肉蓯蓉多糖脫蛋白工藝的優化

肖道安

摘要：優選肉蓯蓉多糖的脫蛋白工藝，為肉蓯蓉多糖純化提供試驗依據。以脫蛋白率為指標，比較 Sevag法、酶法及酶-Sevag聯合法對肉蓯蓉粗多糖的脫蛋白效果，采用正交試驗優選最佳工藝。結果表明，Sevag法優于酶法和酶-Sevag聯合法，Sevag法脫蛋白的最佳工藝為：三氯甲烷與正丁醇的體積配合比4 ∶1，料液體積比1 ∶3，攪拌40 min，脫蛋白4次。在該工藝下平均脫蛋白率為87.11%，RSD為1.34%；平均多糖保留率為83.05%，RSD為154%。試驗證明該工藝穩定可靠，適用于肉蓯蓉多糖的純化。

關鍵詞：肉蓯蓉多糖；脫蛋白；Sevag法；酶法；酶-Sevag聯合法；正交試驗

中圖分類號：R284.2 文獻標志碼： A 文章編號：1002-1302（2015）07-0314-02

A：V三氯甲烷 ∶V正丁醇B：料液體積比C：攪拌時間（min）D：脫蛋白次數

13 ∶11 ∶3202

24 ∶11 ∶4303

35 ∶11 ∶5404

2 結果與分析

2.1 3種脫蛋白方法試驗結果

從表2可知，Sevag法和酶-Sevag聯合法脫蛋白的效率相對較高，而酶法多糖的保留率相對較高。這可能是因為肉蓯蓉多糖中的蛋白質以游離型居多，結合型較少，Sevag法能更加有效地除去游離型蛋白質，而酶法主要酶解結合型蛋白質。2個因素綜合考慮，Sevag法更適合于肉蓯蓉多糖的脫蛋白工藝。

2.2 Sevag法正交試驗結果

由表3的極差分析可知，Sevag法各因素對肉蓯蓉多糖脫蛋白的影響順序依次為A>C>D>B，即三氯甲烷與正丁醇的體積比影響最大，其次為攪拌時間、脫蛋白次數、料液比。Sevag法脫蛋白的最佳工藝為A2B1C3D3，即三氯甲烷與正丁醇的體積比為4 ∶1，料液體積比為1 ∶3，攪拌時間40 min，脫蛋白次數4次。這主要是因為隨著攪拌時間的增加，Sevag試劑與蛋白質結合增多，脫蛋白率提高；脫蛋白次數的增加固然能提高脫蛋白率，但是多糖損失得也會更多，可能會造成綜合效果不佳。對上述最佳工藝進行驗證，重復操作3次，得出該工藝下平均脫蛋白率為87.11%，RSD為1.34%；平均多糖保留率為83.05%，RSD為1.54%。結果表明該工藝脫蛋白率高，綜合效果良好。

3 結論

Sevag法適用于肉蓯蓉多糖脫蛋白工藝，通過正交試驗優選出肉蓯蓉脫蛋白的最佳工藝為：三氯甲烷與正丁醇的體積配合比4 ∶1，料液體積比1 ∶3，攪拌40 min，脫蛋白4次。在該工藝水平下平均脫蛋白率為87.11%，RSD為1.34%；平均多糖保留率為83.05%，RSD為1.54%。試驗證明該工藝穩定可靠，適用于肉蓯蓉多糖的純化。

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