番茄紅素對血管內皮細胞損傷的保護作用

寧靜，張松，張余杭

(鄭州市第九人民醫院1.老年二科；2.眼科；3.病理科，鄭州 450053)

番茄紅素對血管內皮細胞損傷的保護作用

寧靜1，張松2，張余杭3

(鄭州市第九人民醫院1.老年二科；2.眼科；3.病理科，鄭州 450053)

目的 研究番茄紅素對香煙煙霧提取物致血管內皮細胞損傷的保護作用。方法 將人臍周靜脈血管內皮細胞(HUVEC)分為4組，對照組不做任何處理，其余3組分別使用10% 香煙煙霧提取物(CSE)、10%CSE+1.0 μmol·L-1番茄紅素及1.0 μmol·L-1番茄紅素處理。MTT法分析各組細胞增殖情況，活性氧簇(ROS)檢測試劑盒檢測各組細胞內ROS水平，流式細胞儀分析各組細胞周期和凋亡率，實時熒光定量PCR(qRT-PCR)、Western blot技術分析各組細胞沉默信息調節蛋白1(SIRT1)表達水平。結果 10%CSE組、10%CSE+1.0 μmol·L-1番茄紅素組、1.0 μmol·L-1番茄紅素組細胞存活率分別為(56.7±5.1)%，(75.6±7.1)%和(95.5±9.7)%。ROS檢測發現，對照組、10% CSE組、10%CSE+1.0 μmol·L-1番茄紅素組和1.0 μmol·L-1番茄紅素組相對熒光強度分別為25.3±3.9，67.3±4.6，45.3±3.9，20.8±2.9。10%CSE可引起細胞發生G2期阻滯，番茄紅素處理可以緩解此效果。對照組、10% CSE組、10%CSE+1.0 μmol·L-1番茄紅素組和1.0 μmol·L-1番茄紅素組凋亡率分別為(6.2±0.5)%，(30.8±4.3)%，(18.3±1.9)%，(7.6±0.4)%。qRT-PCR分析發現，與對照組比較，10%CSE組 SIRT1 mRNA表達是其(0.51±0.03)倍，10%CSE+1.0 μmol·L-1番茄紅素組為(0.84±0.05)倍、1.0 μmol·L-1番茄紅素組為(1.31±0.08)倍。Western blot蛋白條帶分析結果與qRT-PCR結果一致。結論 番茄紅素可以減輕CSE對HUVEC的損傷作用，其機制可能與番茄紅素提高SIRT1表達有關。

番茄紅素；血管內皮細胞，人臍周靜脈；香煙煙霧；沉默信息調節蛋白1

老年人是動脈粥樣硬化(atherosclerosis，AS)常見發病人群，因為老年人常伴有高血壓、血脂代謝異常、糖尿病等，這些均是AS發生的高危因素。AS可導致動脈管腔變窄、彈性減弱，引起血栓以及供血障礙，是心腦血管病的病理基礎[1]。發生于冠狀動脈的AS可引起心絞痛、猝死，嚴重威脅老年人群健康。AS發生的機制之一是血管內皮細胞(vascular endothelial cell，VEC)損傷，VEC損傷后屏障功能減弱，通透性增高，大量脂質在內皮下沉積；損傷的VEC對單核細胞粘附增加，單核細胞粘附后遷入內皮下間隙，分化為巨噬細胞，攝取低密度脂蛋白膽固醇，成為泡沫細胞，引發AS[2-3]。吸煙是導致AS的危險因素，因為香煙煙霧可以損傷VEC，引起VEC增殖抑制，誘導凋亡，其機制之一為香煙煙霧中的大量氧化物質能造成VEC的氧化損傷[4]。因此抗氧化可以作為防治香煙煙霧損傷的切入點。番茄紅素的抗氧化性已有報道[5]，但番茄紅素能否對抗香煙煙霧引起的氧化損傷筆者少見報道，其機制有待研究。沉默信息調節蛋白1(silent information regulator 1，SIRT1)在抑制氧化應激、保持內皮穩態方面起著重要作用[6]。筆者以人臍周靜脈VEC(human umbilical vein endothelial cell，HUVEC)為對象，觀察番茄紅素能否減輕香煙煙霧提取物造成的VEC損傷，并觀察此過程中SIRT1的表達變化，以期揭示番茄紅素對抗香煙煙霧損傷的機制。

1 材料與方法

1.1 細胞 HUVEC細胞株(上海拜力生物科技有限公司)。

1.2 試劑與儀器 小牛血清(杭州天杭生物制品有限公司，批號：20130813)，達爾伯克必需基本培養液(Dulbecco's minimum essential medium，DMEM)購自美國Gibco公司(批號：12491-015)，活性氧簇(reactive oxygen species，ROS)檢測試劑盒(北京碧云天生物制品有限公司，批號：S0033)，90%～95%番茄紅素(批號：75051)、噻唑藍[3-(4，5-dimethyl-2-thiazolyl)-2，5-diphenyl-2H-tetrazolium bromide，MTT]試劑(批號：M5655)、凋亡檢測試劑盒(批號：APOAF-20TST)、碘化丙啶(propidium iodide，PI，批號：P4170)均購自美國Sigma公司，RNA提取試劑盒購自美國QIAGEN公司(批號：931636)，ImProm-Ⅱ?反轉錄試劑盒(批號：K1005S)、GO Taq?qPCR Master Mix(批號：A6001)均購自普洛麥格(北京)生物技術有限公司，小鼠抗人SIRT1多克隆抗體(批號：sc-74504)、小鼠抗人β-actin多克隆抗體(批號：sc-130300)、辣根過氧化物酶(horse radish peroxidase，HPR)標記山羊抗小鼠二抗(批號：sc-2005)均購自美國SANTA CRUZ公司，二喹啉甲酸(bicinchoninic acid，BCA)蛋白定量試劑盒(批號：P1511)、超敏電化學發光液(super electrochemistry liquid，Super ECL)(批號：P1020)均購自北京普利萊基因技術有限公司。ELx800酶標儀(美國biotek公司)，FC500MCL流式細胞儀(美國貝克曼公司)，S1000PCR儀(美國BIO-RAD公司)，7700型熒光定量PCR分析系統(美國Applied Biosystems公司)。Western blot系統(北京六一儀器廠)。

1.3 細胞的培養 細胞培養環境為37 ℃，5%二氧化碳(CO2)培養箱，培養液使用含10%小牛血清的DMEM培養液。細胞消化采用0.25%胰酶，細胞匯合度70%～80%時傳代，取對數期細胞進行后續實驗。

1.3 香煙煙霧提取物(cigarette smoke extract，CSE)的制備與番茄紅素的配制 參考YOON LEE等方法并根據實際情況改進，搭建CSE采集系統，10 mL注射器反復抽吸3支去過濾嘴香煙產生的煙霧，并將所有煙霧溶于20 mL無血清DMEM培養液，調整pH為7.5，以滅菌后的孔徑0.22 μm過濾器除去細菌和大顆粒雜質。以此溶液作為100%CSE原液，10%CSE在此基礎上使用無血清DMEM培養液稀釋，所制備的CSE需在0.5 h內使用。番茄紅素溶解于四氫呋喃，制備成10 mmol·L-1母液，凍存于-80 ℃超低溫冰箱備用。每次實驗時臨時用DMEM培養液稀釋10 000倍，制備成1.0 μmol·L-1工作液。

1.4 MTT分析 取對數期細胞接種于96孔培養板，細胞貼壁后，隨機分為4組：對照組，不做任何處理；10%CSE組，僅用10%CSE處理細胞；10%CSE+1.0 μmol·L-1番茄紅素組，同時使用10%CSE和1.0 μmol·L-1番茄紅素處理細胞；1.0 μmol·L-1番茄紅素組，僅用1.0 μmol·L-1番茄紅素處理細胞。各組設5個平行孔，并設置空白調零孔。繼續培養24 h，各孔加入MTT15 μL后繼續培養4 h，小心棄去上清液，二甲亞砜150 μL充分溶解孔底藍紫色結晶，酶標儀測定波長490 nm處吸光度(A)值，計算各組細胞存活率，實驗重復3次。細胞存活率(%)=(實驗組A值/對照組A值)×100%。

1.5 細胞內ROS水平檢測 細胞分組和處理同“1.4”項，用各濃度CSE處理細胞24 h后，小心吸取培養液，消化細胞，將細胞重懸浮于含有終濃度為1.0 μmol·L-12'，7'-二氯熒光黃雙乙酸鹽(2'，7'-dichlorodihydrofluorescein diacetate，DCFH-DA)熒光探針無血清培養液。混勻后放入培養箱避光孵育0.5 h。隨后800 r·min-1(r=11 cm)離心5 min，去除上清液，使用無血清培養液小心反復洗滌、離心3次，洗去殘留探針。最終用磷酸鹽緩沖液(phosphate buffered solution，PBS)2 mL重新懸浮細胞，確保細胞密度為1×106個·mL-1，使用熒光酶標儀上機測量各組細胞熒光強度，激發波長488 nm，發射波長525 nm。實驗重復3次。

1.6 細胞周期分析 細胞分組和處理如“1.4”項，培養24 h后，收集細胞，使用預冷的冰PBS洗滌細胞，然后使用70%預冷乙醇，4 ℃固定12 h。使用PBS再次洗滌細胞，加入50 μg·mL-1PI 500 μL，4 ℃避光染色30 min。隨后，使用流式細胞儀分析細胞周期。實驗重復3次。

1.7 細胞凋亡分析 細胞分組和處理同“1.4”項。培養24 h后，收集細胞，使用預冷冰PBS洗滌細胞，離心后使用Annexin V-FITC 凋亡檢測試劑盒緩沖液500 μL重懸浮細胞。依次加入Annexin V 5 μL以及PI10 μL，常溫避光靜置10 min后，使用流式細胞儀分析細胞凋亡率。實驗重復3次。

1.8 實時熒光定量PCR檢測SIRT1的mRNA表達 細胞分組和處理同“1.4”項。使用RNA提取試劑盒提取各組細胞RNA。使用ImProm-II?反轉錄試劑盒對提取出的RNA進行反轉錄，以合成cDNA。反轉錄體系參照試劑盒提供的說明書。使用GO Taq?qPCR Master Mix試劑盒對上述合成的cDNA進行PCR擴增。反應體系和方案參照試劑盒說明書。SIRT1上游引物為5′-GTATTTATGCTCGCCTTGCTG -3′，下游引物為5′-TGACAGAGATGGCTGGAAT-3′；內參GAPDH上游引物為5′-AGAAGGCTGGGGCTCATTTG -3′，下游引物為5′-AGGGGCCATCCACAGTCTTC -3′。使用2-△△CT法分析各樣本SIRT1mRNA相對表達情況。實驗重復3次。

1.9 Western blot 檢測SIRT1蛋白表達 使用含有1%蛋白酶抑制劑混合物的RIPA蛋白裂解液(每孔500 μL)裂解細胞10 min，4 ℃12 000×g離心，取上清液。使用BCA蛋白定量分析盒，按說明書確定每孔蛋白的濃度。將總蛋白樣本與5倍濃縮(5×)緩沖液混勻，煮沸5 min后上樣，每孔上樣量保證為30 μg。使用12%聚丙烯酰胺凝膠電泳，電壓110 V，時間1.5 h。隨后在冰浴中轉膜，使用聚偏二氟乙烯(polyvinylidene fluoride，PVDF)膜，轉膜條件為恒流250 mA，時間1.5 h。轉膜結束后，使用5%脫脂奶粉室溫封閉1 h。分別使用小鼠抗人SIRT1多克隆抗體(1：500)，小鼠抗人β-actin多克隆抗體(1：1 500)4 ℃孵育12 h。接著使用磷酸鹽-聚山梨酯-20緩沖液(phosphate-tween-20 buffer，PBST)洗滌3次，除去未結合的一抗。使用HPR標記的二抗避光孵育膜2 h。用超敏電化學發光液(super electrochemistry liquid，Super ECL)發光試劑盒處理膜條，曝光顯影后分析蛋白條帶。實驗重復3次。

2 結果

2.1 細胞增殖情況 見圖1。10% CSE處理HUVEC細胞后，細胞增殖被明顯抑制，細胞存活率降至(56.7±5.1)%，與對照組比較，差異有統計學意義(P<0.05)，提示10%CSE可以抑制細胞增殖。10%CSE+1.0 μmol·L-1番茄紅素組細胞增殖受到抑制，細胞存活率(75.6±7.1)%，與對照組比較，差異有統計學意義(P<0.05)，但該存活率明顯高于10%CSE處理組(P<0.05)，提示1.0 μmol·L-1番茄紅素可以削弱CSE增殖抑制作用。1.0 μmol·L-1番茄紅素處理組細胞存活率(95.5±7.8)%，與對照組比較，差異無統計學意義。

與對照組比較，*1P<0.05；與10%CSE組比較，*2P<0.05

圖1 4組細胞存活率

Compared with control group，*1P<0.05；compared with 10% CSE group，*2P<0.05

Fig.1 Cell survival rates of 4 groups of cells

2.2 細胞內ROS水平 裝載ROS檢測試劑盒中的DCFH-DA探針后，對照組相對熒光強度(25.3±3.9)，10%CSE組相對熒光強度(67.3±4.6)，兩組比較，差異有統計學意義(P<0.05)，提示10%CSE處理后細胞內ROS水平升高。10%CSE+1.0 μmol·L-1番茄紅素組相對熒光強度為(45.3±3.9)，與對照組和10%CSE組比較，差異有統計學意義(P<0.05)。1.0 μmol·L-1番茄紅素組相對熒光強度為(20.8±2.9)，與對照組比較，差異無統計學意義(圖2)。

與對照組比較，*1P<0.05；與10%CSE組比較，*2P<0.05

圖2 4組細胞ROS水平

Compared with control group，*1P<0.05；compared with 10% CSE group，*2P<0.05

Fig.2 ROS levels of 4 groups of cells

2.3 CSE可以引起細胞發生G2期阻滯，番茄紅素可以減輕該效果 見圖3。流式細胞儀分析可見對照組G1/G0百分比為(72.0±6.3)%，G2/M期的百分比為(10.5±2.1)%。；10%CSE組G1/G0百分比為(53.1±7.2)%，G2/M期百分比為(27.5±1.6)%，與對照組比較，差異有統計學意義(P<0.05)，提示10%CSE處理導致細胞G2期阻滯。10%CSE+1.0 μmol·L-1番茄紅素組G1/G0百分比為(65.0±3.3)%，G2/M期百分比為(17.5±3.1)%。與對照組和10%CSE組比較，均差異有統計學意義(P<0.05)。1.0 μmol·L-1番茄紅素組G1/G0百分比為(70.5±3.5)%，G2/M期百分比為(9.3±3.6)%，與對照組比較，差異無統計學意義。

2.4 CSE誘導細胞凋亡，番茄紅素減輕該效果 見圖4。流式細胞儀分析后獲得各組散點圖，以右上象限+右下象限所占比例作為細胞凋亡率。10%CSE處理組凋亡率(30.8±4.3)%，對照組凋亡率(6.2±0.5)%，10%CSE處理組明顯高于對照組(P<0.05)，提示CSE處理可以誘導細胞凋亡。10%CSE+1.0 μmol·L-1番茄紅素組凋亡率(18.3±1.9)%，與對照組和10%CSE組比較，均差異有統計學意義(P<0.05)，提示對于CSE處理的HUVEC，番茄紅素有抗凋亡作用。單純番茄紅素處組細胞凋亡率為(7.6±0.4)%，與對照組比較，差異無統計學意義。

圖3 流式細胞儀分析4組細胞的細胞周期

圖4 流式細胞儀分析4組細胞凋亡率

2.5 CSE處理后SIRT1表達水平降低，番茄紅素可以提高SIRT1表達 見圖5。qRT-PCR檢測發現，10%CSE處理后，SIRT1 mRNA表達顯著下降，相對表達水平為(0.51±0.03)，與對照組比較，差異有統計學意義(P<0.05)。10%CSE+1.0 μmol·L-1番茄紅素組細胞SIRT1 mRNA表達下降，相對表達水平為(0.84±0.05)，與對照組和10%CSE組比較，均差異有統計學意義(P<0.05)。1.0 μmol·L-1番茄紅素組SIRT1mRNA表達增高，與對照組比較，增高了(1.31±0.08)倍(P<0.05)。Western blot分析結果與qRT-PCR結果一致，10%CSE組細胞SIRT1蛋白水平降低，10%CSE+1.0 μmol·L-1番茄紅素組SIRT1與對照組比較，亦有所降低，但顯著高于10%CSE組，蛋白條帶灰度值分析，差異有統計學意義(P<0.05)。1.0 μmol·L-1番茄紅素組SIRT1蛋白表達增高(圖6)。上述結果提示番茄紅素對HUVEC的保護作用可能通過提高SIRT1蛋白表達來實現。

3 討論

香煙煙霧中含有大量自由基之類的強氧化劑，這些物質進入人體后，通過復雜的反應生成ROS，包括過氧化氫、超氧陰離子等。這些物質在細胞內蓄積導致細胞氧化應激損傷[8]。氧化應激損傷范圍廣泛，能夠對蛋白、糖、脂質、核酸造成損傷，從多個通路途經引起細胞的結構和功能障礙，其中較為嚴重的損傷是影響細胞的增殖，誘導細胞凋亡[9-10]。筆者在本研究中發現，使用10%CSE處理HUVEC，細胞增殖受到抑制，發生G2期阻滯，同時凋亡顯著增多。證實CSE確實能夠造成血管內皮損傷，同時細胞內ROS水平檢測證實，CSE可能通過提高細胞內ROS水平，引發氧化應激損傷VEC。VEC的損傷是AS發生初期的關鍵環節，大量研究表明，AS發生過程中如脂質斑塊的形成等環節均存在VEC的凋亡。VEC凋亡或因增殖障礙不能及時更新，會導致其屏障功能喪失，脂質異常滲入，還可引起血小板黏附聚集，導致血栓形成，同時還會造成單核細胞浸潤，進而形成大量泡沫細胞[11]。因此使用抗氧化藥物抵抗氧化損傷是預防AS的重要切入點，尤其對于有長期吸煙史的老年人更為重要。

與對照組比較，*1P<0.05；與10%CSE組比較，*2P<0.05

圖5 4組細胞SIRT1 mRNA表達水平

Compared with control group，*1P<0.05.compared with 10% CSE group，*2P<0.05

Fig.5 mRNA expression of SIRT1 in four groups of cells

番茄紅素是一種不飽和類胡蘿卜素，主要存在與茄科植物如西紅柿中，是天然的、具有清除自由基、消除單線氧態能力的抗氧化劑。研究證實番茄紅素能夠通過抗氧化作用保護神經細胞，緩解缺血-再灌注損傷，并且具有一定的抗癌作用[5，12]。 本研究使用番茄紅素處理HUVEC后，明顯緩解CSE造成的損傷效果，同時降低細胞內ROS水平，提示番茄紅素能夠抑制CSE造成的氧化損傷。進一步研究其機制發現，CSE處理能夠降低SIRT1表達水平，而番茄紅素能夠從一定程度上提高SIRT1表達。SIRT1具有去乙酰酶活性，與心血管疾病中的關系較緊密，它主要通過調節乙酰化/去乙酰化平衡來調控組蛋白及其他轉錄調節因子，進而維持與凋亡、氧化相關的一系列蛋白的活性[13]。如SIRT1可以通過FOXO通路抑制細胞凋亡、通過AMPK通路減少ROS水平，當然AS中存在SIRT1的低表達也已被證實[14-15]。這些機制能夠解釋本研究中CSE處理后，HUVEC的SIRT1表達降低。同時本研究結果也提示番茄紅素的抗氧化作用的其中一個機制是提高SIRT1表達。總之，本研究發現番茄紅素能夠緩解CSE造成的VEC損傷，其機制與SIRT1的表達有關。

與對照組比較，*1P<0.05；與10%CSE組比較，*2P<0.05；A.蛋白條帶；B.SIRT1條帶相對于β-actin條帶的灰度值

圖6 4組細胞SIRT1 蛋白表達水平

Compared with control group，*1P<0.05.compared with 10% CSE group，*2P<0.05.A.protein bands in western blot.B.band indensity(SIRT1/β-actin)

Fig.6 Potein expression of SIRT1 in 4 groups of cells

[1] 陳匯.他汀類藥物抗動脈粥樣硬化研究進展[J].醫藥導報，2007，26(4)：331-334.

[2]FIGAROLA J L，SINGHAL J，RAHBAR S，et al.LR-90 prevents methylglyoxal-induced oxidative stress and apoptosis in human endothelial cells[J].Apoptosis，2014，19(5)：776-788.

[3] PEJKOV H， KEDEV S， PANOV S，et al.Atherosclerosis of coronary blood vessels-local or systemic inflamation?[J].Prilozi，2013，34(3)：5-11.

[4] MESSNER B，BERNHARD D.Smoking and cardiovascular disease：mechanisms of endothelial dysfunction and early atherogenesis[J].Arterioscler Thromb Vasc Biol，2014， 34(3)：509-515.

[5] DITOMO P，CANALI R，CIAVARDELLI D，et al.beta-Caro-tene and lycopene affect endothelial response to TNF-alpha reducing nitro-oxidative stress and interaction with monocytes[J].Mol Nutr Food Res，2012，56(2)：217-227.

[6]YAO H，SUNDAR I K，AHMAD T，et al.SIRT1 protects against cigarette smoke-induced lung oxidative stress via a FOXO3-dependent mechanism[J].Am J Physiol Lung Cell Mol Physiol，2014，306(9)：L816-828.

[7] YOON J S, LEE H J, CHAE M K, et al. Cigarette smoke extract-induced adipogenesis in Graves' orbital fibroblasts is inhibited by quercetin via reduction in oxidative stress[J].J Endocrinol,2013,216(2):145-156.

[8] KHANNA A，GUO M，MEHRA M，et al.Inflammation and oxidative stress induced by cigarette smoke in Lewis rat brains[J].J Neuroimmunol，2013，254(1-2)：69-75.

[9] WALCZAK-JEDRZEJOWSKA R，WOLSKI J K，SLOWIKO-WSKA-HILCZER J.The role of oxidative stress and antioxidants in male fertility[J].Cent Eur J Urol，2013，66(1)：60-67.

[10] JUNG W W.Protective effect of apigenin against oxidative stress-induced damage in osteoblastic cells[J].Int J Mol Med，2014，33(5)：1327-1334.

[11]ROBASZKIEWICZ A， BARTOSZ G， PITTA R， et al.HOCl-modified phosphatidylcholines induce apoptosis and redox imbalance in HUVEC-ST cells[J].Arch Biochem Biophys，2014，548：1-10.

[12] SILBERSTEIN T， SILBERSTEIN E， SAPHIER O.Lyco-pene and tomatoes-their effect on prevention of prostatic cancer[J].Harefuah，2013，152(8)：461-499.

[13] IIJIMA K.Bone and calcium update；diagnosis and therapy of bone metabolism disease update.Regulatory mechanism of mammalian sirtuin SIRT1 in vascular calcification：impact of vascular smooth muscle cell senescence[J].Clin Calcium，2011，21(12)：53-60.

[14] HORI Y S， KUNO A， HOSODA R， et al.Regulation of FOXOs and p53 by SIRT1 modulators under oxidative stress[J].PLoS One，2013，8(9)：e73875.

[15] IIJIMA K.Hyperphosphatemia and cardiovascular diseases ：impact of vascular calcification and endothelial dysfunction[J].Clin Calcium，2012，22(10)：1505-1513.

DOI 10.3870/yydb.2015.07.004

Protection of Lycopene Against the Injury of Vascular Endothelial Cells

NING Jing1， ZHANG Song2， ZHANG Yuhang3

(1.TheSecondDepartmentofGeriatrics；2.DepartmentofOphthalmology；3.DepartmentofPathology，the9thPeople’sHospitalofZhengzhouCity,Zhengzhou450053，China)

Objective To study the protective effect of lycopene on vascular endothelial cell injury by cigarette smoke extract (CSE). Methods CSE was prepared and the human umbilical vein endothelial cells (HUVECs) were assigned into four groups, cells in control were untreated，and cells in other three groups were treated by 10%CSE, 10%CSE+1.0 μmol·L-1lycopene and 1.0 μmol·L-1lycopene, respectively.Cell viability was evaluated using MTT assay.The intracelluar reactive oxygen species (ROS) level was detected by ROS assay kits.Cell cycle and apoptosis were analyzed by flow cytometry.SIRT1 expression was detected by real-time fluorescence quantification PCR (qRT-PCR) and Western blot. Results Cell viability in 10%CSE group, 10%CSE+1.0 μmol·L-1lycopene or 1.0 μmol·L-1lycopene group was (56.7±5.1)%，(75.6±7.1)% and (95.5±9.7)%, respectively.ROS assay showed that the relative fluorescence intensity in the control was 25.3±3.9, however, in 10%CSE group, 10%CSE+1.0 μmol·L-1lycopene group or 1.0 μmol·L-1lycopene group were 67.3±4.6, 45.3±3.9 and 20.8±2.9, respectively.10%CSE could induce G2arrested and which could be antagonized by 1.0 μmol·L-1lycopene.The apoptosis rate in the control, 10%CSE group, 10%CSE+1.0 μmol·L-1lycopene group or 1.0 μmol·L-1lycopene group was (6.2±0.5)%, (30.8±4.3)%, (18.3±1.9)% and (7.6±0.4)%, respectively.As shown in qRT-PCT testing, compared with the control, mRNA of SIRT1 in 10%CSE group, 10%CSE+1.0 μmol·L-1lycopene group and 1.0 μmol·L-1lycopene group was (0.51±0.03) fold, (0.84±0.05) fold, and (1.31±0.08) fold compared to the control, the data from western blot were consistent with qRT-PCR results. Conclusion Lycopene can prevent HUVECs from injury induced by CSE by upregulation of SIRT1.

Lycopene；Vascular endothelial cell, human umbilicalvien；Cigarette smoke；Silent information regulator 1

2014-05-27

2014-06-20

寧靜(1974-)，女，河南鄭州人，副主任醫師，學士，主要研究方向：老年病及心腦血管疾病。E-mail：zhengzhou9yningj@163.com。

R286；R965

A

1004-0781(2015)07-0860-06