抗核抗體譜檢測對彌漫性結締組織病的臨床診斷價值

張慧娟，梁宗夏，廖少羽，楊 海，鐘 羨，羅偉軍

惠州市第三人民醫院，廣東 惠州 516002

彌漫性結締組織病是風濕性疾病中的一大類疾病，其免疫學特征是患者產生自身抗體。本文對246例分別患有系統性紅斑狼瘡（SLE）、系統性硬化癥（PSS）、類風濕關節炎（RA）、混合性結締組織?。∕CTD）、皮肌炎和多發性皮肌炎（PD/PM）、干燥綜合征（SS）、重疊綜合征（OLs）等彌漫性結締組織病患者進行抗ANA多肽抗體譜檢測，并探討ANA譜與彌漫性結締組織病發生的相關性及對臨床診斷的價值。

1 資料與方法

1.1 臨床資料

收集2006年6月～2014年4月來我院住院及門診患者246例病人及健康人對照血清160例。其中女169例，男77例，女：男為2.19:1，平均年齡57.8±16.9歲，彌漫性結締組織病246病人中，其中系統性紅斑狼瘡（SLE）34例，類風濕關節炎（RA）29例，混合性結締組織?。∕CTD）28例，進行性系統性硬化癥（PSS）87例；多發性肌炎／皮肌炎（DM/PM）35例；干燥癥（SS）22例；重疊綜合征(OLs)11例。健康人血清160例。

1.2 診斷標準

（1）SLE符合1997年美國風濕病協會（ACR）修訂的SLE診斷標準；（2）RA按1987年美國風濕病學會制定的診斷標準；（3）混合性結締組織病按1986年8月在日本東京召開的國際學術討論會上sharp（美國）標準；（4）皮肌炎按1982年Maddin等提出的診斷標準；（5）系統性硬化癥（PSS）按1995年施守義所提出的診斷標準；（6）原發性干燥綜合征（PSS）符合2002年歐洲研究組標準；（7）重疊綜合征（OLs）采用鈴木提出的診斷標準［1］。

1.3 試劑與方法

試劑采用深圳亞輝龍生物制品有限公司提供的抗核抗體（ANA）譜試劑盒。采用Western blot法，可同時檢測抗 dsDNA、Histone、抗 SmD1、抗 U1-snPNP、抗SSA/Ro60KD、抗SSA/Ro52KD、抗CENP-B、抗SCl-70、抗Jo-1，結果判斷以檢測膜條出現功能質控帶和判斷指示帶為標準，具體操作均按試劑盒操作說明書進行。

1.4 統計學處理

不同組別間率的比較用χ2檢驗，P<0.05為差異有統計學意義。

2 結果

ANA用硝酸纖維膜上的顯色帶與陽性標準對照判斷陽性抗體，共檢測246例彌漫性結締組織病患者標本，檢測彌漫性結締組織病患者與對照組ANA抗體譜陽性率比較，見表1。

表1 彌漫性結締組織病患者與對照組ANA抗體譜陽性率比較（n,%）

3 討論

抗核抗體是以真核細胞抗核體是以真核細胞的核成份為靶抗原的自身抗體的總稱［2］。由于抗原不同，從而產生了針對細胞核的多種成分的抗體群。ANA有3個組成部分：抗dsDNA抗體、抗組蛋白抗體和可提取的核抗原（ENA），ENA又包括抗Sm、抗UIRNP、抗SSA、抗SSB、抗Scl-70抗體等多種自身抗體［3］。本研究結果顯示抗dsDNA抗體陽性率在SLE患者為44.1%，顯著高于MCTD的25%、DM/PM的5.7%（P<0.05）。PSS和SS患者抗dsDNA抗體均為陰性。

系統性紅斑狼瘡（SLE）患者自身抗體的主要診斷指標是抗dsDNA、抗Sm的陽性檢出率分別為44.1%和47%，在對照組中可以看到：陽性檢出率均為1.3%。可見抗dsDNA、抗Sm在診斷SLE有極顯著意義。SLE患者中抗ANA抗體與臨床癥狀有關?？筍m是酸性糖蛋白，有人認為它是SLE的標記抗體。抗ANA抗體陽性譜的分布有一定傾向性，SLE癥狀緩解，抗ANA抗體條帶數減少［4］。

混合性結締組織病是一種綜合征，其特點為臨床上具有系統性紅斑狼瘡、多發性肌炎及系統性硬化癥等結締組織病的臨床表現，但又不符合其中一種疾病的診斷，且在血清中有高效價抗核糖核蛋白（RNP）抗體的一種自身性免疫性疾病。本實驗測得抗UIRNP抗體的陽性為96.4%。對照組抗UIRNP抗體陽性率則為0.6%。故抗UIRNP抗體是MGTD的特征抗體，對診斷MCTD具有極顯著意義。

系統性硬皮病（PSS）是一種全身性結締組織病，以皮膚和各臟器系統（如胃腸道、肺、心、腎等）的炎癥、血管和膠原纖維化的病損為主要表現，是一種以血管病變和嚴重纖維化為特征的結締組織?。?-6］。有研究報道無論是PSS伴隨繼發性雷諾現象還是原發性雷諾現象時，PSS患者體抗Scl-70抗體水平均顯著升高，提示微血管受累，且繼發性雷諾現象的病程與機體抗Scl-70抗體平增高呈正相關［7］?？筍cl-70抗體被視為PSS的血清標記性抗體，陽性常與彌漫性皮膚病變、近端皮膚累及、心臟受累、并發腫瘤及肺間質纖維化密切相關，被認為是預后不良的指標[8]?？笴ENP-B在PSS中陽性率較高，達13.8%，但特異性較差。雖然目前認為抗CENP-B也是PSS的標志性抗體之一，但在臨床應用中應注意鑒別診斷。PSS患者系統受累是其死亡的主要原因，尤其是硬皮病腎危象、肺間質病變和肺動脈高壓［9-10］，因此早期診斷和治療系統受累是改善PSS預后的關鍵。

本研究中SS患者抗SSA抗體和抗SSB抗體陽性率為68.2%和59.1%，SLE患者抗SSA抗體和抗SSB抗體陽性率為32.4%和14.7%，二者間無明顯差異。抗SSA抗體和抗SSB抗體在部分正常人中陽性率為4.4%和2.5%，這意味著抗SSA抗體和抗SSB抗體診斷SS的特異性并不高。但兩者聯合檢測可提高SS診斷率［11］。

多發性肌炎（PM）和皮肌炎（DM）抗J0-1陽性檢出率為31.4%組陽性率為0%，有較好特異性。類風濕性關節炎（RA）：抗dsDNA、抗JO-I陽性檢出率分別為6.9%、6.9%，而對照組則為1.3%和0%。檢測抗dsDNA、抗JO-I對診斷RA有一定意義但不具特異性，故應結合其它實驗檢查和臨床表現進行診斷。

重疊綜合征是指患者同時或先后出現兩種或兩種以上明確診斷的結締組織病，一般為多發性肌炎（PM）、類風濕關節炎（RA）、系統性紅斑狼瘡（SLE）、舍格倫綜合征（SS）、系統性硬化中的兩種或兩種以上的疾病重疊。本組并存的風濕病以PSS、SLE和RA為主，抗dsDNA、抗Sm、抗UIRNP、抗SSA抗體的陽性率為45.4%、18.2%、45.4%、18.2%。本實驗分析中發現重疊綜合征患者的抗dsDNA、抗Sm、抗UIRNP、抗SSA抗體的陽性率較高，且抗ANA抗體譜有多個抗體出現，因此，實驗室檢查重疊綜合征的診斷能提供可靠的依據。

綜上所述，抗ANA多肽抗體譜檢測靈敏度高、結果可靠、方法簡便、易于推廣，對彌漫性結締組織病患者的診斷有重要的臨床價值。不同的抗ANA抗體在各種彌漫性結締組織病患者中的陽性率有明星差異，有些自身抗體屬某些疾病的標記性抗體或特異性抗體，對自身免疫性疾病的診斷與鑒別診斷有極為重要的意義。

［1］王洪武,劉又寧,樸哲龍,等.結締組織病重疊綜合征37例臨床分析［J］.臨床內科雜志,2001,18(5):369-71.

［2］馬東來，張少靜，（德）斯特克.自身抗體及免疫熒光模式[M].北京科學出版社,2000:32-8.

［3］葉應嫵,申子瑜.全國臨床檢驗操作規程［M］.南京:東南大學出版社,2006:655-66.

［4］鄧安梅,仲人前,施笑梅,等.自身免疫病患者可抽提核抗體譜與體液免疫的關系［J］.中華醫學檢驗雜志,1999,22(5):42-5.

［5］葉任高,陸再英.內科學.［M］6版.北京:人民衛生出版社,2004:933-6.

［6］ Steen VD.Clinical manifestations of systemic sclerosis［J］.Semin Cutan Med Surg,1998,17(1):48-54.

［7］ Sulli A,Soldano S,Pizzorni C,et al.Raynaud's phenomenon and plasma endothelin:correlations with capillaroscopic patterns in systemic sclerosis［J］.J Rheumatol,2009,36(6):1235-9.

［8］楊 海,梁宗夏,張慧娟,等.抗Scl-70抗體檢測與臨床應用［J］.中國免疫學雜志,2014,30(4):533-4.

［9］ Koenig M,Dieude M,Senecal JL.Predictive value of antinuclear autoantibodies:The lessons of the systemic sclerosis autoantibodies［J］.Autoimmun Rev,2008,7(8,SI):588-93.

［10］ Bussone G,Berezne A,Pestre V,et al.The scleroderma kidney:progress in risk factors,therapy,and prevention［J］.Curr Rheumatol Rep,2011,13(1):37-43.

［11］冀春梅,王振明,馬居鳳.抗核抗體譜檢測在自身免疫性疾病中的意義［J］.實用醫技雜志,2008,15(5):583-4.