膿毒癥患者機體免疫變化與病情嚴重性的相關性分析

張福帥

（慶云縣人民醫院重癥醫學科，山東 德州 253700）

膿毒癥患者機體免疫變化與病情嚴重性的相關性分析

張福帥

（慶云縣人民醫院重癥醫學科，山東 德州 253700）

目的 分析不同程度膿毒癥患者機體細胞免疫水平的變化。方法 選擇2013年12月至2014年12月山東省慶云縣重癥醫學科診斷膿毒癥患者120例，依據入院24 h內病情程度將患者分為膿毒癥組、嚴重膿毒癥組與膿毒癥性休克組各40例，取門診健康查體者30例作為對照組。入組患者分別于發病后24 h內晨空腹抽取肘靜脈血，利用流式細胞儀檢測患者外周血T細胞亞群免疫指標：CD4+T細胞、CD4+CD25+調節性T細胞（Treg）、輔助T細胞17（Th17）亞群水平及Treg/Th17比值變化。相關性分析Treg/Th17比值與APACHE-Ⅱ評分關系。結果 發病后，3組膿毒癥患者CD4+T細胞、Treg、Th17細胞水平與對照組比較明顯升高，隨病情程度加重，4組患者水平差異有統計學意義（P＜0.05）。但Treg/Th17比值隨病情加重，比值逐漸降低，4組比較，水平差異有統計學意義（P＜0.05）。Treg/Th17比值與APACHE-Ⅱ評分呈直線負相關（r=-0.503，P＜0.05）。結論 膿毒癥患者發病后，機體細胞免疫水平呈現不同程度反應性增加。隨著病情發展變化不同，機體呈現不同程度的免疫反應。膿毒癥患者病情越重，機體表現免疫抑制增加。輔助性T細胞17與調節性T細胞比例失衡，CD4+T淋巴細胞調節功能紊亂。Treg/Th17比值與反應膿毒癥患者病情程度評分APACHE-Ⅱ評分呈直線負相關。

膿毒癥；免疫失衡；相關性

膿毒癥是臨床重癥醫學研究重點，具有發病率高，病情重，病死率高特點。膿毒癥以體內嚴重炎性反應失衡為主要病理特點。促炎反應/抑炎反應失衡是臨床發病的主要基礎。現代免疫學研究［1-2］證實，膿毒癥患者繼發性臟器損傷與免疫應答反應失衡關系密切。抑制性T細胞與輔助性T細胞比例失衡可能是嚴重膿毒癥病情發展的主要原因之一。課題分析不同程度膿毒癥患者機體細胞免疫水平的變化，探討其與膿毒癥病情嚴重程度之間相關性。

1　資料與方法

1.1研究對象：選擇2013年12月至2014年12月山東省慶云縣重癥醫學科診斷膿毒癥患者120例，依據入院24 h內病情程度將患者分為膿毒癥組、嚴重膿毒癥組與膿毒癥性休克組各40例，取門診健康查體者30例作為對照組。對照組男18例，女12例，年齡（58.85±5.05）歲。膿毒癥組40例，男21例，女19例，年齡（58.94±5.27）歲。嚴重膿毒癥組40例，男20例，女20例，年齡（58.59±5.92）歲。膿毒癥性休克組40例，男21例，女19例，年齡（60.04±7.28）歲。膿毒癥診斷標準：①診斷符合2012年國際嚴重膿毒癥及膿毒癥性休克診治指南。②膿毒癥、嚴重膿毒癥、膿毒癥性休克分型參照指南進行。剔除標準為：①免疫結締組織疾病；②3個月內服用激素類及免疫調節劑者。本研究已獲醫院醫學倫理委員會批準，所有治療方案獲得患者或者家屬的知情同意，并與患者家屬簽署知情同意書。

表1　4組患者細胞免疫水平變化（）

表1　4組患者細胞免疫水平變化（）

注：APACHE-Ⅱ：急性生理學及慢性健康狀況評分。*：與對照組比較，差異有統計學意義（P＜0.05）

組別　　例數　APACHE-Ⅱ（分）　Treg（%） 　Th17（%）　Treg/Th17對照組　30　-　4.89±0.81　2.15±0.46　2.05±0.67膿毒癥組　40　17.95±3.71*　8.93±1.43*　4.94±0.86*　1.87±0.76*嚴重膿毒癥組　40　25.84±3.80*　11.76±2.31**　6.94±1.31*　1.53±0.81*膿毒癥性休克組　40　34.72±4.16*　15.90±2.87*　8.61±1.85*　1.04±0.83* F -2.904　2.891　3.075　3.189 P -0.005　0.005　0.003　0.003

1.2研究方法：入組患者分別于發病后24 h內晨空腹抽取肘靜脈血，完善相關化驗檢查，利用APACHE-Ⅱ評分反應膿毒癥患者病情嚴重性。檢測患者外周血T細胞亞群免疫指標： CD4+T細胞、CD4+CD25+調節性T細胞（Treg）、輔助T細胞17（Th17）亞群水平及Treg/Th17比值變化。相關性分析Treg/Th17比值與APACHE-Ⅱ評分關系。檢測方法測定淋巴細胞表面各種熒光素的熒光強度，以二維散點圖儲存，Cellques軟件分析數據，記錄陽性細胞百分率。流式細胞儀及Cellques軟件均購自美國BD公司，Ficoll 淋巴細胞分離液（美國Sigma公司產品）。

1.3統計學分析：采用SPSS 19.0統計軟件進行數據分析，計量資料用（）表示，采用F檢驗分析；相關性分析采用Spearson相關性分析，P＜0.05表示差異有統計學意義。

2　結 果

細胞免疫水平變化：發病后，3組膿毒癥患者CD4+T細胞、Treg、Th17細胞水平與對照組比較明顯升高，隨病情程度加重，4組患者水平差異有統計學意義（P＜0.05）。但Treg/Th17比值隨病情加重，比值逐漸降低，4組比較，水平差異有統計學意義（P＜0.05）。Treg/Th17比值與APACHE-Ⅱ評分呈直線負相關（r=-0.503，P＜0.05）。見表1、圖1。

圖1　Treg/Th17與APACHE-Ⅱ評分相關性

3　討 論

嚴重膿毒癥患者是以細菌等病源微生物及其釋放分泌毒素損傷機體組織細胞功能為主要發病機制。嚴重膿毒癥發病機制較為復雜。既往認為［3-4］，細菌、病毒等刺激釋放的細胞因子介導的炎性爆發性反應是組織細胞損傷的主要原因。現代醫學研究［5］顯示，機體的免疫功能可能也參與嚴重膿毒癥的發生、發展。免疫應答通過主要組織相容性復合體遞呈T淋巴細胞，繼而激活細胞免疫系統，誘發CD4+T細胞增殖。CD4+T細胞分為兩個亞群：輔助性T細胞（Th17為代表）與調節性T（ Treg）細胞。Th17細胞主要分泌白細胞介素-6、腫瘤壞死因子-a等促炎因子。Treg細胞分泌白細胞介素-10、TGF-β1等抑炎因子。Treg/Th17比值的平衡是膿毒癥病情好轉的關鍵。急性生理學及慢性健康狀況評分（APACHE-Ⅱ）是臨床評價嚴重膿毒癥患者病情嚴重程度的主要評價指標。其臨床評分高低與預后關系密切。為進一步探討不同程度的膿毒癥患者外周血中CD4+T細胞、CD4+CD25+調節性T細胞（Treg）、輔助T細胞17（Th17）亞群水平及Treg/Th17比值變化。進一步分析Treg/Th17比值與APACHE-Ⅱ評分關系性，課題試展開分析。

課題研究發現發病后，3組膿毒癥患者CD4+T細胞、Treg、Th17細胞水平與對照組比較明顯升高，隨病情程度加重，4組患者水平差異有統計學意義（P＜0.05）。研究結果表明膿毒癥患者隨著病情發展變化，其免疫炎性反應呈增加趨勢，機體處于一種復雜的動態免疫平衡狀態。隨著病情進一步加重，至膿毒癥性休克階段，Treg/ Th17比值隨病情加重，比值逐漸降低，4組比較，水平差異有統計學意義（P＜0.05）。相關性分析顯示Treg/Th17比值與APACHE-Ⅱ評分呈直線負相關（r=-0.503，P＜0.05）。Th17是近年來研究較多的一種CD4+T細胞亞群。Th17是主要的促炎細胞，Treg細胞具有廣泛的抑制功能，可以同時抑制Th17細胞的產生。輔助性T細胞亞群和調節性T細胞亞群之間的動態平衡對于維持機體自身免疫平衡穩定具有重要作用。任何炎性反應的產生及恢復均伴隨著免疫平衡系統關系的破壞。臨床研究表明［6］，Th17與Treg之間存在一種漂移關系。即Th17與Treg細胞間的比例平衡關系破壞可能在膿毒癥患者發病中占有重要地位。

課題研究結果表明膿毒癥患者發病后，機體細胞免疫水平呈現不同程度反應性增加。隨著病情發展變化不同，機體呈現不同程度的免疫反應。膿毒癥患者病情越重，機體表現免疫抑制增加。輔助性T細胞17與調節性T 細胞比例失衡，CD4+T淋巴細胞調節功能紊亂。Treg/Th17比值與反應膿毒癥患者病情程度評分APACHE-Ⅱ評分呈直線負相關。

［1］陳俊，壽松濤，崔書章.膿毒癥患者T細胞亞群變化及其臨床意義［J］.中國急救醫學，2009，29（2）：110-112.

［2］吳玉章.T細胞免疫識別研究進展［J］.中國醫藥生物技術，2010，5（2）：81-83.

［3］程靳，李霞，周智廣.T細胞免疫在肥胖狀態下脂肪組織炎癥發生中的作用［J］.中華糖尿病雜志，2013，5（9）：572-575.

［4］王華英，翁躍頌，應華娟，等.慢性阻塞性肺疾病患者Treg/Th17細胞失與肺功能相關性研究［J］.中華微生物學和免疫學雜志，2014，34（7）：527-529.

［5］郭劍穎，何忠杰.膿毒癥的免疫調理治療 ［J］.中國急救醫學，2012，32（6）：546-547.

［6］欒英譯，姚詠明.膿毒癥中免疫負調控途徑的研究進展［J］.中國病理生理雜志，2011，27（3）：107-109.

R631

B

1671-8194（2015）27-0184-02