血細(xì)胞分析儀的進(jìn)展及臨床應(yīng)用

王威威

【摘要】近年來血細(xì)胞分析儀在技術(shù)和方法學(xué)上有許多顯著的改進(jìn)。本文就其的進(jìn)展及臨床應(yīng)用進(jìn)行探討。

【關(guān)鍵詞】血細(xì)胞分析；進(jìn)展；臨床應(yīng)用

【中圖分類號(hào)】R4 【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】B 【文章編號(hào)】1671-8801（2015）02-0085-01

早在20世紀(jì)50年代美國(guó)庫(kù)爾持先生首先發(fā)明了電阻式血細(xì)胞分析儀，開創(chuàng)了血細(xì)胞分析的新紀(jì)元。進(jìn)入80年代庫(kù)爾特公司又利用電阻（測(cè)體積）、激光（測(cè)核形態(tài)）、高能電磁波等幾項(xiàng)技術(shù)共同檢測(cè)、綜合分析，使血細(xì)胞分析的結(jié)果更加準(zhǔn)確。與此同時(shí)，也有人利用粒細(xì)胞所具有的大量過氧化物酶，而單核細(xì)肥此酶較少，淋巴細(xì)胞則無(wú)此酶存在的特點(diǎn)，把化學(xué)染色與激光分析相結(jié)合進(jìn)行細(xì)胞分類，從此細(xì)胞從單一技術(shù)進(jìn)入高科技發(fā)展的新階段。90年代初又有人從細(xì)胞膜的結(jié)構(gòu)差異進(jìn)行分類，比如幼稚細(xì)胞膜上的脂類多，結(jié)合的硫化氨基酸多，對(duì)膜的保護(hù)性強(qiáng)，溶血?jiǎng)┎灰灼茐?，成熟?xì)胞則反之。

目前，發(fā)達(dá)國(guó)家的半自動(dòng)血細(xì)胞分析儀已經(jīng)淘汰，取而代之的是不同功能的全自動(dòng)，甚至幾種儀器聯(lián)合使用，電腦控制。Sysmex將血細(xì)胞分析儀，網(wǎng)織紅細(xì)胞計(jì)數(shù)，推片機(jī)全部聯(lián)在一起，通過儀器識(shí)別，然后根據(jù)紅細(xì)胞的多少?zèng)Q定是否計(jì)數(shù)網(wǎng)織紅細(xì)胞，又根據(jù)HCT的高低決定推片的角度，根據(jù)立方圖的形態(tài)決定是否需要鏡檢，同時(shí)還設(shè)置了自動(dòng)加樣和真空采血裝置，從而大大提高了結(jié)果的準(zhǔn)確性和工作效率。

一、細(xì)胞分析儀原理簡(jiǎn)介

血細(xì)胞分析儀的主要分析原理：根據(jù)血細(xì)胞非傳導(dǎo)的性質(zhì).在浸入電解質(zhì)的微孔管內(nèi)外各有一個(gè)電極，當(dāng)電流接通后，兩電極形成電流、動(dòng)力泵產(chǎn)生負(fù)壓、開始充量吸樣，由于細(xì)胞為不良導(dǎo)體，在經(jīng)過微孔的一瞬間，電阻增大，產(chǎn)生相應(yīng)的脈沖傳導(dǎo)（電壓），稱為通過脈沖，此時(shí)電壓增加和變化的程度取決于非傳導(dǎo)性細(xì)胞占據(jù)小孔感應(yīng)區(qū)的體積，即細(xì)胞體積越大，引起的脈沖越大，所產(chǎn)生的脈沖振幅越高，再經(jīng)過放大，閾值調(diào)節(jié)，甄別，整形，計(jì)數(shù)，得出結(jié)果。

（一）血細(xì)胞分析

由于細(xì)胞為不良導(dǎo)體，以電解質(zhì)溶液中懸浮顆粒在通過小孔時(shí)引起的電阻變化為基礎(chǔ)，進(jìn)行血細(xì)胞計(jì)數(shù)和體積測(cè)定，這種方法稱電阻法，也被稱為庫(kù)爾特原理。把經(jīng)過電解質(zhì)溶液稀釋的細(xì)胞懸液倒入一個(gè)不導(dǎo)電的容器中（塑料杯），把小孔管插入細(xì)胞懸液中，小孔管的內(nèi)側(cè)充滿了稀釋液，并有一個(gè)內(nèi)電極，外側(cè)細(xì)胞懸液中有一個(gè)外電極，當(dāng)電流接通后小孔內(nèi)外側(cè)的電極形成穩(wěn)定的電流，稀釋液通過小孔向內(nèi)部流動(dòng)，當(dāng)細(xì)胞通過小孔時(shí)，瞬時(shí)引起了電壓變化而出現(xiàn)一個(gè)脈沖傳導(dǎo)，稱為通過脈沖、再經(jīng)過以下步驟得出結(jié)果：

1.放大 細(xì)胞通過小孔時(shí)所產(chǎn)生的脈沖傳導(dǎo)微弱，難以直接觸發(fā)計(jì)數(shù)電路。必須經(jīng)電子放大器把微伏信號(hào)放大成伏級(jí)信號(hào)。

2閾值調(diào)節(jié) 在一定范團(tuán)內(nèi)調(diào)節(jié)參考電平大小，使計(jì)數(shù)結(jié)果更加符合實(shí)際。

3甄別 各種微粒通過微孔時(shí)均可產(chǎn)生訊號(hào)、訊號(hào)電平（脈沖幅度）與微粒子大小成正比，所為甄別就是根據(jù)閾值調(diào)節(jié)器提供的參考電平，把低于參考電平的假訊號(hào)去掉，以提高準(zhǔn)確性。

4整形 經(jīng)放大和甄別的波形不—致，須經(jīng)過整形器調(diào)整為形狀—致標(biāo)淮的平頂波后才能觸發(fā)電路，送入計(jì)數(shù)系統(tǒng)，得出計(jì)數(shù)結(jié)果。

5.計(jì)數(shù)得出結(jié)果。

（二）紅細(xì)胞檢測(cè)原理

絕大多數(shù)血細(xì)胞分析儀都使用電阻法進(jìn)行紅細(xì)胞計(jì)數(shù)和紅細(xì)胞比積測(cè)定，原理同白細(xì)胞，其中計(jì)數(shù)結(jié)果包括白細(xì)胞。由于紅、白細(xì)胞比例為750：1，故白細(xì)胞因素可忽略不計(jì)，當(dāng)有白血病或貧血伴有核紅細(xì)胞增加時(shí)，應(yīng)減去白細(xì)胞或有核紅細(xì)胞。

（三）Hb含量檢測(cè)

經(jīng)稀解的血液加入溶血?jiǎng)┖螅辜?xì)胞溶解釋放出血紅蛋白，與溶血?jiǎng)┑挠嘘P(guān)成分結(jié)合形成血紅色的衍生物，再進(jìn)入Hb檢測(cè)系統(tǒng)，在530—550nm波長(zhǎng)下比色.吸光度的變化與Hb含量成正比。

二、血細(xì)胞直方圖與疾病診斷

先進(jìn)的血細(xì)胞分析儀不僅能檢測(cè)更多的實(shí)驗(yàn)參數(shù)，而且還能提供相應(yīng)的直方圖，立方圖的變化對(duì)分析實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性、加強(qiáng)質(zhì)量控制及臨床診斷有重要意義。此外，各類參數(shù)在疾病的診斷中也有重要意義，如：RDW：是反映紅細(xì)胞體積異質(zhì)性改變的參數(shù)，能客觀地反映紅細(xì)胞大小不等的程度。用途：①缺鐵性貧血的診斷和療效觀察；缺鐵性貧血和地中海貧血的鑒別診斷；有助于貧血的病因?qū)W分類。MPV：鑒別血小板減少的病因和評(píng)價(jià)骨髓增生情況。PCT：反映血小板的總數(shù)量是PLT MPV的綜合評(píng)價(jià)指標(biāo)。

（一）白細(xì)胞直方圖變化的臨床意義

在進(jìn)行白細(xì)胞計(jì)數(shù)時(shí)，細(xì)胞根據(jù)體積大小分配在不同計(jì)算機(jī)通道中，從而得到白細(xì)胞體積分布直方圖。反之從圖形的變化可以看出被測(cè)血液中細(xì)胞解體的變化。這種變化細(xì)胞圖形并無(wú)特異性。比如中間細(xì)胞群可包括大淋巴細(xì)胞、原始細(xì)胞、幼稚細(xì)胞、嗜酸性粒細(xì)胞、嗜堿性粒細(xì)胞，其中任何一類細(xì)胞的增多，均可使直方圖產(chǎn)生相似變化，只是提示檢查者粗略地判斷細(xì)胞比例變化或有無(wú)明顯的異常細(xì)胞出現(xiàn)，進(jìn)而在顯微鏡下檢查中注意這些變化或在正常人體檢中，篩選是否需要進(jìn)一步作血涂片檢查?？梢钥闯觯M管引起血液學(xué)變化的病因不同、細(xì)胞動(dòng)態(tài)變化不同，但直方圖形很相似，說明白細(xì)胞直方圖形變化并天特異性。

（二）紅細(xì)胞體積直方圖的臨床意義

與本溪吧直方圖意義不同，某些貧血紅細(xì)胞體積直方圖有其特點(diǎn)，此種圖形變換再結(jié)合其他參數(shù)進(jìn)行分析，對(duì)鑒定診斷頗有價(jià)值。分析時(shí)，要注意觀察圖形的位置、峰底的寬度、峰頂?shù)男螒B(tài)及有無(wú)雙峰出現(xiàn)。

不同型號(hào)儀器其特點(diǎn)及使用稀釋液不同，紅細(xì)胞直方圖的形態(tài)亦異常，但反映病理變

化基本特征是相同的，不同實(shí)驗(yàn)室應(yīng)根據(jù)本室儀器的圖形進(jìn)行對(duì)比分析。

（三）血小板立方圖的變化

血小板測(cè)量結(jié)果是根據(jù)血小板直方圖得出的，微機(jī)根據(jù)直方圖形態(tài)，繪出擬合曲線，決定大血小板數(shù)目的補(bǔ)償并計(jì)算MPV、PCT、PSW各項(xiàng)參數(shù)。當(dāng)被測(cè)標(biāo)本中小細(xì)胞增多或出現(xiàn)細(xì)胞碎片或血小板凝聚時(shí)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果，血小板體積直方圖均能反映這些變化。因此在發(fā)出血小板報(bào)告之前，首先要觀察其圖形是否正常，如為異常的圖形，均為檢查血液中有血小板凝聚，必要時(shí)作血涂片檢查是否有小紅細(xì)胞或大血小板增多現(xiàn)象。

參考文獻(xiàn)：

[1]傅麗云，馮有才.血細(xì)胞分析儀的臨床應(yīng)用[J].山西職工醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)，2008（04）.

[2]朱蕓.不同血液分析儀試劑使用的比較[J]；河北醫(yī)藥.2000（11）.

[3]安邦權(quán)，凌曉午，張燕，周湘紅，葉艾竹，張建，費(fèi)蓉.ADVIA 120型血液分析儀異常報(bào)警參數(shù)及其可靠性分析[J].檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)；2006（05）.