乳腺癌ASAH1、CDC6蛋白表達及其臨床意義

齊 攀　靳 艷　曹興玥　張 冰　謝振斌

（1 新鄉(xiāng)市中心醫(yī)院，河南 新鄉(xiāng) 453002；2 新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院組胚教研室，河南 新鄉(xiāng) 453002）

乳腺癌ASAH1、CDC6蛋白表達及其臨床意義

齊 攀1靳 艷2曹興玥2張 冰1謝振斌1

（1 新鄉(xiāng)市中心醫(yī)院，河南 新鄉(xiāng) 453002；2 新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院組胚教研室，河南 新鄉(xiāng) 453002）

目的 探討乳腺癌組織中ASAH1、CDC6蛋白表達和意義。方法 免疫組化方法檢測73例乳腺癌石蠟標本中ASAH1及CDC6蛋白的表達，分析其與臨床病理特征的關(guān)系。結(jié)果 ①ASAH1陽性表達率：乳腺癌中72.6%，正常乳腺組織中44%，表達具有差異性（P＜0.05）；CDC6陽性表達率：乳腺癌中65.8%，正常乳腺組織中40%，表達具有差異性（P＜0.05）。②ASAH1蛋白表達與HER-2蛋白表達呈正相關(guān)，與ER表達呈負相關(guān)；CDC6蛋白表達與HER-2蛋白表達呈正相關(guān)。③ASAH1與CDC6蛋白表達具有正相關(guān)性。④ASAH1及CDC6蛋白表達增強預(yù)示5年生存率低。結(jié)論 ASAH1、CDC6蛋白表達與乳腺癌關(guān)系密切，聯(lián)合檢測其表達對進一步了解乳腺癌的生物學(xué)行為及判斷預(yù)后有一定價值。

乳腺癌；ASAH1；CDC6

乳腺癌嚴重威脅女性健康，且發(fā)病年齡有年輕化趨勢。早期預(yù)防，早期診斷，早期治療是防治乳腺癌的主要手段。本研究通過探討ASAH1及CDC6蛋白在乳腺癌組織中的表達，研究他們在乳腺癌診治中的價值及作為一種新型腫瘤標志物或治療靶點的可能性。

1　材料與方法

1.1實驗材料：收集乳腺癌標本73例，均為蠟塊，其中71例為浸潤性癌，2例為導(dǎo)管內(nèi)癌；25例對照組為正常乳腺組織。

1.2試驗步驟和結(jié)果判定方法及統(tǒng)計方法：應(yīng)用免疫組化方法檢測標本中ASAH1及CDC6蛋白的表達，染色過程中設(shè)陽性和陰性對照。CDC6以胞核和胞質(zhì)出現(xiàn)清晰的棕黃色顆粒為陽性，ASAH1以胞質(zhì)中出現(xiàn)澄清的棕黃色顆粒為陽性，采用半定量積分法判斷結(jié)果。統(tǒng)計軟件SPSS 13.0，應(yīng)用卡方檢驗比較組間差異。

2　結(jié) 果

2.1ASAH1及CDC6在乳腺正常組織及乳腺惡性腫瘤中的表達情況，見表1。

2.2ASAH1及CDC6表達與乳腺癌臨床病理指標的關(guān)系，見表2。

表2　ASAH1及CDC6表達與乳腺癌臨床病理指標的關(guān)系

表1顯示，73例乳腺癌ASAH1蛋白陽性率為72.6%，CDC6蛋白陽性率為65.8%，二者在乳腺組織及正常組織中表達差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。表2顯示，ER、HER-2不同狀態(tài)間，ASAH1表達差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），ER表達增強，ASAH1表達減弱，HER-2表達增強，ASAH1表達增強；HER-2不同狀態(tài)間，CDC6的表達差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），HER-2表達增強，CDC6表達增強。ASAH1及CDC6蛋白二者間表達成正相關(guān)關(guān)系（P＜0.05）。

3　討 論

3.1ASAH1與乳腺癌臨床病理指標的關(guān)系：ASAH1（N-酰基鞘氨醇酰胺水解酶1）是一個成熟的異二聚體酶。本次試驗發(fā)現(xiàn)，乳腺癌組織及正常乳腺組織中ASAH1表達具有顯著性差異（P＜0.05），提示ASAH1蛋白在乳腺癌表達上調(diào)，可能參與乳腺癌的發(fā)生。ASAH1是細胞內(nèi)水解神經(jīng)酰胺的關(guān)鍵酶，ASAH1表達增加，神經(jīng)酰胺分解增加，凋亡信號受到抑制，反過來促進增值。ASAH1在小鼠L929細胞中的過度表達就抑制了腫瘤壞死因子所誘導(dǎo)的細胞凋亡［1］，ASAH1抑制劑能誘導(dǎo)前列腺癌細胞的凋亡［2］。

我們可以觀察到分化中的細胞內(nèi)神經(jīng)酰胺含量升高，加入外源性神經(jīng)酰胺促使細胞分化［3］。目前，神經(jīng)酰胺促進細胞分化的機制尚不明確，ASAH1分解神經(jīng)酰胺的過程中受哪些因素影響也不清楚。ASAH1蛋白表達與HER-2表達成正相關(guān)，其表達增高提示預(yù)后不良，但也可能受到與腫瘤大小及組織學(xué)分級正相關(guān)的影響；實驗還顯示ASAH1蛋白表達與ER水平成負相關(guān)，ER蛋白表達提示乳腺癌細胞尚在雌激素作用范圍內(nèi)，雌激素拮抗劑可控制癌細胞增殖，提示癌細胞惡性程度低，而ASAH1表達增高可能為不良預(yù)后因素。

3.2CDC6與乳腺癌臨床病理指標的關(guān)系：CDC6（細胞周期分裂蛋白6）在真核細胞中是一種重要的DNA復(fù)制調(diào)節(jié)器。它完成細胞從G1期到分裂期DNA復(fù)制起始物的組裝［4］。研究發(fā)現(xiàn)CDC6表現(xiàn)出原癌基因的特征，參與腫瘤的形成機制CDC6的異常可造成染色體組的不完整。CDC6缺乏，DNA復(fù)制停止，細胞凋亡或進入DNA復(fù)制的假分裂狀態(tài)［5］。本次實驗證實CDC6與HER-2表達成正相關(guān)，預(yù)示不良預(yù)后，其可以成為監(jiān)測癌癥病情、評價療效的重要分子生物學(xué)指標。

3.3ASAH1與CDC6的關(guān)系：本實驗得出，ASAH1表達越高，CDC6蛋白表達越高，當然二者的作用機制可能各自獨立，也可能相互影響、相互協(xié)同，但因為影響腫瘤發(fā)生發(fā)展的因素常常是相互聯(lián)系、相互作用的，所以將兩個指標聯(lián)合應(yīng)用能克服單一指標的不足之處，能更好地闡明腫瘤的發(fā)生發(fā)展過程，判斷預(yù)后。

4　結(jié) 論

乳腺癌組織中，ASAH1、CDC6蛋白表達較正常組織中強，腫瘤組織HER-2蛋白表達強，則ASAH1蛋白表達增強，ER表達增強則ASAH1表達減弱；HER-2蛋白表達強，則CDC6蛋白表達增強；聯(lián)合檢測ASAH1及CDC6可用于更好的判斷預(yù)后及指導(dǎo)治療。

表1　ASAH1及CDC6在乳腺癌及正常乳腺組織中的表達

［1］Strelow A，Bernardo K，Adam-Klages S，et al.Overexpression of acid ceramidase protects fromtumor necrosis factor-induced cell death［J］.J Exp Med，2000，192（5）:601-612.

［2］Maeda I，Takano T，Matsuzuka F，et al.Rapid screening of specific changes in mRNA inthyroid carcinomas by sequence specificdifferential display: decrease dexpression of acid ceramidase mRNA in malignant and benign thyroid tumors［J］.Int J Cancer，1999，81（5）:700-704.

［3］Feng L，Barnhart JR，Seeger RC，et al.CDC6:fromDNA replication to cell cycle checkrpoints an oncogenesis［J］.Carcinogenesis，2008，29（2）:237-243.

［4］Mathias S，Younes A，Kan CC，et al.Activation of the sphingomyelin signaling pathway in intact EL4 cells and in a cell-free system by IL-1 beta［J］.Science，1993，259（5094）:519-522.

［5］Ruckhaberle E.Acid ceramidase 1 expression correlates with a better prognosis in ER-positive breast cancer［J］.Climacteric，2009，12（6）:502.

R737.9

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1671-8194（2015）20-0114-02