Trizol法提取普通小球藻總基因組DNA

段文斌　金剛　代建國　張麗君　欒崇林　于化泓

摘要：Trizol法主要應用于動植物RNA提取，由于其在提取RNA的過程中將DNA有效分離到有機相中，并且在有機相中DNA未被降解，因此本研究采用Trizol法提取具有細胞壁的普通小球藻的基因組DNA，發現提取得到的DNA純度和產率高，且DNA完整性好。經檢測：D260 nm/D280 nm=1.86，平均得率為977 μg/g鮮質量；瓊脂糖電泳檢測其條帶清晰，未發生降解。該方法具有簡單快速獲得高純度和高產率的小球藻基因組DNA的優點。

關鍵詞：Trizol法；普通小球藻；DNA提取

中圖分類號：S917 文獻標志碼： A 文章編號：1002-1302（2015）07-0033-02

Trizol法最早由Chomczynski等提出，用于提取細胞或組織中的總RNA[1]。經過Trizol處理過的樣品，其總RNA、DNA及蛋白質分別分布在上層水相、中間層、下層有機相。Trizol試劑中含有的苯酚、異硫氰酸胍等物質，將細胞迅速破碎，并抑制釋放出來的核酸酶，同時能夠保持RNA、DNA的完整性，因此對RAN、DNA的同時提取純化十分有用[2]，大大節約試驗時間，提高試驗效率。小球藻（Chlorella vulgaris）作為一種單細胞綠藻，具有極強的光合自養能力；含有豐富的脂質、蛋白質、維生素、核酸、食物纖維、葉綠素等，都是人體健康不可或缺的營養物。小球藻還生產多種生物活性物質[3]。由于其脂類可以達到細胞干質量的10%～30%而被用于生產生物柴油[4-5]；通過轉基因小球藻可以被用來生產病毒抗體[6]；也發現小球藻具有抗菌活性[7]；小球藻可以治理重金屬、有機物以及氮磷污染[8]。因此，科研工作者開始對小球藻進行深入研究。本研究嘗試使用Trizol法[9]提取小球藻基因組DNA，以期獲得簡單快速獲取高純度高產率基因組DNA的方法。……