添加烏骨雞肌肉對小白鼠早期生長發育的影響

李思　張福平　林家棟　潘蘭兵　易恒潔　李維

摘要：選擇健康、生長發育良好的赤水烏骨雞母雞、飼養條件相同的普通母雞各4羽，采胸肌烘干后制粉備用。選擇200只雌性健康斷奶小白鼠，隨機分成5組，A組為對照組，只飼喂小白鼠專用飼料，B、C組每日分別按體質量灌服普通雞肌肉粉1.2、2.4 g/kg；D、E組每日分別按體質量灌服赤水烏骨雞肉粉1.2、2.4 g/kg。試驗期為4周，每周測定各組增質量。在第4周末期測定小白鼠胸腺指數、脾臟指數，進行負重游泳和缺氧試驗，測定各組小白鼠血液中溶菌酶、過氧化氫酶、谷胱甘肽過氧化物酶3類血清酶的含量。結果發現，添加烏骨雞肌肉對小白鼠增質量、負重游泳時間、脾臟指數、胸腺指數的影響顯著比添加普通雞肌肉好，各組酶指標E>D>C>B>A。耐缺氧時間長短分別為E>D>C>B>A。以上結果說明，赤水烏骨雞肉具有良好的保健效果，對增強小白鼠的體質和免疫力均有促進作用。

關鍵詞：烏骨雞肌肉；小白鼠；早期發育

中圖分類號： S873 文獻標志碼： A 文章編號：1002-1302（2015）07-0220-03

烏骨雞原產于我國，是營養豐富的滋補食品，又具有特殊的藥用價值，聞名古今中外。現在，由烏骨雞加工的藥品多種多樣，其系列產品有：烏雞白鳳丸、烏雞白鳳片、烏骨白鳳補精、烏雞婦康糖漿、烏雞補酒、烏雞桂風酒、烏雞桂園補酒、烏雞酒、烏雞調經丸、烏雞鴨精等[1]。國內外已有多篇文獻描述出烏骨雞的營養保健功能，主要有補血、抗衰老[3]、抗氧化和清除自由基、抗誘變、抗紫外線和金屬離子的富集等作用[2-8]。烏骨雞作為生活中常見、經濟的保健食品，生產高品質烏骨雞具有廣大的市場前景和巨大的經濟效益。本試驗通過研究烏骨雞肉對小鼠早期發育的影響探討赤水烏骨雞的營養保健價值，旨在為提高烏骨雞的保健和藥用價值提供理論依據。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

同源赤水烏骨雞、普通肉雞各4羽，取自貴州大學動物科學學院養雞場。14～18 g初生雌性小白鼠200只，購自貴陽醫學院動物室。

1.2 主要儀器設備

小鼠飼養籠、小鼠灌胃針、烘箱、離心粉碎機、溶菌酶（lysozgme）檢測試劑盒、過氧化氫酶（Catalase，CAT）測定試劑盒、谷胱甘肽過氧化物酶（glutathione peroxidase，GSH-PX）測試盒（購自南京建成試劑公司）、分光光度計、臺式離心機、水浴鍋、電子天平、秒表等常用試驗器具。

1.3 試驗步驟

1.3.1 雞肉樣品制備

普通雞與烏骨雞用窒息法處死，去毛、洗凈，剝離雞肉、骨頭、內臟，雞肉砍碎后放在干燥箱內，在100 ℃條件下烘約4 h，然后在80 ℃條件下烘干后粉碎，裝袋標記備用。

1.3.2 小鼠分組飼養

初生小白鼠自購買后預飼3 d，第4 d開始試驗前期操作，即分組分梯度飼喂小白鼠，稱質量按體質量一致原則隨機分為5個組。每個組20只小鼠，分別為：A組（對照組）：喂食正常飼料；B組（普通雞肉Ⅰ組）：每日喂食烘干普通雞肉1.2 g/kg，相當于60 kg的人每天食用普通雞肉濕重約240 g；C（普通雞肉Ⅱ組）：每日喂食烘干普通雞肉 2.4 g/kg；D組（烏骨雞肉Ⅰ組）：每日喂食烘干赤水烏骨雞肉1.2 g/kg；E組（烏骨雞肉Ⅱ組）：每日喂食烘干赤水雞肉 2.4 g/kg。飼料為配合專用顆粒小鼠料（購自貴陽康牧獸藥飼料），其飼料成分見表1。小鼠灌胃第1天開始，每天早上取空腹小鼠使用電子天平稱質量，以精確計算所需灌胃雞肉粉質量。

1.4 測定項目與方法

1.4.1 體質量指標測定

體質量指標采第1天、第7天、第14天、第21天、第28天的數據，按組別總體質量除以小鼠數量的平均體質量為參考。

1.4.2 負重游泳試驗

末次喂養后1 d進行游泳試驗。每組小鼠各取體質量相近的7只小鼠，在其尾根部綁上負荷占其體質量5%的鉛皮，置游泳箱（50 cm×50 cm×40 cm）中游泳，水溫（25±1.0）℃，記錄小鼠自游泳開始至沉下水8 s不浮起，即小鼠游泳時間（min）。

1.4.3 脾臟指數、胸腺指數的測定

連續灌胃4周后，小鼠稱質量后頸椎脫臼處死，取脾臟和胸腺，去盡筋膜，稱質量。根據免疫器官指數的計算公式：免疫器官指數=免疫器官質量（g）/體質量（kg），得出免疫器官指數。

1.4.4 耐缺氧試驗測定方法

取小鼠7只，放入廣口瓶中，蓋上瓶蓋，與一氧化碳發生裝置連接，秒表計時開始，直至小白鼠死亡，作為小白鼠耐低張性缺氧時間。

1.4.5 血清中溶菌酶總酶活性的測定

采用試劑盒進行測定。小鼠眼眶采血，輪胎式離心機離心30 min，取上層血漿進行測定。

1.4.6 血液中過氧化氫酶（CAT）的測定 采用試劑盒進行測定。小鼠眼眶采血，取50 μL全血加蒸餾水至5 mL充分混勻放置10 min，用分光光度計在405 nm處測定絡合物生成量，計算CAT活力。

1.4.7 小鼠全血中谷胱甘肽過氧化物酶的測定

采用試劑盒進行測定。小鼠眼眶采血，取肝抗凝素全血用雙蒸水分別配成1 ∶49和1 ∶99的血溶液測定酶促反應中還原型谷胱甘肽的消耗，求出酶活力。但是這2個底物在沒有酶的條件下，也能進行氧化還原反應（稱非酶促反應），所以最后計算時必須減去非酶促反應的部分[9]。

1.4.8 數據統計與分析

對測定的數據輸入Excel電子表格，計算各組數據的平均數和標準差，對得到的數據進行分析，評判各組數據優劣，得出結論。

2 結果與分析

2.1 體質量指標測定

各組增質量差異極顯著。添加普通雞肉和添加烏骨雞肉的小鼠增質量與對照組相比均顯著增加，D組與B組、E組與C組增質量相比差異極顯著；C組與B組、E組與D組增質量相比差異不顯著（表2）。說明添加烏骨雞肉能顯著提高小鼠增質量，增加雞肉劑量對小鼠增質量有一定效果，但差異不顯著。

2.2 負重游泳試驗

添加普通雞肉和添加烏骨雞肉的小鼠游泳時間與對照組相比均顯著增加，各試驗組與對照組相比體質量均有增加（表3），小鼠體質量變化也可能是影響小鼠負重游泳時間的因素之一。

添加同一種雞肉的試驗組小鼠體質量變化不顯著。而D組與B組相比游泳時間顯著增加，E組與C組相比顯著增加。這表明添加烏骨雞肉比添加普通雞肉更能夠增強小鼠體力，有抗疲勞作用。

2.3 脾臟指數、胸腺指數的測定

添加普通雞肉和烏骨雞肉的小鼠與對照組相比脾臟指數均極顯著增加。D組與B組相比脾臟指數顯著增加，E組與C組相比顯著增加 （表4），說明添加烏骨雞肉能顯著提高小鼠脾臟指數。此外，添加烏骨雞肉組與添加普通雞肉組及對照組相比，胸腺指數顯著增加，添加普通雞肉組與對照組相比胸腺指數有所增加，但差異不顯著（表4），說明添加烏骨雞肉能顯著提高小鼠胸腺指數。

2.4 小鼠耐缺氧試驗結果分析

試驗組小白鼠曲張性耐缺氧時長高于對照組，添加烏骨雞肉組相比普通雞肉組差異顯著，且E組比D組也有顯著差異（表5）。

2.5 溶菌酶的測定結果分析

添加普通雞肉能顯著提高小鼠血清中的溶菌酶含量，添加烏骨雞肉的小鼠血清中溶菌酶含量明顯高于添加普通雞肉的小鼠（表6）。

2.6 過氧化氫酶活力的測定結果分析

添加普通雞肉能顯著提高小鼠血液中的CAT活力，而添

加烏骨雞肉的小鼠血液中的CAT活力極顯著高于對照（P<001）（表7），說明添加烏骨雞肉對增加小鼠血液中的CAT活力好于添加普通雞肉。

2.7 小鼠全血中谷胱甘肽過氧化物酶活力的測定結果分析

添加雞肉能明顯提高小鼠血液中谷胱甘肽過氧化物酶活力，尤其是E組谷胱甘肽過氧化物酶活力極顯著高于對照（表8）。與添加普通雞肉相比，同等添加量情況下添加烏骨雞肉增加谷胱甘肽過氧化物酶活力的幅度更大。

3 討論

小鼠生長迅速，且與人的生長發育過程相似，所以小鼠各項生理指標的結果對人有一定的參考價值。由于試驗組較對照組增加了蛋白質的供應量，所以添加雞肉組與對照組相比的結果可比性較差，而比較烏骨雞組與普通雞組間的差異更具有參考意義。

在增質量試驗中，C組與B組相比增質量不顯著，E組與D組相比增質量不顯著，說明增加雞肉劑量對小鼠增質量差異不顯著，但也可能是添加雞肉的劑量超過了小鼠的消化吸收能力。D組與B組相比增質量極顯著增加，E組與C組相比也極顯著增加，說明添加烏骨雞肉能顯著提高小鼠增質量，進一步證實了烏骨雞促進動物生長的生物學作用。

在負重游泳試驗中，添加烏骨雞肉和添加普通雞肉的小鼠與對照組相比小鼠游泳時間均極顯著增加，但也可能受小鼠體質量變化的影響，由于各試驗組小鼠體質量變化不顯著，因此可以通過比較烏骨雞組與普通雞組間的差異，分析對小鼠負重游泳時間的影響。D組與B組相比負重游泳時間顯著增加，E組與C組相比也顯著增加。說明添加烏骨雞肉能顯著提高小鼠負重游泳時間，這表明添加烏骨雞肉能夠增強小鼠體力，有抗疲勞作用。

在脾臟指數、胸腺指數的測定試驗中，D組與B組相比脾臟指數極顯著增加，E組與C組相比脾臟指數也極顯著增加；對于胸腺指數，烏骨雞肉組和普通雞肉組相比，胸腺指數顯著增加。本試驗結果表明，添加烏骨雞肉能顯著提高小鼠脾臟指數和胸腺指數，說明烏骨雞肉能增強機體免疫力。

在缺氧試驗中，B組耐缺氧時長較A組無顯著差異，C組、D組較A組有顯著提高（P<0.05），E組較對照組有極顯著高（P<0.01），說明添加烏骨雞肉有提高小鼠體質的功能，且與添加量呈正相關。

小鼠血清溶菌酶含量測定中，B組小白鼠血清溶菌酶含量較A組無顯著差異，C組較對照組小白鼠有顯著提高，D組較A組小白鼠也顯著提高（P<0.05），E組較A組含量提高極顯著。過氧化氫酶活力測定中，B組、C組較A組顯著提高，D組、E組較A組極顯著提高。谷胱甘肽過氧化物酶活力測定中，B組、C組、D組較A組小白鼠顯著提高，E組較A組極顯著提高。以上3種酶是動物機體抗衰老、抗病能力、抗病毒能力等的指標之一。小白鼠飼喂烏骨雞肉1個月以后血液中3種酶的含量、活力均高出未食用雞肉和食用普通雞肉的小鼠，證明赤水烏骨雞肉具有能增強抗病能力、增強體質、延緩細胞衰老等保健功能。

通過上述研究，我們初步證實了赤水黑羽烏骨雞肉能增強小白鼠的體質和免疫力，其保健價值遠遠超過普通雞肉。本研究為進一步探究烏骨雞的保健價值、藥用方法及開發利用提供了理論依據。

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