李 影 張東浩
(吉林省結(jié)核病醫(yī)院,吉林 九臺(tái) 130500)
531株結(jié)核分枝桿菌的藥敏分析
李 影 張東浩
(吉林省結(jié)核病醫(yī)院,吉林 九臺(tái) 130500)
目的 對(duì)結(jié)核分枝桿菌的藥敏試驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行分析,根據(jù)敏感率和耐藥率情況為臨床制定治療方案和選擇用藥提供參考依據(jù)。方法 采用羅氏培養(yǎng)基培養(yǎng)臨床標(biāo)本,藥物敏感試驗(yàn)用液體培養(yǎng)基和96孔U型細(xì)菌鑒定及藥敏試劑板。結(jié)果 對(duì)16種分枝桿菌治療藥物進(jìn)行藥敏測(cè)定,其中耐藥率最高的是氯法齊明,其次是鏈霉素,分別是92.7%和39.5%,敏感率最高的是利奈唑胺,敏感度為95%,氟喹諾酮類藥物對(duì)結(jié)核分枝桿菌也有較強(qiáng)的抑菌效果。非結(jié)核分枝桿菌藥物克拉霉素對(duì)結(jié)核分枝桿菌也具有較好的抑菌效果。結(jié)論 本文對(duì)531株結(jié)核分枝桿菌的藥敏試驗(yàn)進(jìn)行分析,認(rèn)為對(duì)復(fù)治的肺結(jié)核患者痰培養(yǎng)和藥敏試驗(yàn)是必要的,臨床用藥可以適當(dāng)考慮選用氟喹諾酮類藥物和克拉霉素。
結(jié)核;分枝桿菌;藥敏
肺結(jié)核是慢性傳染病,病原菌主要是結(jié)核分枝桿菌,隨著耐藥結(jié)核病的流行和傳播,臨床醫(yī)師在抗結(jié)核治療過程中越來越希望獲得臨床檢驗(yàn)室的結(jié)核分枝桿菌的藥敏試驗(yàn),以便通過試驗(yàn)結(jié)果更加有效的對(duì)患者,特別是對(duì)耐藥結(jié)核病患者實(shí)施合理的抗結(jié)核治療。為了滿足臨床醫(yī)師治療結(jié)核病的選擇用藥的需要,本文對(duì)531株培養(yǎng)陽性的菌株進(jìn)行藥敏試驗(yàn),報(bào)道如下,以供臨床用藥參考。
1.1一般資料:本文對(duì)我院2013年12月至2014年11月內(nèi)科和胸科住院肺結(jié)核患者1112例,其中男610例,女502例,年齡18~76歲。對(duì)患者的痰標(biāo)本進(jìn)行分離培養(yǎng)并鑒定,獲得531株結(jié)核分枝桿菌,并進(jìn)行16種分枝桿菌治療藥物的藥物敏感試驗(yàn)。儀器GH6000型隔水式培養(yǎng)箱,由天津市泰斯特儀器有限公司生產(chǎn)。
1.2方法:分離培養(yǎng)用羅氏培養(yǎng)管(酸性),由珠海貝索生物技術(shù)有限公司生產(chǎn)。結(jié)核分枝桿菌鑒定和藥敏試驗(yàn)采用96孔U型細(xì)菌鑒定及藥敏試劑板,藥敏試驗(yàn)培養(yǎng)基用肉湯培養(yǎng)基,由上海積彩醫(yī)療器械有限公司生產(chǎn)。
1.2.1菌型鑒別:根據(jù)陽性生長(zhǎng)對(duì)照孔、噻吩-2-羧酸酰肼藥物孔、對(duì)硝基苯甲酸藥物孔三孔生長(zhǎng)快慢及陽性、陰性情況判定鑒定結(jié)果。生長(zhǎng)緩慢,噻吩-2-羧酸酰肼藥物孔陽性,對(duì)硝基苯基酸藥物孔陰性的鑒定為結(jié)核分枝桿菌。
1.2.2藥敏試驗(yàn):用的藥物共16種,鏈霉素、異煙肼、利福平、乙胺丁醇、氧氟沙星、左氧氟沙星、阿米卡星、卷曲霉素、丙硫異煙肼、力克肺疾、莫西沙星、環(huán)丙沙星、克拉霉素、利奈唑胺、利福布丁、氯法齊明。
1.2.3藥敏試劑板的使用方法。菌處理:將培養(yǎng)后的菌株磨菌比濁至1麥?zhǔn)蠁挝?。加樣:為避免污染需?yán)格按生物安全標(biāo)準(zhǔn)在無菌的生物安全柜中操作。每4排孔檢測(cè)一株菌,每板做兩株菌。培養(yǎng)、觀察:接種后將藥敏板置37 ℃孵箱中培養(yǎng),3~14 d內(nèi),板上覆蓋隨盒膜片,置反射鏡上觀察結(jié)果。結(jié)核分枝桿菌需5~14 d觀察結(jié)果。
對(duì)培養(yǎng)分離鑒定出的531株結(jié)核分枝桿菌進(jìn)行了16種藥物敏感試驗(yàn),其敏感、中介、耐藥的株數(shù)和百分率見表1(數(shù)字按順序依次是:敏感株數(shù)、百分率;低耐株數(shù)、百分率;高耐株數(shù)、百分率)。

表1 藥物敏感試驗(yàn)結(jié)果
敏感的藥敏結(jié)果判定標(biāo)準(zhǔn)。敏感:低濃度藥物孔菌量<1/10參照孔,甚至1/100參照孔菌量或無沉淀。耐藥分為低耐和高耐。低耐:低濃度孔生長(zhǎng),但高濃度孔抑制;高耐:高、低濃度孔均生長(zhǎng)。本文對(duì)我院從2013年12月至2014年11月呼吸內(nèi)科和胸科住院肺結(jié)核患者1112例痰標(biāo)本進(jìn)行分離培養(yǎng)并鑒定,獲得531株結(jié)核分枝桿菌,培養(yǎng)陽性率為47.6%。對(duì)531株結(jié)核分枝桿菌進(jìn)行16種藥物的藥物敏感試驗(yàn)。從上述結(jié)果中可以看出,4種一線抗結(jié)核藥物中,鏈霉素、異煙肼、利福平和乙胺丁醇的敏感度分別為52.7%、73.5%、62.7%、74.3%,而耐藥率最低的是乙胺丁醇。二線抗結(jié)核藥物中,阿米卡星和卷曲霉素的敏感度分別為88.7%和93%,敏感率明顯高于4種一線抗結(jié)核藥物,丙硫異煙胺的耐藥率最高,為75.5%;力克肺疾和利福布丁的耐藥率接近,分別為23.2%和20.2%,利奈唑胺的敏感度最高,為95%。4種喹諾酮藥物,氧氟沙星、左氧氟沙星、環(huán)丙沙星和莫西沙星的敏感度均在80%以上,分別為84.5%、87.4%、85.8%、86.6%,可見氟喹諾酮類藥物對(duì)結(jié)核分枝桿菌的抑菌作用是很高的??死顾刈鳛榉墙Y(jié)核分枝桿菌的治療藥物對(duì)結(jié)核分枝桿菌也有較好的抑菌效果[1],敏感度達(dá)到88.8%,提示克拉霉素有可能會(huì)成為一種有效的抗結(jié)核藥物,氯法齊明對(duì)結(jié)核分枝桿菌的耐藥率為92.7%,對(duì)結(jié)核分枝桿菌基本上無抑菌作用。通過531株結(jié)核分枝桿菌的藥物敏感試驗(yàn)分析可以看出對(duì)復(fù)治肺結(jié)核病患者的治療,首先要考慮做結(jié)核分枝桿菌分離鑒定,對(duì)培養(yǎng)陽性的標(biāo)本繼續(xù)作藥物敏感試驗(yàn)是必要的,臨床抗結(jié)核治療中在以鏈霉素、異煙肼、利福平和乙胺丁醇等一線抗結(jié)核藥物進(jìn)行治療的同時(shí),可適當(dāng)?shù)倪x用氟喹諾酮類藥物,克拉霉素也可以考慮應(yīng)用于結(jié)核病的治療。力克肺疾和利福布丁的敏感度均在70%以上,分別為71.8%和73.0%。也可以廣泛用于臨床肺結(jié)核病的治療。
[1]崔振玲,網(wǎng)潔,陸俊梅,等.結(jié)核分枝桿菌臨床分離株藥物結(jié)果與耐藥程度的關(guān)聯(lián)分析[J].中華檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志,2010,33(33):1145-1149.
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1671-8194(2015)26-0156-02