介入熱化療栓塞對肝癌患者的療效及血清血管內(nèi)皮細胞生長因子和基質(zhì)金屬蛋白酶水平的影響

肖金成，李靖，黎海亮，郭晨陽

（鄭州大學(xué)附屬腫瘤醫(yī)院介入科，河南 鄭州 450000）

介入熱化療栓塞對肝癌患者的療效及血清血管內(nèi)皮細胞生長因子和基質(zhì)金屬蛋白酶水平的影響

肖金成，李靖，黎海亮，郭晨陽

（鄭州大學(xué)附屬腫瘤醫(yī)院介入科，河南 鄭州 450000）

目的分析介入熱化療栓塞對肝癌患者血清血管內(nèi)皮細胞生長因子（VEGF）和基質(zhì)金屬蛋白酶（MMP）水平的影響及其臨床價值。方法選擇在該院接受治療的肝癌患者作為研究對象，隨機分為接受常規(guī)介入治療的對照組，以及接受介入熱化療栓塞治療的觀察組。比較兩組患者的血清VEGF和MMP水平，血清缺氧誘導(dǎo)因子及炎癥因子水平等差異。結(jié)果觀察組患者接受介入熱化療栓塞治療后各個時期的血清VEGF含量明顯低于對照組（P＜0.05）。觀察組患者接受介入熱化療栓塞治療后的MMP-2、MMP-9和MMP-13水平均明顯低于對照組（P＜0.05）。觀察組患者接受介入熱化療栓塞治療后的血清低氧誘導(dǎo)因子（HIF）、干擾素-γ（IFN-γ）、腫瘤壞死因子-α（TNF-α）水平均明顯低于對照組（P＜0.05）。結(jié)論介入熱化療栓塞治療可以明顯降低肝癌患者血清VEGF和MMP含量，減少缺氧誘導(dǎo)因子表達，減輕全身炎癥狀態(tài)。

肝癌；介入熱化療栓塞；血管內(nèi)皮細胞生長因子；基質(zhì)金屬蛋白酶

中晚期肝癌患者手術(shù)治療效果不佳，姑息性治療介入化療栓塞是目前臨床最常用且治療效果明確的方式。介入化療栓塞可以大幅殺滅腫瘤細胞，但是腫瘤血管栓塞過程中可出現(xiàn)末梢小血管因缺氧出現(xiàn)的暫時性閉合，導(dǎo)致栓塞不充分、殘留腫瘤細胞多，且殘留細胞可分泌一系列細胞因子促使腫瘤復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移，直接降低治療效果[1]。熱療為目前諸多學(xué)者推崇了可以與介入化療栓塞相結(jié)合的治療方式，通過在治療過程中擴張微血管、增加腫瘤細胞通透性、增加細胞內(nèi)化療藥物濃度等途徑，增強腫瘤細胞殺滅效果。本研究主要分析介入熱化療栓塞對肝癌患者血清血管內(nèi)皮細胞生長因子（vascular endothelial growth factor，VEGF）和基質(zhì)金屬蛋白酶（matrix metalloproteinase，MMP）含量的影響及其臨床價值。具體報道如下：

1 資料與方法

1.1一般資料

選擇于2012年7月-2014年1月在本院接受住院治療的首次確診的中晚期肝癌患者96例作為研究對象，均經(jīng)臨床病理證實，所有入組患者及家屬在了解研究過程后均簽署知情同意書。按照隨機數(shù)表法將所有入組患者分為觀察組和對照組，各48例。觀察組采用介入熱化療栓塞治療，對照組患者接受常規(guī)介入化療栓塞治療。觀察組患者中，男27例，女21例；年齡57～82歲，平均（68.63±8.21）歲；觀察組患者中，男28例，女20例；年齡58～83歲，平均（69.07±8.21）歲。兩組患者的一般資料比較差異不具有統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05），具有可比性。

1.2治療方法

對照組患者接受介入化療栓塞治療，具體如下：患者全身麻醉氣管插管，常規(guī)消毒鋪巾后穿刺股動脈，行腹腔干造影、腫瘤供血動脈選擇性插管。經(jīng)導(dǎo)管注入絲裂霉素8 mg、替加氟注射液1.0 g，將吡柔比星20 mg與碘化油5～20 ml混合成乳化物，用明膠海綿栓塞動脈血管近端。觀察組在介入化療栓塞治療基礎(chǔ)上，加入熱療，具體如下：奧沙利鉑100 mg+5%葡萄糖溶液500 ml，加至熱療機的高壓注射筒中進行熱療，穩(wěn)定設(shè)置為46～55℃，流速0.3 ml/s，灌注時間30 min。絲裂霉素8 mg、替加氟注射液1.0 g，吡柔比星20 mg與碘化油5～20 ml混合成的乳化物均經(jīng)導(dǎo)管灌注，用明膠海綿栓塞動脈血管近端。

1.3觀察指標(biāo)

1.3.1血清VEGF水平在患者接受治療前、治療后1 d、1周、1個月時，分別抽取晨起空腹外周靜脈血，3 000 r/min離心后取上清待測，采用ELISA法測定患者VEGF含量。

1.3.2血清MMP水平在患者接受治療前后，抽取晨起空腹外周靜脈血，采用ELISA法測定其中MMP-2、MMP-9及MMP-13水平。

1.3.3血清缺氧誘導(dǎo)因子及炎癥因子水平在患者接受治療前后，抽取晨起空腹外周靜脈血，采用ELISA法測定血清缺氧誘導(dǎo)因子（hypoxia inducible factor，HIF）及炎癥因子包括干擾素γ（Interferon-γ，IFN-γ）、腫瘤壞死因子-α（tumor necrosis factor-α，TNF-α）水平。

1.4統(tǒng)計學(xué)方法

本研究所有數(shù)據(jù)均采用SPSS 18.0軟件進行統(tǒng)計學(xué)分析，計量資料采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s），兩兩比較采用t檢驗，檢驗水準(zhǔn)為α=0.05。

2 結(jié)果

2.1血清VEGF水平

治療前兩組患者的血清VEGF水平差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05），觀察組患者接受介入熱化療栓塞治療后各個時期的血清VEGF含量明顯低于對照組（P＜0.05）。見表1。

表1 兩組患者接受不同治療后的血清VEGF水平比較（pg/ml±s）

表1 兩組患者接受不同治療后的血清VEGF水平比較（pg/ml±s）

組別治療前治療后1 d治療后1周治療后1個月觀察組342.09±86.22298.17±73.18178.33±53.1293.27±11.05對照組339.67±83.81319.36±79.41301.72±71.33329.36±78.32 t值0.385.287.339.63 P值0.1870.0200.0050.001

2.2血清MMP水平

治療前兩組患者的血清MMP水平差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05），觀察組患者接受介入熱化療栓塞治療后的MMP-2、MMP-9和MMP-13水平均明顯低于對照組（P＜0.05）。見表2。

2.3血清缺氧誘導(dǎo)因子及炎癥因子水平

治療前兩組患者的血清缺氧誘導(dǎo)因子及炎癥因子水平差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05），觀察組患者接受介入熱化療栓塞治療后的血清HIF、IFN-γ和TNF-α水平均明顯低于對照組（P＜0.05）。具體見表3。

表2 兩組患者接受不同治療后的血清MMP水平比較（ng/L±s）

表2 兩組患者接受不同治療后的血清MMP水平比較（ng/L±s）

組別治療前治療后MMP-2MMP-9MMP-2MMP-9MMP-13觀察組126.93±11.37127.38±11.7698.26±9.2734.28±4.3335.28±5.0243.18±5.38 MMP-13對照組t值128.07±12.53 0.39 129.04±13.52 0.47 97.26±8.79 0.39 75.09±7.38 6.27 77.37±8.13 8.36 86.02±9.73 9.73 P值0.2830.2530.2830.0190.0130.011

表3 兩組患者接受不同治療后的血清缺氧誘導(dǎo)因子及炎癥因子水平比較（±s）

表3 兩組患者接受不同治療后的血清缺氧誘導(dǎo)因子及炎癥因子水平比較（±s）

組別治療前治療后HIF/（pg/ml）IFN-γ/（ng/L）HIF/（pg/ml）IFN-γ/（ng/L）TNF-α/（ng/L）觀察組174.93±32.750.55±0.073.02±0.53112.84±20.260.41±0.032.13±0.38 TNF-α/（ng/L）對照組t值176.33±34.82 0.48 0.56±0.09 0.39 3.01±0.62 0.33 193.28±39.26 6.63 0.57±0.08 5.08 2.97±0.52 6.28 P值0.2210.2780.2830.0160.0210.019

3 討論

中晚期肝癌由于失去最佳的根治性手術(shù)治療時機，保守治療為理想方式，其中介入化療栓塞為最常見方式。單純介入栓塞治療目前在臨床中應(yīng)用廣泛，已經(jīng)取得了明確的治療效果，但是術(shù)后殘留腫瘤細胞可分泌大量血管生長因子，導(dǎo)致腫瘤血管新生及腫瘤復(fù)發(fā)，需反復(fù)進行介入治療[2]。多次介入治療科引起腫瘤細胞產(chǎn)生耐藥性，致后期治療效果驟降，且患者免疫功能逐步降低，對殘余腫瘤細胞的抵抗力降低，整體治療效果欠佳且反復(fù)治療給患者帶來巨大不良心理暗示。介入下熱療聯(lián)合化療栓塞是近年來學(xué)者較為推崇的整合治療方案，有望更為徹底地殺滅腫瘤細胞，減少腫瘤復(fù)發(fā)[3]。

肝癌為富含血管的惡性實體瘤，其生長快、易發(fā)生肝內(nèi)播散及血行轉(zhuǎn)移，以上特性均依賴于腫瘤內(nèi)血管生成。細胞因子中VEGF是目前已知的特異性作用于血管內(nèi)皮的唯一生長因子，可以直接參與腫瘤血管生成[4]。諸多文獻中已經(jīng)證實腫瘤患者血清VEGF水平明顯高于正常人群，其升高程度更是與腫瘤惡性程度呈正相關(guān)，可見VEGF是腫瘤惡性行為的始動因素之一。上述研究顯示觀察組患者在接受介入熱化療栓塞治療后各個時間點的血清VEGF水平低于對照組，可能與介入熱療促使腫瘤供血微血管擴張，增加癌細胞膜流動性，增加了對化療藥物的吸收及滲透，使細胞內(nèi)化療藥物濃度大幅上升，顯著增強了腫瘤細胞殺滅效果，進一步抑制其相關(guān)細胞因子表達活性及腫瘤血管新生能力，VEGF水平順勢降低[5-6]。

越來越多的研究證實，MMP家族在惡性腫瘤的發(fā)生發(fā)展過程中扮演著重要角色，MMP是由多種鋅離子依賴性酶組成的酶系家族，通過降解細胞外基質(zhì)、促進腫瘤血管生成等生理過程而發(fā)揮促進腫瘤生長、轉(zhuǎn)移的作用[7]。MMP家族亞型眾多，其中MMP-2、MMP-9和MMP-13是研究較為熱點的基因。MMP-2是MMP家族中與腫瘤關(guān)系最為密切的因子之一，可以特異性降解基底膜主要成分Ⅳ型膠原，同時對細胞外基質(zhì)進行改建，促進腫瘤新生血管的形成[8]。MMP-9屬于明膠酶，可以降解變性膠原蛋白，通過在酶鏈的解除域上插入3個纖維連接蛋白域，分別結(jié)合膠原酶、明膠酶及層粘連蛋白。MMP-13屬于膠原酶，可以也一下分解膠原蛋白。OSAWA等[9]的研究證實在肝癌患者中MMP各亞型均高表達，且轉(zhuǎn)移性肝癌中表達量高于非轉(zhuǎn)移性肝癌。上述研究顯示觀察組患者在接受介入熱化療栓塞治療后的血清MMP-2、MMP-9和MMP-13蛋白表達水平明顯降低，可見在常規(guī)介入化療栓塞時加入熱療，可以打開栓塞后腫瘤末梢因低氧而暫時關(guān)閉的血管，使得栓塞更為充分，對殘存腫瘤細胞的刺激小，腫瘤的侵襲轉(zhuǎn)移能力大幅降低，在指標(biāo)上直接表現(xiàn)為MMP家族因子水平的降低。

HIF是人體缺氧狀態(tài)下調(diào)節(jié)細胞內(nèi)氧代謝的關(guān)鍵因子之一，可以誘導(dǎo)血管生長因子表達及新生血管形成、促進腫瘤生長。以上討論的VEGF及MMP均部分受HIF調(diào)控，其變化可能早于VEGF及MMP表達的變化，故HIF水平的變化成為準(zhǔn)確預(yù)測腫瘤治療效果及遠期復(fù)發(fā)可能性的因子之一。肝癌患者存在一定的免疫功能障礙，這與多種細胞因子及其受體相關(guān)，其中促炎因子IFN-γ和TNF-α等發(fā)揮重要作用。IFN-γ是肝細胞再生始動因子，TNF-α可作用于成纖維細胞及腫瘤基質(zhì)細胞，誘導(dǎo)分泌包括VEGF在內(nèi)的大量因子，促進全身炎癥反應(yīng)及腫瘤血管再生。上述研究顯示觀察組患者接受介入熱化療栓塞治療后的血清HIF表達量大幅降低，血清IFN-γ和TNF-α水平亦明顯降低。這與以上VEGF及MMP表達降低的結(jié)果相一致，更加說明了介入化療栓塞中加入熱療可以更徹底殺滅腫瘤細胞，有助于減輕患者全身炎癥狀態(tài)，且減少參與腫瘤細胞的血管新生及轉(zhuǎn)移的活性，有利于減少后期腫瘤復(fù)發(fā)，延長患者生存時間。

綜上所述，介入熱化療栓塞治療可以明顯降低肝癌患者血清VEGF和MMP含量，減少缺氧誘導(dǎo)因子表達，減輕全身炎癥狀態(tài)。

[1]劉敏,曾霞.Glypican3、MMP-9和MMP-14在原發(fā)性肝癌中的表達與臨床意義[J].重慶醫(yī)學(xué),2014,43(2):173-175.

[2]管清龍,紀(jì)衛(wèi)政,任偉新.肝癌介入治療后血清缺氧誘導(dǎo)因子和血管內(nèi)皮生長因子含量變化對預(yù)后的影響[J].介入放射學(xué)雜志, 2014,23(2):142-144.

[3]孫志強,陳健,劉正麗.介入熱化療栓塞對肝癌患者血清細胞因子水平變化的臨床研究[J].實用腫瘤雜志,2014,29(3):250-252.

[4]BERTOLOTTI M,LONARDO A,MUSSI C,et al.Nonalcoholic fatty liver disease and aging:Epidemiology to management[J].World J Gastroenterol,2014,20(39):14185-14204.

[5]WIRASORN K,SUWANRUNGRUAG K,WIANGNON S,et al. Numbers of new cases and trends of cancer 1993-2012:srinagarind hospital based population,khon kaen,north-East Thailand [J].Asian Pac J Cancer Prev,2014,15(19):8423-8427.

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[7]DAI B,RUAN B,WU J,et al.Insulin-like growth factor binding protein-1 inhibits cancer cell invasion and is associated with poor prognosis in hepatocellular carcinoma[J].Int J Clin Exp Pathol,2014,7(9):5645-5654.

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（王榮兵 編輯）

Effect of interventional heated chemotherapy on patients with hepatocarcinoma and clinical value of serum VEGF and MMP levels

Jin-cheng XIAO,Jing LI,Hai-liang LI,Chen-yang GUO
(Department of Intervention,the Affiliated Cancer Hospital of Zhengzhou University, Zhengzhou,Henan 450000,P.R.China)

【Objective】To analyze the effect of interventional heated chemotherapy on hepatocarcinoma patients' serum VEGF,MMP levels and its clinical value.【Methods】The patients with hepatocarcinoma in our hospital were chosen as research objects,and randomly divided into control group with routine interventional treatment,observation group with interventional heated chemotherapy.The serum VEGF,MMP levels,serum levels of hypoxia inducing factors and inflammatory factors in two groups were compared.【Results】Serum VEGF levels of observation group patients was significantly lower than those of control group patients(P<0.05).Serum MMP-2,MMP-9,MMP-13 levels of observation group patients were significantly lower than those of control group patients(P<0.05).Serum HIF,IFN-γ,TNF-α levels of observation group patients were significantly lower than those of control group patients (P<0.05).【Conclusion】Interventional heated chemotherapy could obviously reduce hepatocarcinoma patients' serum VEGF,MMP,reduce hypoxia inducing factor expression,and relieve systemic inflammation.

hepatocarcinoma;interventional heated chemotherapy;VEGF;MMP

R735.7

B

1005-8982（2015）25-0087-04

2015-01-11