苗藥組方二巖虎果湯的止咳平喘作用

饒 海 桂珊珊 周 鎂 黃秀平 覃容貴 (貴陽市云巖區人民醫院，貴州 貴陽 550003)

二巖虎果湯是貴陽醫學院附屬醫院名老中醫饒天培經驗方，其復方組成均為苗藥，藥味較為簡單，由巖豇豆、巖白菜、虎杖、巖果四味組成，具有清熱、止咳、化痰平喘功效。主治風熱犯肺、痰熱內蘊所致咳嗽 、哮喘。本方性涼，為支氣管炎、肺炎、哮喘常用方。方中以巖豇豆，味辛微甘，性平，入肺、脾二經，辛涼解表，宣肺止咳，為君藥;巖白菜清血熱，補虛止咳為臣藥;虎杖清熱解毒，化痰止咳為佐藥;巖果養陰清肺、化痰止咳，為使藥。諸藥合用共奏清熱除邪、宣肺止咳、降氣化痰、潤肺瀉火之效。該方臨床用于治療急性支氣管炎、大葉性肺炎、小兒哮喘等，無不應手取效，且臨床應用多年未見不良反應。本研究擬驗證二巖虎果湯的止咳、祛痰、平喘、抗炎等藥理作用，為二巖虎果湯的推廣應用奠定實驗基礎。

1 材料與方法

1.1藥物 巖豇豆、巖白菜、虎杖、果上葉均購于貴陽市萬東橋藥材市場，由云巖區人民醫院副主任醫師饒海鑒定為正品。鹽酸氨溴索分散片(30 mg/片，珠海經濟特區生物化學制藥廠，批號:20111001);阿司匹林腸溶片(25 mg/片，江蘇平光制藥有限責任公司，批號:120302);復方巖白菜素片(125 mg/片，云南白藥集團大理藥業有限責任公司，批號:20120201)。

1.2試劑 苯酚紅(天津市大茂化學試劑廠，批號:20120623);濃氨水(重慶川江化學試劑廠，批號:20100928);二甲苯(中國上海試劑廠，批號:80-07-01);NaHCO3(西隴化工股份有限公司，批號:111022-1);羧甲基纖維素鈉(中國醫藥公司北京采購供應站，批號:881018)。

1.3儀器 721紫外分光光度計(型號:UV-3100，上海美普達儀器有限公司);旋轉蒸發儀(型號:R308，上海申生科技有限公司);數字控溫電熱套(型號:98-1-C，天津市泰斯特儀器有限公司);電子分析天平(型號:AL204，梅特勒-托利多儀器有限公司);超聲霧化器(型號:402AI，江蘇魚躍醫療設備);打孔器(直徑:5 mm)。

1.4實驗動物 昆明種小鼠體質量18～22 g，豚鼠體質量180～220 g，均雌雄兼用(貴陽醫學院實驗動物中心提供)。

1.5方法

1.5.1供試藥物劑量設計及制備 ①劑量設計:二巖虎果湯原方組方為:巖豇豆、巖白菜、虎杖、果上葉各30 g，單味藥人用劑量為0.5 g/kg，換算小鼠用量為5 g/kg，以此為低劑量組，中、高劑量組分別設計為10 g/kg和20 g/kg。換算豚鼠用量為2.5 g/kg，以此為低劑量組，中、高劑量組分別設計為5 g/kg和10 g/kg。②藥物制備:按組方配比以10倍量水煎煮兩次，每次2 h，過濾，濾液濃縮，用蒸餾水稀釋至所需濃度。

1.5.2對濃氨水噴霧致小鼠咳嗽的影響〔1～3〕取小鼠50只，雌雄各半，隨機分成5組，分別為正常對照組、二巖虎果湯低、中、高劑量組(5、10、20 g/kg)、陽性對照復方巖白菜組(56 mg/kg)，每組10只。灌胃給予相應藥物，正常對照組給予等體積的蒸餾水，各組按20 ml/kg體重灌胃給藥，每日一次，連續7 d。于末次給藥60 min后將小鼠逐只置于噴霧室中，以濃氨水定量恒壓噴霧10 s后立即取出，記錄小鼠開始出現咳喘的時間，即咳喘潛伏期，繼續觀察并記錄3 min內的咳喘次數。以腹肌收縮，同時張開大口為指標計咳嗽一次。

1.5.3對小鼠氣管酚紅排泌量的影響〔1，2，4，5〕取小鼠50只，雌雄各半，隨機分成五組，分組及給藥同1.5.2，陽性對照組給予鹽酸氨溴索(100 mg/kg)。于末次給藥30 min后按0.1 ml/10 g，腹腔注射5%酚紅-生理鹽水溶液，30 min后處死小鼠，分離氣管，取喉結至氣管分叉處一段氣管約1 cm置于2.0 ml 5%NaOHCO3溶液中，超聲波清洗30 min，使器管段中的酚紅完全釋放，再以2 000 r/min離心5 min，用紫外可見分光光度計于558 nm處測吸光度，根據標準曲線方程計算酚紅排泌量。

1.5.4對磷酸組胺和氯化乙酰膽堿混合液致豚鼠咳喘潛伏期的影響〔6，7〕動物篩選:將豚鼠60只，雌雄兼用，依次置于密閉容器內，待安靜后，啟動超聲霧化器，恒壓將0.1%磷酸組胺-2%氯化乙酰膽堿混合液(1∶1)噴入容器中，噴霧時間為15 s，繼續密閉容器觀察。觀察豚鼠的引喘潛伏期(從噴霧到哮喘發作，呼吸極度困難，直至抽搐跌倒的時間)，選用引喘潛伏期小于150 s的豚鼠備用。取經過篩選的50只豚鼠，雌雄各半，隨機分為五組，每組10只，分別為正常對照組、二巖虎果湯低、中、高劑量組(2.5、5、10 g/kg)、陽性對照氨茶堿組(0.1 g/kg)。灌胃給予相應藥物，正常對照組給予等體積的蒸餾水，各組按10 ml/kg體重灌胃給藥，每日1次，連續7 d。末次給藥30 min，將豚鼠逐只置于密閉容器內，按預選條件噴霧致喘，觀察和記錄豚鼠引喘潛伏期。

1.5.5對二甲苯致小鼠耳腫脹率的影響〔1～3，8〕取小鼠50只，雌雄各半，隨機分成5組，分組及給藥同1.5.2，陽性對照組給予阿司匹林(0.2 g/kg)。于末次給藥40 min后在小鼠右耳兩面涂二甲苯0.04 ml致腫，左耳不涂為正常對照耳，1 h后脫頸椎處死，用直徑5 mm打孔器打下左耳和右耳同一部位的耳片，電子分析天平上稱重，計算耳腫脹率。

1.6統計學方法 采用SPSS17.0統計軟件包行t檢驗。

2結果

2.1對濃氨水噴霧致小鼠咳嗽的影響 二巖虎果湯中、高劑量能延長小鼠咳嗽潛伏期，各劑量均能降低小鼠3 min內咳嗽次數(P＜0.05)。見表1。

表1 二巖虎果湯對濃氨水噴霧致小鼠咳嗽的影響(x ± s，n=10)

2.2祛痰實驗結果 正常對照組小鼠氣管酚紅排泌量為(0.82±0.32)μg/ml，二巖虎果湯中、高劑量能增加小鼠氣管酚紅排泌量與正常對照組差異顯著〔(1.75±0.29)、(2.24±0.46)μg/ml，P＜0.05〕，二巖虎果湯低劑量組與正常對照組無顯著差異〔(1.08±0.23)μg/ml，P ＞0.05〕。

2.3對磷酸組胺和氯化乙酰膽堿混合液致豚鼠咳喘潛伏期的影響 氨茶堿及二巖虎果湯低、中、高劑量均能延長豚鼠咳喘潛伏期，與正常對照組差異顯著〔(325.7±9.1)、(249.2±13.6)、(259.4 ±12.4)、(232.4 ±10.2)vs(94.8 ±6.4)s，P ＜0.05〕。

2.4對二甲苯致小鼠耳腫脹率的影響 阿司匹林二巖虎果湯低、中、高劑量均能降低小鼠耳腫脹率，與正常對照組〔(33.8±10.0)%、(85.7±8.6)%、(70.4±9.4)%、(37.5±9.2)%vs(135.2±18.5)%，P ＜0.05〕。

3討論

本實驗結果可知，二巖虎果湯有顯著的止咳、祛痰、平喘、抗炎作用。組方中巖豇豆主要成分石吊蘭素具有抗炎、抗結核的作用〔9〕;巖白菜主要成分巖白菜素具有止咳、免疫增強、抗氧化作用〔10〕;虎杖含有白藜蘆醇、白藜蘆醇苷等物質，具有抗菌、鎮咳平喘作用〔11〕;果上葉含有三萜類化合物，具有鎮痛、抗氧化、抑制NO生成、止咳作用〔12〕。二巖虎果湯組方的藥效涵蓋了四味藥物的藥理作用，該方臨床用于治療急性支氣管炎、大葉性肺炎、小兒哮喘等，具有良好的療效，實驗結果與臨床療效一致。組方的藥理活性與其化學成分密切相關，研究結果為復方的物質基礎研究提供了依據，也為其開發、利用提供了理論基礎。

1 鄧晶晶，盧先明，蔣桂華.枇杷花鎮咳祛痰和抗炎的藥效學研究〔J〕.時珍國醫國藥，2006;17(12):2469-70.

2 隋利強，張 欣，呂文海.三子養親湯鎮咳、祛痰作用研究〔J〕.中醫學導報，2009;15(2):81-2.

3 王慶端，江金花，孫 文.千金藤素抗炎鎮痛作用的實驗研究〔J〕.中國藥學雜志，1999;34(9):594-7.

4 潘 勇，韋健全，鄭子敏.木蝴蝶對小鼠的鎮咳祛痰作用研究〔J〕.右江民族醫學院學報，2008;30(4):550-1.

5 梁惠嬋，肖百全，連雪科.太白貝母祛痰實驗研究〔J〕.中國民族民間醫藥雜志，2010;19(15):82-3.

6 包桂蘭，杜智敏，趙中華.五味沙棘散止咳祛痰平喘作用的實驗研究〔J〕.現代中西醫結合雜志，2009;18(3):243-7.

7 海力茜·陶爾大洪，周 芳，楊 珊，等.維藥恰麻古兒止咳、祛痰及平喘的藥效學研究〔J〕.中成藥，2011;33(4):682-5.

8 莫遺盛，黃貴明，王冬梅.炎清口服液抗炎實驗研究〔J〕.中國現代藥物，2009;3(17):116.

9 張敬杰，胡成剛，楊立勇.布依藥巖豇豆本草學研究〔J〕.中國民族民間醫藥雜志，2003;6(5):362-4.

10 袁菊麗，索建蘭.巖白菜屬藥用植物的研究進展〔J〕.寶雞文理學院學報，2011;31(1):46-50.

11 康連香，王 瑛，賈彥超.虎杖的藥理研究和臨床應用〔J〕.中國中醫藥，2010;8(10):86.

12 劉 瑩，張云梅，金 永.石仙桃屬植物化學成分及藥理活性研究進展〔J〕.時珍國醫國藥，2007;8(7):1631-3.