病毒滅活后血漿容量不足分析及亞甲藍輻照的探討

張 影

（白城市紅十字中心血站，吉林 白城 137000）

病毒滅活后血漿容量不足分析及亞甲藍輻照的探討

張 影

（白城市紅十字中心血站，吉林 白城 137000）

目的 分析血漿經過病毒滅活后容量不足的原因。方法 隨機抽取街頭無償獻血血液46袋，通過對血液去除白細胞、血漿病毒滅活的過程中容量的檢測，分析原因。結果 所采血液經過白細胞去除、血漿病毒滅活后的血漿容量很難達到200 mL，其中主要原因是去除白細胞時濾盤內所殘留血液量和過濾亞甲藍時濾盤內所殘留血漿的量。結論 白細胞過濾、血漿病毒滅活等新技術的應用對血液容量有一定損耗，應采用有效措施保證成分血液的容量。

血漿容量；血漿病毒滅活；亞甲藍

隨著獻血事業的發展，隨著成分輸血比例的增多，輸血安全的問題也越來越引起了各界的重視。我站自2009年開展去白細胞技術以來，臨床反應很好，輸血反應明顯減少。當年我站又開展了以光化學方法對血漿進行病毒滅活，由于此方法采用的是把亞甲藍加入血漿后照射，最后還要進行亞甲藍的濾除，血漿經過濾部件濾除、吸附亞甲藍，此過程中又有一部分血漿殘留在濾盤中，造成了成品血漿容量的不足。特進行統計分析。

1　病毒滅活后血漿容量不足分析

1.1材料：一次性使用去白細胞塑料血袋，保養液采用CPDA-1配方，內裝56 mL，含紅細胞保存液100 mL。一次性使用病毒滅活輸血過濾器，電腦采液控制器。

1.2方法：準確稱取一套未使用的血袋的重量，通過采血后分離過程中量的變化，求出血液損耗的量。

1.2.1首先要看血漿的外觀、標簽，肉眼觀察融化后的冰凍血漿，應呈黃色澄清液體，無色澤異常、蛋白析出、氣泡及重度乳糜情況。血袋完好。標簽的質量標準：標簽上印刷或書寫的內容應完整清晰、格式規范；標簽應完整無損。標簽上應有下列各項：①血液制劑名稱：新鮮冰凍血漿；②血型及血型條碼；③條碼或編號；④新鮮冰凍血漿容量；⑤新鮮冰凍血漿儲存條件：溫度-18 ℃以下；⑥新鮮冰凍血漿制備日期、時間及制備者；⑦有效期：1年；⑧采供血名稱及執業許可證號。

1.2.2容量質量標準：標示量±10%。

1.2.3檢測方法：將抽取的新鮮冰凍血漿，用感量為0.1 g的天平稱取重量，然后按下列公式計算出各袋全血的容量。

冰凍血漿比重為1.025 g/mL。

1.3步驟：取一套未使用過的去白血袋，稱量其原始重量（采取電腦采液控制器稱量，故本篇所有重量皆為mL數）：383 mL。①隨機抽取街頭無償獻血血液46袋，稱量其重量，平均容量為788 mL，則平均采血量為：788 mL-383 mL=405 mL；②準確稱取去白后血液容量，去皮后平均容量為370 mL，損失血液35 mL；③離心后分漿；④準確稱取分離后血漿46袋，去皮后平均容量為219 mL；⑤血漿2次離心，平均容量為206 mL，比一次離心平均損失血漿13 mL；⑥將46袋血漿在無菌間內按要求添加亞甲藍、輻照柜照射35 min后濾除亞甲藍，稱取成品血漿46袋，去皮后平均容量為176 mL。

1.4討論：國家規定CPDA-1配方保養液的采血最終量為（400 mL± 10%）+56 mL，我站所采血液均在所規定的范圍以內，而去除白細胞以后，損失全血量35 mL，血漿二次離心后損失血漿量13 mL，而血漿病毒滅活后損失血漿30 mL，所以，一袋血液采回來以后，通過去除白細胞、血漿病毒滅活、整袋血液共計損失78 mL。成品血漿的容量部分略低于國家規定容量（200±10%）mL的下限，為了滿足成品血漿的容量問題，我站試著加大了離心機的離心力，盡可能的多分離出一些血漿，情況有了很大的改觀。但是離心力的加大，也造成了一些血袋離心的時候出現血袋鼓泡、破損的情況。

根據以上情況，筆者認為：①改變采血袋內保養液的配方，由原來的CPDA-1改為ACD-B配方（此配方保養液容量為100 mL），由此加大分離前血液的總容量，來保證成品血漿的容量。②改進血袋去除白細胞濾盤以及去除亞甲藍濾盤，在保證達到濾除效果的情況下盡可能采用體積較小的濾盤。③在每個濾除環節盡可能保證減少濾盤內血液的殘留量。

2　血漿病毒滅活亞甲藍殘留量操作及臨床意義探討

安全輸血新技術亞甲藍光照血漿病毒滅活，經過培訓學習和到其他血站學習先進經驗，結合我站的實際情況，制定了亞甲藍光照血漿病毒滅活的操作規程，按照操作規程的方法，在濾除血漿白細胞的基礎上進行亞甲藍光照血漿病毒滅活。這項新技術填補了我市亞甲藍光照血漿病毒滅活的空白，使廣大患者可以用上更加安全可靠血漿，為臨床輸血再上“保險”，是保證臨床輸血的重大舉措。

光化學方法滅活病毒主要是依靠光敏劑在光照下產生的單線態氧或自由基氧化損傷病毒分子結構，從而殺滅病毒。

2.1亞甲藍殘留量的檢測方法：①質量標準≤0.30 μmol/L（病毒滅活冰凍血漿）。②檢測方法。測試樣準備：取3 mLWaters Oasis小柱，置于真空萃取裝置上，用6 mL甲醇活化，加入6 mL供試血漿，萃取亞甲藍；用30%甲醇6 mL清洗，隨后用含1%乙酸的甲醇溶液2 mL洗脫，洗脫液離心（3500 rmp/10 min），取上清液作為樣品溶液。③標準品的制備：取亞甲藍粉末約38 mg，精密稱定，置100 mL量瓶中，用水溶解并稀釋至刻度。精密量取50 μL置50 mL容量瓶中，用血漿稀釋至刻度，配成最終濃度為約1.0 μmol/L的亞甲藍對照血漿。檢測過濾前后樣品溶液時，必須用同樣的方法萃取檢測標準品。④測定：用含1%乙酸的甲醇溶液作試劑空白，在（645±2）nm波長處測定吸光度。按公式計算亞甲藍在血漿中的殘留量。

2.2亞甲藍光照血漿病毒滅活應注意的環節：①新鮮冰凍血漿在30～37 ℃水浴箱中融化，融化時注意不要將冰凍血漿碰到水浴箱壁，為減少融化時間，應不斷地輕柔地搖動血漿袋。不準急劇搖動血漿袋，防止血漿袋中出現大量泡沫。②亞甲藍加入要嚴格按照無菌技術操作規程，防止污染。③病毒滅活柜內溫度保持2～6 ℃，每層光照達到血漿病毒滅活的效果。④滅活后的血漿馬上濾除亞甲藍。⑤核對獻血條碼號。

3　病毒滅活的臨床意義

輸血可以傳播疾病，特別是各種病毒性肝炎、艾滋病等病毒，廣泛存在血漿里，通過應用血液制品而傳播的疾病更是令人擔憂，特別是目前艾滋病的迅速蔓延和全球性的傳播，很多國家把預防和控制HIV感染作為國家生死存亡的一項重大國策。因此，如何防止因輸血而被傳染上疾病，是當前輸血醫學和臨床醫學乃至社會各界共同關注的問題。因此，要從根本上控制和杜絕血源性的傳染病，除了加強對一系列血液傳播疾病的篩選外，還必須對血液進行滅活病毒處理，才能做到輸血安全。對血液成分進行病毒滅活是實現安全輸血的最直接有效的途徑，這樣大大減少病毒感染的概率，為我國的輸血及臨床實驗做出了重大共享。為防止輸血而傳播疾病，臨床應用病毒滅活血漿對防止經血液傳播疾病意義是深淵而重大的。

綜上所述，血液成分病毒滅活技術正在發展過程中，病毒滅活效果、對血漿蛋白的影響、殘留試劑對人體的影響、處理的血液成分有限等問題依然存在。仍然需要研究人員及每一位輸血工作者的探索和努力。

R457.1+4

A

1671-8194（2015）20-0292-02