手工克隆公豬繁殖性能跟蹤

夏代剛，鄭 華，蒙小云，石 偉，李 青

（深圳市農牧實業有限公司，廣東 深圳 518023）

手工克隆公豬繁殖性能跟蹤

夏代剛，鄭 華*，蒙小云，石 偉，李 青

（深圳市農牧實業有限公司，廣東 深圳 518023）

對3頭克隆公豬的精液指標和配種效果進行了跟蹤，并與同期普通公豬進行了對比，結果表明，克隆公豬的采精量、精子活力和精子畸形率與普通公豬差異不顯著（P＞0.05），但精子密度極顯著低于普通公豬（P＜0.01）；克隆公豬能達到85%的配種受胎率和81.67%的配種分娩率，已能達到正常集約化養豬需要的標準；克隆公豬所配母豬的窩均總仔、窩均活仔均顯著低于普通公豬所配母豬（0.01＜P＜0.05），分別為11.14頭和9.94頭，其窩均畸形數則顯著高于普通公豬（0.01＜P＜0.05），窩均死胎、窩均木乃伊和窩均弱仔數則差異不顯著（P＞0.05）。克隆公豬完全可以用于擴大優秀種公豬群體并應用于集約化養豬生產。

克隆；生長；性能測定；豬

克隆技術使遺傳優良的種豬快速擴繁成為了可能，但目前豬的克隆成功率低[1]，且成本高，所以克隆種公豬的經濟價值更大，畢竟可以一公配多母。克隆的最終目的是為了產業化應用，那么我們生產克隆種公豬的目的是為了利用其采精配種，但克隆公豬的繁殖力正常嗎？能否像普通公豬一樣利用？目前這方面的研究尚處于起步階段。Shibata M等（2006）[2]研究了金華克隆豬的生長性能和繁殖性能，馬青艷等（2009）[3]對克隆的巴馬小型豬繁殖性能進行了觀察，逯心玉等（2012）[4]研究了克隆的大白豬的繁殖性能。

1??材料與方法

1.1 試驗動物

選用深圳市農牧實業有限公司遺傳指數高、生產性能好的杜洛克公豬作為供體，采用手工克隆技術建系和生產克隆胚胎。分別用手術法和內窺鏡法胚胎移植，結果分娩9窩45頭活仔，飼養到成年僅剩3頭。本研究就以這3頭克隆杜洛克公豬為研究對象，與同期的普通杜洛克公豬對比精液品質和配種性能。配種的180頭母豬為同一公司發情正常的2～6胎普通二元雜母豬。

1.2 試驗動物的飼養管理

按深圳市農牧實業有限公司飼養管理規程飼養，飼喂公司自己生產的全價配合料，自由采食，自由飲水。免疫和保健程序、衛生和消毒程序等均嚴格按公司已有的程序執行。

1.3 試驗儀器

顯微鏡、磁力攪拌器、水浴鍋、恒溫冰箱、干燥箱、恒溫板、電子稱、血細胞計數板、精液稀釋粉(丹麥) 、采精杯、溫度計、濾紙、輸精瓶、無菌袋、燒杯、蒸餾水、計數器、輸精管。

表1 克隆公豬與普通公豬精液品質對比（平均數±標準誤）

表2 克隆公豬與普通公豬情期配種受胎率、配種分娩頭數對比

表3 克隆公豬與普通公豬配種后母豬產仔情況對比（平均數±標準誤）

1.4 試驗方法

1.4.1 精液采集

達到8月齡后開始進行人工采精調教，采精頻率為每周1次，采精2～3次每次射精量基本穩定后正式進行試驗。采精頻率為每周1次，每頭公豬收集5次采精數據，并計算其平均值為此頭公豬的精液品質數據。

1.4.2 精液品質檢查指標

記錄每次采精的精液量、精子密度、精子活力、精子畸形率。

1.4.3 精液品質指標檢查方法

人工采集的原精液經過濾后，用電子秤稱量精液質量，再按1 g折算為1 mL的計算方法統計公豬射精量；原精初步鏡檢，用稀釋液進行2～4倍的稀釋，然后在400 相差顯微鏡下利用血細胞計數法進行檢測，檢測指標主要有：精子密度、精子活力（按1分制進行評分）、精子畸形率。

1.4.4 種公豬的繁殖性能跟蹤

采集3頭克隆公豬和3頭普通公豬精液，按人工授精操作規程每頭公豬配20頭發情母豬，每頭母豬情期輸精3次，配種28 d時B超查孕，分娩時記錄產仔情況，記錄指標包括窩產總仔數、活仔數、死胎數、畸形數、弱仔數、木乃伊數。

1.5 數據分析處理

試驗數據用SAS軟件(V8.02)的Means過程計算平均數和標準誤，應用GLM過程進行差異顯著性檢驗。

2??結果與分析

2.1 克隆公豬與普通公豬精液品質對比

具體見表1。可以看出，克隆公豬的采精量、精子活力和精子畸形率與普通公豬差異不顯著（P＞0.05），但精子密度極顯著低于普通公豬（P＜0.01），每mL精液只有1.87億精子。

2.2 克隆公豬與普通公豬配種產仔情況對比

表2列出了克隆公豬與普通公豬的配種效果對比，克隆公豬能達到85%的配種受胎率和81.67%的配種分娩率，雖然略低于同期普通公豬的配種水平，但已能達到正常集約化養豬需要的標準。

從配種后母豬產仔情況來看（表3），克隆公豬所配母豬的窩均總仔、窩均活仔均顯著低于普通公豬所配母豬（0.01＜P＜0.05），分別為11.14頭和9.94頭，其窩均畸形數則顯著高于普通公豬（0.01＜P＜0.05），窩均死胎、窩均木乃伊和窩均弱仔數則差異不顯著（P＞0.05）。

3??討論

1)克隆公豬所配60頭母豬平均胎次（3.82±0.18）胎，普通公豬所配60頭母豬平均胎次（3.85±0.18）胎，經差異顯著性檢驗，兩者差異不顯著（P＞0.05），剔除了母豬胎次對試驗結果的影響。

2)本研究發現克隆公豬精液的精子密度極顯著低于普通公豬（P＜0.01），其余精液指標差異不顯著（P＞0.05），與逯心玉等（2012）[4]的研究結果不一致，他們認為克隆公豬的精子密度和活力都高于供核公豬，畸形率顯著低于供核公豬。這種不一致可能源于與克隆公豬對照的對象差異，本研究選用同期年齡相近的普通公豬，而逯心玉等（2012）[4]的研究中選用了供核公豬。供核公豬從采樣克隆到克隆產物成年采精，二者年齡相差至少1年時間；如果供核公豬是成年時采樣，則相差2年時間，年輕公豬與老公豬精液品質對比很有可能占優勢。

3)本研究中，克隆公豬所配母豬的窩均總仔、窩均活仔均顯著低于普通公豬所配母豬（0.01＜P＜0.05），這與逯心玉等（2012）[4]認為無顯著差異又不一致，其原因可能仍然是源于對照公豬的年齡差異。

4)通過研究，我們發現克隆公豬在繁殖性能方面雖然略低于普通公豬，但其各項繁殖指標已達到了集約化生產的要求，說明克隆公豬完全可以用于擴大優秀種公豬群體并應用于生產，克隆豬產業應用具有廣闊前景。

[1] Nanassy L， Lee K， Javor A， et al. Effects of activation methods and culture conditions on development of parthenogenetic porcine embryos [J]. Anim Reprod Sci， 2008， 104(2-4)：264-274.

[2] Shibata M， Otake M， Tsuchiya S，et al. Reproductive and growth performance in Jinhua pigs cloned from somatic cell nuclei and the meat quality of their offspring [J]. J Reprod Develop， 2006， 52：583-590.

[3] 馬青艷，陸維和，張彩珠，等.廣西小型克隆豬繁殖性能和生長發育情況觀察[J].中國畜禽種業，2009，11：55-56.

[4] 逯心玉，劉彪，胡魁，等. 克隆種公豬生長狀況和繁殖性能評價[J]. 畜牧與獸醫，2012，44（7 ）：6-9.

2014-11-05)

深圳市科技計劃項目（編號：JSA200904011807A）

*通訊作者：鄭華（1973—），男，高級畜牧師，主要從事豬的育種、生產和經營管理。