秀珍菇固體專用菌種液化生產自動接種技術與固液兩態菌種的出菇比較

余維良 鄭明海 方國平 余承勇

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秀珍菇固體專用菌種液化生產自動接種技術與固液兩態菌種的出菇比較

余維良1鄭明海1方國平2余承勇1

（1.開化縣農業科學研究所，浙江 開化 324300；2.浙江菇老爺食品有限公司，浙江 開化 324300）

介紹秀珍菇液化菌種生產自動接種技術，其工藝流程為專用固體菌種（菌絲塊）→菌種液化（原始液制備）→二級液化工藝→流水線自動接種→菌袋菌絲培養→開袋出菇→采收。總結液化菌種袋與固體菌種袋出菇的比較試驗結果：液化種菌袋比固體種菌袋的菌絲粗壯，結實；栽培袋成品率液化種為98.8%，固體種為93.5%；液化種的秀珍菇總產量比固體種提高4.7%。比較指出兩種接種方式的接種效率、菌種成本和產量質量的差異性。

秀珍菇；液化菌種；固體菌種；自動接種；比較試驗

目前，我國食用菌生產中普遍采用的傳統三級固體菌種繁育工藝，生產效率低，培養周期長，菌種染菌率高，無法突破手工化、作坊式生產模式，使規模企業與散戶制種處在同一競爭平臺，是造成目前食用菌生產安全、質量事故頻發的根源，也是食用菌企業效益欠佳的主要原因。在浙江大學食用菌研究中心的技術指導下，開化縣農業科學研究所承擔實施了開化縣科技局2014年立項的“秀珍菇液化菌種生產自動接種技術研究與應用”項目（項目編號2014008），研究秀珍菇固體專用菌種液化生產、自動接種和出菇管理技術。

1 秀珍菇液化菌種生產自動接種技術

1.1 生產工藝流程

專用固體菌種（菌絲塊）→菌種液化（原始液制備）→二級液化工藝→流水線自動接種→菌袋菌絲培養→開袋出菇→采收。

1.2 秀珍菇固體專用菌種液化技術

（1）專用固體菌種（菌絲塊）的選擇。為了確保液化菌種純度，專用固體菌種（菌絲塊）使用前必須認真檢查菌種來源、生產日期、純度等，秀珍菇專用固體菌種（菌絲塊）必須在5 ℃環境下保存，保質期30天。

（2）菌種液化原始液制備。將秀珍菇專用固體菌種（菌絲塊）通過勻漿儀粉碎，菌絲塊與無菌水1︰3制得菌種液化原始液。

（3）液化原始液二次稀釋技術。采用無菌操作，將液化原始液按1︰35進行稀釋，菌液與無菌水充分混合后攪拌5 min，使菌液充分均勻后方可接種。

通過采用此工藝，菌液有極高的純度、良好的種性，同時還有良好的流動性和均質性，菌絲在液化培養中大小均勻，提高了菌液質量和活力。

1.3 液化菌種流水線自動接種技術

（1）接種前準備。待滅菌鍋氣壓降至零時打開鍋門，及時出鍋，漲、破菌袋分開，輕拿輕放防止破袋，連同推車放在接種室。搬運結束進行消毒。待菌袋降溫至30 ℃以下時接種。

（2）液化接種流水線滅菌。液化罐、空氣過濾器、管道的滅菌在投料前，氣路、料路、液化罐必須用蒸汽進行滅菌，消除所有死角的雜菌，確保系統處于無菌狀態。

液化罐滅菌：打開液化罐進料口加水100 L，而后密封。及時通蒸汽，至壓力表達1.5～2 kg/cm2、溫度表指示121 ℃時，即可進行過濾器、管道和接種流水線滅菌，保持蒸汽暢通1 h。

過濾器滅菌：首先關閉進氣閥閥門，而后打開蒸汽閥閥門，同時少許打開管道排氣閥，幾分鐘后排氣閥有蒸汽排出，保持1 h。

接種流水線滅菌。待溫度表指示121 ℃時，打開液化罐接種閥門，使之處于正常工作狀態，然后打開接種放液閥門，保持蒸汽暢通1 h。

（3）液化接種技術。①液化罐接種：接種前把無菌接種過濾器移入液化罐上方位置，向罐內通氣，使罐有空氣排出，保持罐內始終處于正壓狀態，用酒精棉花圍住接種口周圍并點燃，戴上醫用厚手套，擰開接種口，在酒精火焰的保護區內將菌種接入罐內。然后將接種口蓋在火焰上，經滅菌后擰緊，最后熄滅火焰。②流水線自動接種：利用氣壓差將工藝液體壓出，罐壓可控制在0.05 MPa，不要超過允許范圍。菌種接入罐內打開進氣閥恒壓狀態，稍開放氣閥，讓罐內菌液攪拌5 min，使菌液充分均勻。而后打開出料管閥門，接種機置于工作狀態時，即可開始接種，每袋用種量25 mL。③液化罐、管道清洗：出料結束后，應立即放水清洗液化罐及料路管道閥門，并開動空壓機，向液化罐供氣攪拌，沖洗干凈管道的菌液。

1.4 液化菌種接種菌袋的菌絲培養和出菇管理技術

（1）菌絲培養。經接種的菌包及時搬運到培養場地，每天排放結束后用消毒盒消毒，溫度前7天控制在25 ℃，而后控制在22～23 ℃，每天記錄培養溫度；濕度控制在60%～65%，早晚打開排風扇通風各1 h，保持培養室空氣新鮮。接種后經30天培養，菌絲基本長滿袋，但長勢參差不齊，需再培養10天左右使菌絲后熟。

（2）適時開袋。菌包接種后經40天左右培養，菌絲長滿全袋，即可上架排場。繼續培養10天左右，促進原基形成，結合制冷設施循環利用，實行分批搔菌出菇。

（3）溫差刺激，促使菇蕾形成。第一潮菇開袋出菇，采用10 ℃以上溫差刺激，形成的菇蕾整齊，潮次分明。若一潮菇自然出菇，二潮菇溫差刺激出菇，形成菇蕾參差不齊，影響子實體產量與品質。

（4）出菇管理。開袋后及時蓋上農用薄膜保濕，菇房溫度控制在25～27 ℃，濕度控制在85%～90%，一般在適宜的環境下3～5天即可出現菇蕾。此時不要向菇蕾直接噴水，以免造成菇蕾死亡。等到子實體菇柄伸長達2～3 cm以后、菌蓋直徑達1 cm 以上時，可以用噴霧器結合通風向子實體噴霧狀水。盡量不要噴施“關門水”，以免造成濕度過大，通風不足而導致病害發生。

（5）采收。子實體菌蓋直徑達到3～4 cm，便可以采收，采大留小。溫度高于28 ℃，子實體生長快，24 h不間斷采收；并及時入冷庫保存，以保證鮮菇的品質。

（6）轉潮管理。第一潮采收后，除去殘留的菇柄及死菇，停止噴水，增加通風量，養菌約20天后菌袋浸水24 h左右，直至菌袋表面軟化。推進5 ℃冷庫保持12～15 h，再上架出菇，一般20天左右可采收。按以上管理方法進行下一潮的催蕾、出菇管理，整個生長周期采收6～7潮菇。

2 液化菌種袋與固體菌種袋的出菇比較

2.1 材料與方法

（1）供試菌株。秀珍菇液化種由浙江大學食用菌研究中心提供；固體栽培種由浙江菇老爺食品有限公司提供。

（2）試驗配方。棉籽殼48%，木屑30%，麩皮15%，玉米粉5%，石膏粉1%，石灰粉1%。

（3）試驗方法。試驗在開化縣東青合作社和月明合作社內進行。于2013年9月24～25日開始制袋，按常規生產拌料，裝袋，滅菌。采用規格為18×38（cm）的聚乙烯袋，每袋裝干料0.6 kg（濕料重1.25 kg），料高18～19 cm，料中間打孔，用無棉蓋封口。滅菌壓力1.2～1.3 MPa，保持3.5 h；出鍋后用制冷機將菌袋溫度降到28 ℃后開始接種。9月26～27日分別利用“zju-8”型封閉連續智能液化系統及自動接種流水線接液化種，用接種箱接固體種，各5 200袋，置于培養室，培養室溫度控制在24～27 ℃。觀察發菌情況，記錄萌發及滿袋時間，長速和污染情況，統計成品率。菌絲滿袋后按常規方法進行出菇管理，比較產量、商品性、生物轉化率、抗逆性和發病率。

2.2 試驗結果

（1）發菌情況。液化種栽培袋菌種定植萌發需19 h，菌絲封面吃料需5天，15天后菌袋中間及底部袋壁出現菌絲，菌絲發滿的時間為32～35天，菌絲日平均長速0.475 cm；固體種栽培袋菌種定植萌發時間24 h，菌絲封面吃料時間5～6天，菌絲滿袋時間45～48天，菌絲日均長速0.42 cm。直觀對比的結果表明，液化種菌袋比固體種菌袋結實，菌絲萌發快、粗壯。栽培袋成品率液化種為99.2%，固體種為92.5%（表1）。

（2）出菇情況。液化種和固體種最早一批在11月5日上架、解環蓋，11月7日割袋口，11月9日和10日液化種和固體種原基形成，11月15日開始采收第一潮菇，按各品種農藝性狀記錄，統計產量。根據前兩潮出菇情況分析結果，液化種比固體種出菇密度大，前者子實體單生，產量略高，商品性菇比例比固體種高20%。

表1 秀珍菇液化種與固體種菌絲培養階段的狀況比較

注：試驗地點為東青合作社。接種和菌絲吃料日期格式為月/日。

本次試驗采用溫差刺激出菇方式，分批進行開袋，每批可采收5潮菇，統計總產量，液化菌種比固體菌種產量提高4.7%（表2）。

3 秀珍菇液化菌種與固體菌種的比較

表2 栽培袋液化種與固體種農藝性狀產量的比較

表3 液化種與固體種生產成本對比表

3.1 接種效率與菌種成本

以生產1萬袋秀珍菇為例。僅考慮液化菌種新工藝就可減少用種量90%，菌種成本節省95%（不包括縮短栽培周期、提高單產等增值部分），詳見表3。如綜合考慮如下因素，則效益更加顯著：一是由于用種量減少，相應地降低了固定資產投入、管理成本和能耗等，大幅節約了社會資源；二是可以使菌種規模化高效繁育成為現實。液化菌種不僅用量少，且保質期長達20天，同時還可實現種質的同步檢測，與生產性栽培時間一致，克服了常規固體三級菌種培育時的種性檢測延后的弊端；三是為栽培生產環節的傳統食用菌產業升級轉型提供了技術保障。液化菌種新工藝的應用，可使香菇、木耳、金針菇等傳統分散栽培、量大面廣的季節性生產菇種實現工廠化育袋（菌袋工廠）、分散性栽培管理的新模式，從而徹底解決目前產業中存在的各種弊端，使產業發展走上可持續的良性軌道。

“zju-8型” 封閉連續智能液化系統包括20 L液化罐、100 L-100 L（2個）稀釋罐、蒸汽滅菌裝置、通氣裝置、循環冷卻裝置及系統儀表自控裝置等部分，可實現對菌種液化-接種等系統全部功能的人工智能化控制。系統單產液化菌種能力為200 L，可接固體栽培袋5 000袋，日可生產2次，接種1萬袋。液化菌種菌液滲透性好，可縮短發菌時間10～15天，菌絲健壯，成品率比固體菌種提高6.7%；流水線接種縮短接種時間，降低人工及材料費用30%，兩項合計每袋節約成本0.16元（表4）。

表4 液化與固體接種成品率、人工費用和節本增效統計表

注：供試菌種數量均為5 000袋。

3.2 產量和質量比較

通過2013—2014年連續兩年不同點的秀珍菇液化菌種與固體菌種的子實體商品性狀及產量的比較，液化菌種子實體單生，勻稱美觀，潮次明顯，優質菇比例達86%以上，鮮菇增產5.4%。出菇后發病率0.5%，比固體菌種下降1.5%（表5）。

目前，我國食用菌主要以家庭分散式生產為主，而食用菌生產又是勞動密集型，單一生產成本高，抵御市場能力弱。采用食用菌液化菌種生產接種技術，有顯著優勢，降低勞動強度，大幅度降低生產成本，提高生產效率。推廣食用菌液化菌種生產接種技術，需以“公司＋合作社+農戶”的發展模式，形成以公司為龍頭成立定點菌包加工廠，合作社、農戶負責出菇管理，減少菇農固定設備投資，降低菌袋生產風險。

表5 秀珍菇液化與固體菌種子實體產量及商品性狀對比試驗

4 小結

在培養溫度23～27 ℃、菌袋濕度適宜的條件下，液化種栽培袋比固體種栽培袋發菌快，菌絲白，粗壯有力，成品率穩定。自然季節栽培秀珍菇，出菇溫度一般控制在13～25 ℃范圍內，溫度低于10 ℃或高于28 ℃時子實體易發黃萎縮和產生畸形菇，液化種菌袋比固體種菌袋出菇密度大，子實體單生，產量高，商品菇比例高，菌袋轉潮快、抗逆性強、不易軟化。

致謝 本課題得到國家食用菌產業體系和開化縣科技項目資金的資助。課題實施得到浙江大學陳再鳴副教授的技術指導，在此一并致謝。

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2095-0934（2015）02-102-04