結(jié)核感染T細(xì)胞斑點(diǎn)試驗(yàn)對結(jié)核性胸膜炎的診斷價(jià)值

汪敏 張琦 張清林

結(jié)核感染T細(xì)胞斑點(diǎn)試驗(yàn)對結(jié)核性胸膜炎的診斷價(jià)值

汪敏 張琦 張清林

目的 評價(jià)結(jié)核感染T細(xì)胞斑點(diǎn)試驗(yàn)（T-SPOT.TB）對診斷結(jié)核性胸膜炎的價(jià)值。方法 前瞻性納入疑診結(jié)核性胸膜炎患者100例，進(jìn)行外周血T-SPOT.TB、血清結(jié)核抗體、胸腔積液腺苷脫氨酶（ADA）檢測，并比較外周血T-SPOT.TB、胸腔積液ADA、血清結(jié)核抗體檢測診斷結(jié)核性胸膜炎的靈敏度。外周血T-SPOT.TB、胸腔積液ADA、血清結(jié)核抗體檢測診斷結(jié)核性胸膜炎的靈敏度分別為92.6%、95.5%、36.4%；特異度分別為92.3%、75%、76.8%；陽性預(yù)測值分別為96.2%、91.7%、57.1%，陰性預(yù)測值分別為85.7%、85.7%、35.5%。T-SPOT.TB特異度與后兩種方法比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P＜0.05）。靈敏度及陽性預(yù)測值、陰性預(yù)測值與胸水ADA比較，差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；與血清結(jié)核抗體比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P＜0.05）。結(jié)論 T-SPOT.TB對診斷結(jié)核性胸膜炎有較高的靈敏度及特異度，對臨床應(yīng)用有重要的參考價(jià)值。

結(jié)核感染T細(xì)胞斑點(diǎn)試驗(yàn)；結(jié)核性胸膜炎；結(jié)核抗體；胸水腺苷脫氨酶

結(jié)核性胸膜炎是淋巴細(xì)胞介導(dǎo)為主的多種細(xì)胞，多種細(xì)胞因子參與的綜合病理性免疫反應(yīng)。它是結(jié)核桿菌及其自溶產(chǎn)物、代謝產(chǎn)物進(jìn)入超敏機(jī)體的胸膜腔而引起的胸膜炎癥，由于它是對結(jié)核桿菌成分在胸膜產(chǎn)生超敏反應(yīng)的發(fā)生機(jī)理，故胸液中不易查到結(jié)核桿菌[1]，早期確診有一定的難度。近年來結(jié)核感染T細(xì)胞斑點(diǎn)試驗(yàn)（T-SPOT.TB）在診斷結(jié)核病中的作用越來越受到人們的重視，有研究報(bào)道T-SPOT.TB對診斷結(jié)核具有較高的敏感性及特異性，優(yōu)于常規(guī)的檢查方法[2]。而T-SPOT.TB對結(jié)核性胸膜炎的診斷價(jià)值少有報(bào)道，本研究擬對其進(jìn)行初步的探索。

1 資料與方法

1.1 一般資料 前瞻性納入2012年3月～2013年5月江蘇省徐州市中心醫(yī)院呼吸科住院疑診結(jié)核性胸膜炎患者100例，其中男64例，女36例；年齡16～76歲，中位年齡52歲。將患者分為2組。結(jié)核性胸膜炎組54例：（1）確診組，有病理學(xué)證據(jù)者；（2）臨床診斷組。胸腔積液為滲出液，細(xì)胞數(shù)量增多且以淋巴細(xì)胞為主；胸腔積液腺苷脫氨酶（ADA）活性增高，診斷性抗結(jié)核治療后胸腔積液吸收。非結(jié)核性胸膜炎組46例：臨床排除結(jié)核病者。

1.2 T-SPOT.TB檢測 T-SPOT.TB試驗(yàn)：采用上海復(fù)星有限公司提供的試劑盒。操作步驟嚴(yán)格按照說明書執(zhí)行。

1.3 血清TB-Ab、胸腔積液ADA檢測 血清TB-Ab檢測由免疫室完成，胸腔積液ADA由生化室完成。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理采用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)軟件處理。運(yùn)用配對四格表資料χ2檢驗(yàn)，兩兩比較采用Fisher確切概率法;以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 3種檢測方法靈敏度比較 54例結(jié)核性胸膜炎患者行T-SPOT.TB檢測，結(jié)果陽性50例，陰性4例，靈敏度為

92.6 %（95%CI：0.73～0.99）。44例結(jié)核性胸膜炎患者行胸腔積液ADA檢測，陽性42例，陰性2例，靈敏度為95.5%(95%CI：0.83～0.99）。44例結(jié)核性胸膜炎患者例血清TB-Ab檢測，結(jié)果陽性16例，陰性28例，靈敏度為36.4%(95%CI：0.17～0.59）。T-SPOT.TB診斷結(jié)核性胸膜炎的靈敏度與胸腔積液ADA比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，與血清TB-AB比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。見表1。

表1 同方法檢測結(jié)核性胸膜炎的靈敏度

2.2 3種檢測方法特異性比較 26例非結(jié)核性胸膜炎患者行T-SPOT.TB檢測，結(jié)果陽性2例，陰性24例，特異度為92.3%(95%CI：0.86～0.99）。16例非結(jié)核性胸膜炎患者行胸腔積液ADA檢測，結(jié)果陽性4例，陰性12例，特異度為75%(95%CI：0.47～0.92）。28例非結(jié)核性胸膜炎患者行血清TB-AB檢測，陽性6例，陰性22例，特異度為78.6%(95% CI：0.49～0.95）。T-SPOT.TB特異度與胸腔積液ADA及TB-Ab兩兩比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。見表2。

表2 不同方法檢測結(jié)核性胸膜炎的特異度

2.3 3種檢測方法陽性預(yù)測值比較 明確診斷的患者，均行T-SPOT.TB檢測，結(jié)果陽性52例，其中結(jié)核性胸膜炎患者50例，非結(jié)核性胸膜炎患者2例，T-SPOT.TB診斷結(jié)核性胸膜炎的陽性預(yù)測值為96.2%(95%CI：0.87～0.99）。60例行胸腔積液ADA檢測，48例陽性，其中結(jié)核性胸膜炎44例，非結(jié)核性胸膜炎4例，胸腔積液ADA診斷結(jié)核性胸膜炎陽性預(yù)測值為91.7%(95%CI：0.80～0.97）。76例行血清TB-Ab檢測，結(jié)果陽性14例，其中結(jié)核性胸膜炎患者8例，非結(jié)核性胸膜炎患者6例，血清TB-Ab診斷結(jié)核性胸膜炎的陽性預(yù)測值為57.1%（95% CI：0.18～0.90）。T-SPOT.TB陽性預(yù)測值與胸腔積液ADA比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；與血清TB-Ab比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。見表3。

表3 不同方法檢測結(jié)核性胸膜炎的陽性預(yù)測值

2.4 3種檢測方法陰性預(yù)測值比較 明確診斷的患者，均行T-SPOT.TB檢測，結(jié)果陰性28例，其中非結(jié)核性胸膜炎24例，結(jié)核性胸膜炎患者4例，T-SPOT.TB診斷結(jié)核性胸膜炎的陰性預(yù)測值為85.7%（95%CI：0.58～0.97）。60例行胸腔積液ADA檢測，陰性14例，其中非結(jié)核性胸膜炎12例，結(jié)核性胸膜炎2例，胸腔積液ADA診斷結(jié)核性胸膜炎的陰性預(yù)測值為85.7%（95%CI：0.58～0.97）。76例行血清TB-Ab檢測，結(jié)果陰性62例，其中非結(jié)核性胸膜炎患者22例，結(jié)核性胸膜炎患者40例，血清TB-Ab診斷結(jié)核性胸膜炎的陰性預(yù)測值為35.5%（95% CI：0.19～0.55）。T-SPOT.TB診斷結(jié)核性胸膜炎的陰性預(yù)測值與胸腔積液ADA比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；與血清TB-Ab比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。見表4。

表4 不同方法檢測結(jié)核性胸膜炎的陰性預(yù)測值

3 討論

結(jié)核性胸膜炎患者只有10%～20%能從胸腔積液中培養(yǎng)出結(jié)核桿菌,甚至多次胸膜活檢仍有20%～30%的病例不能確診。探討有助于診斷結(jié)核性胸膜炎的方法有重要的意義。

結(jié)核菌素純蛋白衍生物（PPD）皮試在接種卡介苗的地區(qū)診斷特異性降低[3]，PPD皮試在免疫力低下的人群，其靈敏度下降[4]。PPD的臨床價(jià)值有限。血清結(jié)核抗體對結(jié)核診斷價(jià)值，其敏感性及特異性均不高[5]，本研究應(yīng)用血清結(jié)核分枝桿菌IgG抗體檢測（膠體金法），對結(jié)核性胸膜炎診斷的靈敏度為36.4%，特異度為78.6%，臨床應(yīng)用受到限制。

近年來胸腔積液ADA測定用于胸腔積液性質(zhì)的診斷研究較多，多數(shù)報(bào)告認(rèn)為ADA在結(jié)核性胸膜炎胸腔積液中的含量明顯增高，是診斷結(jié)核性胸腔積液的良好指標(biāo)[6-9]。國內(nèi)多數(shù)報(bào)道將胸腔積液ADA以30～45U/L為界值，敏感性87.7%～93.7%。本研究組將胸腔積液ADA活性界定為22U/L，其中22例TBP及8例非結(jié)核性胸膜炎患者行胸腔積液ADA檢測，得出敏感度為95.5%，特異度為75%。

酶聯(lián)免疫斑點(diǎn)（ELISPOT）是目前最敏感的檢測抗原特異性T細(xì)胞的方法[10]。國內(nèi)張瑛等報(bào)道T-SPOT.TB檢測診斷結(jié)核性疾病敏感性、特異性分別為94.4%、95.2%[5]。周樂亮等[11]報(bào)道外周血T-SPOT.TB診斷結(jié)核性腹膜炎的敏感性為91.7%，特異性為76.5%。本研究得出外周血T-SPOT.TB診斷結(jié)核性胸膜炎的敏感性為92.6%，特異性為92.3%，與國內(nèi)報(bào)道相似。

綜上所述，外周血T-SPOT.TB對診斷結(jié)核性胸膜炎具有較高的靈敏度和特異性，均優(yōu)于血清結(jié)核抗體；其靈敏度與胸腔積液ADA檢測方法相仿，特異度優(yōu)于后者。

[1] 施毅，陳正堂.現(xiàn)代呼吸病治療學(xué)[M].北京：人民軍醫(yī)出版社，2002: 945.

[2] 劉曉清，張麗帆.γ-干擾素釋放分析T-SPOT.TB在診斷結(jié)核感染中的研究進(jìn)展[J].中國實(shí)驗(yàn)診斷學(xué)，2010，14(12):2065-2068.

[3] 霍菲菲，張麗帆，劉曉清.評價(jià)γ-干擾素釋放分析T-SPOT.TB在肺外結(jié)核病診斷中的敏感性[J].中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院學(xué)報(bào)，2009，31(4):449-452.

[4] Ozekinci T,Ozbek E,Celik Y.Comparison of tuberculin skon test and a specifeic T-cell-based test,T-Spot.TB,for the diagnosis of latent tuberculosis infection[J].J Int Med Res,2007,35(5):696-703.

[5] 張瑛，孫亞蒙，徐欣暉，等.斑點(diǎn)試驗(yàn)在結(jié)核性疾病中的診斷價(jià)值[J].中華臨床醫(yī)師雜志：電子版，2010，4（12）：2431-2434.

[6] 舒仁明，鄒立新，王修石，等.血清ADA和CRP檢測在肺結(jié)核診斷、鑒別診斷中的臨床價(jià)值[J].重慶醫(yī)學(xué)雜志，2003，32（12）：1666-1667.

[7] 孫耕耘.胸腔積液的診斷與進(jìn)展[J].臨床肺科雜志，2005，10(2):144-145.

[8] 李少文，王文莉，馬瓊鳳，等.1000例胸液腺苷脫氨酶檢測結(jié)果隨訪分析[J].醫(yī)師進(jìn)修雜志：內(nèi)科版，2005，28（9）：32-33.

[9] 顧炳權(quán)，白慧霞，羅鳴.胸水ADA、TB-DNA聯(lián)合檢測對結(jié)核性胸膜炎的診斷價(jià)值[J].中國血液流變學(xué)雜志，2005，15（3）：466-478.

[10] Shrestha R,Gyawali P,Yadav BK,et al.In-vitro assessment of cell mediated immunity by demonstrating effector-t cells for diagnosis of tuberculosis in Nepalese subjects[J].Nepal Med Coll J,2011,13(4):275-278.

[11] 周樂亮，沈守榮，何苗，等.結(jié)核感染T細(xì)胞斑點(diǎn)試驗(yàn)對結(jié)核性腹膜炎的診斷價(jià)值[J].中南大學(xué)學(xué)報(bào)（醫(yī)學(xué)版），2013，38（5）：526-531.

Objective To evaluate the value of T-SPOT. TB (tuberculous pleurisy) in the diagnosis of tuberculous pleurisy. Methods A total of 50 patients with clinically suspected TBP admitted were enrolled in this prospective cohort study. Peripheral blood T-SPOT.TB, ascetic adenosine deaminase (ADA) and serum tuberculosis antibody (TB-Ab) were measured in the 100 patients and we compared the diagnostic value of the 3 methods. Results According to the standard of diagnosis of TBP and grouping, 54 patients were diagnosed with tuberculous pleurisy. The sensitivity of T-SPOT.TB for the diagnosis of tuberculous pleurisy was 92.6% (50/54), with statistical signif cance when compared with serum TB-Ab 36.4% (16/44) (P＜0.05), without statistical signif cance when compared with ascitic ADA 95.5% (42/44). The specif city of T-SPOT.TB for the identif cation of non-tuberculous pleurisy was 92.3% (24/26), with statistical significance when compared with serum TB-Ab 78.6% (22/28) and ascitic ADA 75% (12/16) (P＜0.05). The positive prediction value of T-SPOT.TB for the diagnosis of tuberculous pleurisy was 96.2% (50/52), with statistical signif cance when compared with serum TB-Ab 57.1% (8/14) (P＜0.05), and without statistical signif cance when compared with ascitic ADA 91.7% (44/48). The negative prediction value of T-SPOT.TB for the identif cation of non-tuberculous pleurisy was 85.7% (24/28), with statistical signif cance when compared with serum TB-Ab 35.5% (22/62), and ascetic ADA 85.7% (12/14) (P＜0.05). Conclusion Peripheral blood T-SPOT. TB for the diagnosis of TBP is highly sensitive and specif c, which is better than serum TB-Ab and ascitic ADA. T-SPOT.TB has an important reference for diagnosing suspected tuberculous pleurisy.

T-SPOT.TB; Tuberculous pleurisy; Tuberculosis antibody; Ascitic adenosine deaminase

10.3969/j.issn.1009-4393.2015.15.021

江蘇 221009 江蘇省徐州市中心醫(yī)院呼吸內(nèi)科 （汪敏 張琦張清林）

張琦 E-mail:zhangqi1107@126.com