

3 討 論

重癥醫(yī)學(xué)科是臨床危重癥患者搶救與監(jiān)護(hù)的特殊區(qū)域，這里聚集了大量的危重癥患者，他們的基礎(chǔ)情況相對(duì)較差，同時(shí)由于病房的條件相對(duì)密閉、空間較小，往往很容易導(dǎo)致醫(yī)院感染的發(fā)生，加上大部分患者需要行氣管插管或氣管切開(kāi)術(shù)建立人工氣道，破壞了呼吸道正常的防御功能，使得呼吸道直接與外界空氣相通，對(duì)外界空氣有著重要凈化作用的上呼吸道不能發(fā)揮其正常功能[5]，這些都導(dǎo)致了重癥醫(yī)學(xué)科患者發(fā)生VAP比率較高，VAP的病死率高達(dá)51.6%[2]。早診斷、早治療對(duì)減少VAP患者的住院時(shí)間、降低治療費(fèi)用、降低病死率及改善預(yù)后有重要意義。VAP一般都會(huì)有嚴(yán)重的肺部炎癥，而肺部炎癥反應(yīng)與參與肺部炎癥形成的細(xì)胞因子IL-32和IL-12有密切關(guān)系[6]。Joosten等[7]研究發(fā)現(xiàn)IL-32與類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎等自身免疫性疾病有關(guān)。本研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)實(shí)驗(yàn)組血清 IL-32濃度高于對(duì)照組(P<0.05)，由此可以推斷血清IL-32表達(dá)水平可作為診斷VAP一個(gè)有價(jià)值的指標(biāo)。目前PCT與細(xì)菌感染性疾病的關(guān)系已受關(guān)注，它的表達(dá)水平已經(jīng)成為一種新的診斷細(xì)菌性感染的指標(biāo)[8]。PCT是一種無(wú)激素活性的糖蛋白，1993年，有學(xué)者首先指出在感染期間患者血液中PCT水平升高，PCT水平升高可以判斷是否存在細(xì)菌感染和反應(yīng)感染的嚴(yán)重程度[9]。局部感染引起PCT小幅上升，患有急性全身感染時(shí)PCT水平明顯增高，并伴有嚴(yán)重的系統(tǒng)性反應(yīng)(如嚴(yán)重?cái)⊙Y或敗血性休克)。本文結(jié)果顯示VAP組血清PCT明顯高于非VAP組(P<0.05)，表明行機(jī)械通氣的患者血清PCT、IL-32水平升高可以作為是否發(fā)生VAP的一個(gè)早期診斷指標(biāo)，有望在臨床中得到更為深入和廣泛的應(yīng)用。

[1] 李麗娜.呼吸機(jī)相關(guān)性肺炎的高危因素分析及護(hù)理措施[J].解放軍醫(yī)藥雜志,2012,24(3):67-70.

[2] 陳鳴中,府偉靈,陳依賜.呼吸機(jī)相關(guān)肺炎的流行病學(xué)分析[J].中華醫(yī)院感染學(xué)雜志,1998,8(1):211-213.

[3] Lee JY,Hwang SJ,Shim JW,et al.Clinical significance of serum procalcitonin in patients with community-acquired lobar pneumonia[J].Korean J Lab Med,2010,30(4):406-413.

[4] Bauer TT,Ferrer R,Angrill J,et al.Ventilator-associated pneumonia:incidence,risk factors,and microbiology[J].Semin Respir Infect,2000,15(4):272-279.

[5] Coppadoro A,Berra L,Bigatello LM.Modifying endotracheal tubes to prevent ventilator-associated pneumonia[J].Curr Opin Infect Dis,2011,24(2):157-162.

[6] 夏 玲,張繼先,楊 炯.結(jié)締組織病并間質(zhì)性肺病患者血清IL-32、IL-12的臨床意義[J].臨床肺科雜志,2011,16(7):1 026-1 029.

[7] Joosten LA,Netea MG,Kim SH,et al.IL-32,a proinflammatory cytokine in rheumatoid arthritis[J].Proc Natl Acad Sci U S A,2006,103(9):3 298-3 303.

[8] Schuetz P,Mueller B,Trampuz A,et al.Serum procalcitonin for discrimination of blood contamination from bloodstream infection due to coagulase-negative staphylococci[J].Infection,2007,35(5):352-355.

[9] 胡 可,劉文恩,梁湘輝.降鈣素原在細(xì)菌感染中臨床應(yīng)用的研究[J].中華醫(yī)院感染學(xué)雜志,2011,21(1):30-33.

廣西醫(yī)藥衛(wèi)生科研課題(Z2014479)

劉鳳鳴(1979～)，女，本科，副主任醫(yī)師，研究方向：重癥醫(yī)學(xué)。

R 563.1

B

0253-4304(2016)01-0116-02

10.11675/j.issn.0253-4304.2016.01.36

2015-10-22

2015-12-29)