區分高低致病性豬繁殖與呼吸綜合征病毒RT—PCR方法的建立

孫春亮　趙敬慧　劉月　蔡錦順

摘要：為了在臨床上快速、有效區分高低致病性PRRSV，參考GenBank發表的代表性毒株，根據高致病性毒株Nsp2基因上有30個氨基酸不連續缺失的特點，設計并合成1對引物，擴增高低致病性PRRSV Nsp2基因的目的條帶長度分別為644、734 bp，從而將二者區分開來。用本方法對長春及其周邊地區送檢60份病料進行盲檢，檢出10份高致病性PRRSV。并與N蛋白基因引物RT-PCR診斷方法進行比較，結果均一致，表明該方法準確性高。本研究所建立的RT-PCR方法為PRRSV在臨床上的快速診斷和實驗室流行病學調查提供了簡捷的技術手段。

關鍵詞：PRRSV；Nsp2基因；RT-PCR診斷；流行病學調查

中圖分類號： S858.28 文獻標志碼： A 文章編號：1002-1302（2015）07-0226-02

2006年以來，中國南方部分地區豬場暴發高熱為特征的傳染性疾病，并逐漸蔓延擴散到北方各地區，給養豬業帶來了巨大的經濟損失。這種傳染性疾病后來被命名為豬繁殖與呼吸綜合征（PRRS），該病具有傳播速度快、發病率高、病死率高的特征，并且繼發感染鏈球菌等，與偽狂犬等病毒混合感染增加了臨床診斷的難度。因此，建立一種能夠快速，有效、準確的檢測方法在 PRRS 的防控上具有重要意義。經病原分離及分子流行病學分析，國內流行的高致病性毒株主要是由1種帶有Nsp2基因部分缺失以及多個位點發生突變對豬呈高致病性的豬繁殖與呼吸綜合征病毒（PRRSV）。

PRRSV基因組毒株間具有較高的遺傳變異性，M蛋白在各毒株間比較保守，同型毒株間M蛋白序列同源性大于96%，歐洲、美洲型毒株間序列同源性在78%～81%之間[1]；……