□張慶明(齊魯動物保健品有限公司)
毛皮動物抗體檢測采樣技術及注意事項
□張慶明(齊魯動物保健品有限公司)
毛皮動物養殖過程中為了預防烈性傳染病需要定期對動物進行疫苗接種,免疫的疫苗主要包括犬瘟熱活疫苗、病毒性腸炎滅活疫苗、狐貍腦炎活疫苗等。疫苗免疫完成后,為了評價免疫效果,考察群體健康狀態,可以對免疫后的動物進行血樣采集以監測疫苗免疫后的抗體水平。但是考慮到成本及時間等問題,并不能對全群進行血樣檢測,需要進行科學合理的采樣。本文就抗體監測采樣技術相關問題進行總結,為養殖戶科學養殖提供參考。
在隨機采樣的前提下,應該采集臨床表現健康的毛皮動物,不采體況較差、處于亞健康狀態或者是發病的毛皮動物。如動物表現精神萎糜、食欲不振、感冒、發燒、咳喘、腹瀉,或者已知患有血蟲病、阿留申病等隱性感染疾病,不建議采集。
血樣樣品采集過少,不能代表整個養殖場的抗體水平。樣品采集數量過多,既不經濟、又耗費時間。考慮到目前毛皮動物養殖情況及抗體結果的可信度,采樣數量如表1。

表1 毛皮獸存欄量與采樣數對應關系
正常情況下,犬瘟熱和狐貍腦炎疫苗免疫動物后7天開始產生保護性抗體,14天抗體值可以達到保護水平。病毒性腸炎疫苗為滅活疫苗,疫苗免疫后14天開始產生保護性抗體,所以為了有效評價抗體水平,一般在疫苗免疫后1個月左右對動物進行血樣采集。夏季在免疫完6個月之后(疫苗保護期為6個月),冬季在免疫疫苗之前可以再采集一次血樣檢測一次抗體,制定合理的冬季免疫時間。在毛皮獸整個生長期,如果懷疑毛皮獸感染犬瘟熱、病毒性腸炎或者狐貍腦炎,可以對養殖場發病獸及健康獸同時進行血樣采集,監測抗體。
毛皮動物不易保定,采血時水貂可以采取懷抱式保定,即水貂腹部朝上,保定者一手按住水貂腹部,一手扣住水貂頸部,抱于胸前。狐貍、貉子可以用皮套套住頸部倒提保定。采血時要用酒精棉對采血部位進行消毒,防止細菌污染血樣、感染動物,同時酒精可刺激血管膨脹。采血時最好用一次性靜脈輸液針(頭皮針)連接注射器,用頭皮針插入血管(水貂采趾背側總動脈血管,狐貍貉子采小隱靜脈腳底支血管)采集血樣。
犬瘟熱抗體、狐貍腦炎抗體檢測采用中和試驗法,最少需要血清的量為50微升。病毒性腸炎抗體檢測采用血凝抑制試驗,最少需要血清的量為50微升,所以三種疫苗抗體都檢測最少需要150微升血清,毛皮動物采血量至少1毫升才能保證分離出足夠量的血清用于檢測。
血樣采集后可以在室溫放置

表2 抗體數值統計分析表
1個小時左右后轉移到4℃冰箱中過夜,次日離心機以8000轉/分鐘離心5分鐘,取上層血清。
以2015年某地區兩個養殖場犬瘟熱抗體監測結果為例,進行說明。
犬瘟熱和狐貍腦炎抗體合格值為50,病毒性腸炎抗體合格值為25。表中變異系數表示抗體值的離散程度,其計算公司為:變異系數=(標準偏差 SD/平均值 Mean)× 100%。變異系數越大表示抗體值離散程度越大,當變異系數大于15%時,則要考慮毛皮動物群體是否存在健康隱患,影響抗體整齊度。表2中所示,一場的抗體值無論是從合格率、平均值還是變異系數上都要優于二場。
采集樣品要標記清楚,編號有規律,排列有順序;樣品要放在裝有冰袋的保溫箱內及時送檢;采集的樣品要有詳細的說明,包括日齡、免疫疫苗種類、免疫時間等;冬天采集血樣時要注意防凍;采血后的動物可以在其飼料或者飲水中添加葡萄糖粉和維生素C,緩解應激反應。