白介素17及單核細(xì)胞趨化因子-1與長程類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎患者血管病變的相關(guān)性研究

張 晶，劉 建，周 婷，蘇 江，董 巍，周 彬

(四川省醫(yī)學(xué)科學(xué)院·四川省人民醫(yī)院 a.風(fēng)濕免疫科；b.中心實驗室，四川 成都 610072)

白介素17及單核細(xì)胞趨化因子-1與長程類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎患者血管病變的相關(guān)性研究

張 晶a，劉 建a，周 婷a，蘇 江a，董 巍b，周 彬a

(四川省醫(yī)學(xué)科學(xué)院·四川省人民醫(yī)院 a.風(fēng)濕免疫科；b.中心實驗室，四川 成都 610072)

目的 研究長程類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎(RA)患者血清白介素17(IL-17)、單核細(xì)胞趨化因子1(MCP-1)與血管病變之間的相關(guān)性，進而探討RA血管病變的發(fā)病機制。方法 選擇長程RA患者(RA組)及健康體檢者(對照組)各94例，收集兩組紅細(xì)胞沉降率、C反應(yīng)蛋白、類風(fēng)濕因子、抗環(huán)瓜氨酸肽抗體、DAS-28等實驗室指標(biāo)，檢測兩組血清的IL-17和MCP-1濃度，采用動脈硬化測定儀檢測肱-踝動脈脈搏波傳導(dǎo)速度(baPWV)，分析各項指標(biāo)與baPWV的相關(guān)性。結(jié)果 RA組baPWV、IL-17和MCP-1顯著高于對照組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P< 0.05)。多元回歸分析顯示baPWV與年齡、心率、IL-17及MCP-1呈正相關(guān)(P< 0.05)，四種影響因素對多元回歸方程貢獻率分別為8.04%、1.36%、23.39%和14.97%。結(jié)論 RA患者的baPWV、IL-17和MCP-1水平均顯著高于對照組，且IL-17及MCP-1可能與RA的血管病變機制有關(guān)，IL-17有望成為一種篩查RA患者血管病變的指標(biāo)。

類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎；白介素-17；單核細(xì)胞趨化因子-1；血管病變

類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎(rheumatoid arthritis，RA)是一種以慢性對稱性非化膿性多關(guān)節(jié)炎為典型特征的系統(tǒng)性自身免疫性疾病，血管病變是其關(guān)節(jié)外病變的表現(xiàn)之一。目前已有大量的研究顯示RA患者心血管疾病的發(fā)病率(3.43%)遠(yuǎn)高于一般人群(0.59%)，心血管事件占RA死因的42%，并且RA病程的長短與心血管事件風(fēng)險成正相關(guān)，使得RA患者的生存期縮短3～18年[1]。在RA的心血管事件中又以動脈粥樣硬化病變?yōu)橹?，大量研究表明血管僵硬度增加與心腦血管事件死亡率密切相關(guān)[2，3]。研究也發(fā)現(xiàn)，RA患者存在動脈僵硬度增加[4]，如何早期評估RA患者的血管病變并早期進行干預(yù)對于改善RA的預(yù)后尤其重要。目前一致認(rèn)為炎癥反應(yīng)是動脈硬化發(fā)生、進展和斑塊破裂形成血栓的共同通道，大量的炎癥細(xì)胞及炎性介質(zhì)參與其中。白介素17(Interleukin-17，IL-17)作為一種誘導(dǎo)炎癥強有力的細(xì)胞因子，在多種自身免疫性疾病中發(fā)揮重要作用。其在動脈粥樣硬化中的作用也被廣泛研究，但仍存在爭議[5，6]。單核細(xì)胞趨化因子1(monocytechemoattracta protein-1，MCP-1)作為一種特異性單核細(xì)胞趨化因子，能促使動脈粥樣硬化的形成，在其早期起重要作用[7]。本研究通過檢測長程RA患者血漿中IL-17、MCP-1濃度，并結(jié)合近年開發(fā)的評估脈搏波傳導(dǎo)速度(pulse wave velocity，PWV)的新方法上臂-腳踝PWV(brachial-ankle pulse wave velocity，baPWV)來較準(zhǔn)確地綜合反映動脈僵硬度[8]，觀察IL-17、MCP-1與baPWV是否存在關(guān)聯(lián)，初步探討它們之間的相關(guān)性，以期進一步闡明IL-17、MCP-1在RA患者中動脈硬化的可能機制，進而有利于早期發(fā)現(xiàn)、改變其炎癥狀態(tài)，為治療RA的血管病變提供新的思路。

1 資料與方法

1.1 一般資料 連續(xù)納入2012年10月至2014年4月在四川省人民醫(yī)院風(fēng)濕免疫科住院的RA患者94例，年齡24～70歲，均符合1987年美國風(fēng)濕病學(xué)會的RA分類標(biāo)準(zhǔn)。病程均在5年以上，排除了踝臂血壓指數(shù)(ankle brachial index，ABI)異常6例。對照組94例，為與RA組年齡、性別、體重指數(shù)(BMI)水平相匹配的健康體檢者。入選對象均排除血脂異常、吸煙、嗜酒、心腦血管疾病史、原發(fā)性或繼發(fā)性高血壓、感染性疾病、惡性腫瘤，以及其他自身免疫性疾病、糖尿病及肝腎功不全的患者。所有研究對象均簽署知情同意書。兩組年齡、性別、體重指數(shù)、身高、心率比較，差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P> 0.05)。

1.2 實驗室檢查 兩組患者均測定C反應(yīng)蛋白(CRP)、類風(fēng)濕因子(RF)，并采用ELISA法檢測血清中IL-17和MCP-1的濃度水平。測定RA組DAS-28評分、血沉(ESR)及抗環(huán)瓜氨酸(CCP)抗體。

1.3 baPWV的測量 采用歐姆龍BP-203RPEⅢ動脈硬化測定儀測量baPWV和ABI值。患者靜息 15 min以上，室溫25 ℃左右，平臥于檢查床上，四肢縛以四個示波血壓袖帶，連接好I導(dǎo)聯(lián)心電圖(ECG)電極，并將一個心音圖(PCG)傳感器放置在心電圖胸導(dǎo)聯(lián)V2 的位置上，4 個袖帶同時充放氣，并監(jiān)測I 導(dǎo)聯(lián)ECG 和PCG。上臂波形的波峰和踝部波形的波峰之間的時間間隔被定義為上臂到踝部的時間間隔(△tba)，根據(jù)患者的身高自動計算出baPWV 測量點之間的距離：從心臟到上臂的距離(lb)=0.2195×身高(cm)-2.0734，從心臟到腳踝的距離(la)=0.8129×身高(cm)+12.328，baPWV=(la-lb)/△tba。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法 采用SPSS 13.0軟件進行數(shù)據(jù)分析。正態(tài)分布的計量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示，組間指標(biāo)的比較采用t檢驗；非正態(tài)分布的數(shù)據(jù)采用中位數(shù)表示，使用Wilcoxon符號秩檢驗比較；計數(shù)資料以構(gòu)成比描述；各項臨床指標(biāo)與baPWV的關(guān)系采用多元逐步回歸分析法分析。P< 0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 實驗室指標(biāo)的比較 兩組之間CRP、RF、IL-1、MCP-1及baPWV值比較，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(均P< 0.01)。因健康對照組未行ESR、抗CCP抗體及DAS-28檢查，故未做相關(guān)比較。

表2 兩組實驗室指標(biāo)比較

2.2 baPWV與各臨床指標(biāo)間的多元逐步回歸分析 將年齡、性別、BMI、心率、病程、DAS-28、CRP、ESR、RF、抗CCP、IL-17、MCP-1進行多元逐步回歸法分析，比較其與baPWV的關(guān)系。結(jié)果表明：年齡、心率、IL-17、MCP-1與baPWV呈正相關(guān)，四種影響因素對多元回歸方程貢獻率分別為年齡(8.04%)、心率(1.36%)、IL-17(23.39%)、MCP-1(14.97%)。而性別、病程、BMI、DAS-28、CRP、ESR、RF、抗CCP抗體均未進入最終的回歸模型。

表3 以baPWV作為應(yīng)變量的多元回歸分析

3 討論

RA的血管病變是其關(guān)節(jié)外病變的表現(xiàn)之一，主要表現(xiàn)為血管壁淋巴細(xì)胞、中性粒細(xì)胞及漿細(xì)胞浸潤，血管內(nèi)膜增生，纖維蛋白樣壞死或血栓形成。其機制尚未完全清楚，可能有多因素的參與：如慢性系統(tǒng)性炎癥、免疫因素、糖皮質(zhì)激素的使用、傳統(tǒng)的危險因素等。而動脈粥樣硬化是其血管病變的早期表現(xiàn)。已有研究證實動脈血管僵硬度是獨立于其他心血管事件危險因素的一重要危險因素[9]，PWV 是判斷動脈僵硬度的經(jīng)典無創(chuàng)性指標(biāo)之一[10]，是指心臟每一次跳動泵出血液的沖擊波動傳到動脈末梢的傳導(dǎo)速度，可以早期檢測動脈血管功能的異常。而本研究采用的baPWV是近年較為常用的一種方法，通過肘窩至腳踝一段動脈僵硬度的綜合反映，能夠較準(zhǔn)確地評估PWV及預(yù)測未來心血管事件的發(fā)生[8]。在本研究中，RA組的baPWV高于對照組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P= 0.008)。提示RA患者常伴有較高的動脈硬化發(fā)生率，這可能是心血管事件的又一大類潛在高危人群，故在臨床中應(yīng)對RA患者進行常規(guī)心血管疾病方面的篩查，以便早期診治，改善預(yù)后。

既往研究發(fā)現(xiàn)IL-17和MCP-1是與早期動脈粥樣硬化相關(guān)的炎癥因子[5～7]。IL-17是由輔助性 T 細(xì)胞 Th17 分泌產(chǎn)生的特征性細(xì)胞因子。IL-17 家族細(xì)胞因子已在人動脈粥樣硬化斑塊中被檢測到[11]。大量研究表明，在人或小鼠模型的血管性疾病中 IL-17 表達是增加的，包括：原發(fā)性自身免疫性血管炎、動脈粥樣硬化中的慢性血管炎癥，并且與動脈粥樣硬化的發(fā)生、發(fā)展密切相關(guān)[5，12]。然而也有研究顯示IL-17在動脈粥樣硬化中可能起保護作用[6]。目前無論是基礎(chǔ)研究還是臨床研究IL-17在動脈粥樣硬化中的作用仍存在爭議。IL-17 似乎是通過多層次的炎癥變化如細(xì)胞粘附、外滲、細(xì)胞活化 T 細(xì)胞共刺激/增殖和抗原提呈在動脈粥樣硬化的炎癥級聯(lián)反應(yīng)[5，12]中參與促動脈粥樣硬化過程。而IL-17具有調(diào)控作用，不僅是炎癥及免疫反應(yīng)的重要調(diào)節(jié)因子，使T細(xì)胞的作用增強，調(diào)節(jié)先天及適應(yīng)性免疫反應(yīng)，并且可激活RhoA/Rho激酶信號通路，從而導(dǎo)致內(nèi)皮功能障礙，其可能是促進動脈粥樣硬化發(fā)生、發(fā)展的因子，可能與動脈粥樣硬化存在因果聯(lián)系。在本研究中，我們初步觀察到RA患者組血清IL-17濃度明顯高于正常對照組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P= 0.000)，且與baPWV呈正相關(guān)，進一步證明了IL-17對動脈硬化的促進作用。提示在除了年齡、心率這兩種影響動脈硬化的因素外，對血清IL-17水平的監(jiān)測有望成為一種判斷長程RA患者動脈粥樣硬化病情進展、預(yù)后及指導(dǎo)臨床診治的手段。

MCP-1作為一種特異性單核細(xì)胞趨化因子，通過與相對應(yīng)的受體結(jié)合，使血液中的單核細(xì)胞遷入血管內(nèi)膜下，活化為巨噬細(xì)胞，攝取已進入內(nèi)膜并發(fā)生修飾的脂蛋白形成單核細(xì)胞源泡沫細(xì)胞，促使動脈粥樣硬化的形成，在動脈粥樣硬化的早期起重要作用[7]。同時還可刺激成纖維細(xì)胞上調(diào)TGF-β和增加基質(zhì)金屬蛋白酶的表達而使膠原纖維增多[13]。本研究發(fā)現(xiàn)RA患者組血清MCP-1水平明顯高于正常對照組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P= 0.000)，并且與baPWV呈正相關(guān)，但其貢獻率低于IL-17，高于年齡和心率。因IL-17可誘導(dǎo)成纖維細(xì)胞、角質(zhì)細(xì)胞、上皮細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞等多種細(xì)胞分泌MCP-l[14，15]，故我們推測IL-17即可通過誘導(dǎo)MCP-1的表達間接介導(dǎo)單個核細(xì)胞和中性粒細(xì)胞向炎癥部位的遷移、浸潤，從而參與動脈粥樣硬化的發(fā)生、發(fā)展[16]。但在動脈粥樣硬化過程中IL-17與MCP-1之間的信號通路及產(chǎn)生的生物學(xué)效應(yīng)還需進一步研究。

在本研究中，雖然RA組與對照組之間CRP、RF的差異有統(tǒng)計學(xué)意義，但與baPWV無明顯相關(guān)性，提示CRP、RF可能只是動脈粥樣硬化發(fā)生時伴隨的一種現(xiàn)象，不能從本質(zhì)上反應(yīng)動脈硬化的作用機制。本研究同時觀察到病程這一因素與baPWV也無明顯相關(guān)性，可能與本研究入組患者均為長程RA患者，統(tǒng)計上存在一定偏倚有關(guān)，有待進一步擴大樣本種類深入大規(guī)模的隨訪研究。

綜上所述，本研究就 IL-17、MCP-1在RA患者血清中的水平與血管病變嚴(yán)重程度之間作一初步探討，觀察到二者與動脈硬化之間有正相關(guān)性，然而其與RA相關(guān)血管損害的作用機制、因果聯(lián)系及其對其他心血管疾病的預(yù)測及評估價值仍有待進一步深入研究及探討，以期有利于早期發(fā)現(xiàn)、改變RA患者伴動脈粥樣硬化時的炎癥狀態(tài)，為RA患者的血管病變提供新的監(jiān)測、預(yù)測指標(biāo)，而IL-17作為一種血管炎癥因子，在RA并發(fā)動脈粥樣硬化的預(yù)防及治療領(lǐng)域有著廣闊的前景。

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The correlation between IL-17，MCP-1 and vasculopathy in rheumatoid arthritis patients with long course

ZHANG Jinga，LIU Jiana，ZHOU Tinga，SU Jianga，DONG Weib，ZHOU Bina

(a.Department of Rheumatology and Immunology，b.clinical laboratory，Sichuan Academy of Medical Sciences & Sichuan Provincial People’s Hospital，Chengdu 610072，China)

ZHOUBin

Objective To study the relationship between the serum concentrations of interleukin-17(IL-17)，monocytechemoattracta protein-1(MCP-1)and vasculopathy in rheumatoid arthritis(RA)patients with long course，and to investigate the mechanism of vasculopathy in RA.Methods Ninety-four RA patients with long course and ninety-four normal persons were collected，and recorded laboratory indexes，including erythrocyte sedimentation rate(ESR)，C-reactive protein(CRP)，rheumatoid factor(RF)，anti cyclic citrullinated peptide antibody and DAS-28.Serum concentrations of IL-17 and MCP-1 were determined.Atherosclerosis Tester was used to examine baPWV in 94 RA patients and 94 healthy controls.The relationship between all indexes and baPWV was examined.Results Compared with controls，we found that RA patients had a significantly higher prevalence of baPWV，IL-17and MCP-1.The concentration of IL-17，MCP-1，age and heart rate were positively related to the baPWV by multiple regression analysis，the R2change was 23.39%，14.97%，8.04% and 1.36% respectively.Conclusion There was a significantly higher prevalence of baPWV，IL-17 and MCP-1 in RA group than control group.IL-17 and MCP-1 may be involved in the occurrence and development of vasculopathy in RA，and IL-17 may become an index for early screening of high risk population suffering from vasculopathy in patients with RA.

Rheumatoid arthritis； Interleukin-17； Monocytechemoattracta protein-1； Vasculopathy

四川省衛(wèi)生廳科研基金資助項目(編號：110250)

周 彬，男，主任醫(yī)師，碩士研究生導(dǎo)師。中華醫(yī)學(xué)會風(fēng)濕病學(xué)分會委員，中國醫(yī)師協(xié)會風(fēng)濕免疫科醫(yī)師分會委員，中國醫(yī)師協(xié)會免疫吸附學(xué)術(shù)委員會常務(wù)委員，中華醫(yī)學(xué)生物免疫學(xué)會首屆學(xué)術(shù)委員會常務(wù)委員，國家風(fēng)濕病數(shù)據(jù)中心專家委員會委員，中國系統(tǒng)性紅斑狼瘡研究協(xié)作組(CSTAR)執(zhí)行委員會委員，中國健康促進基金會系統(tǒng)性紅斑狼瘡專項基金專家委員會委員，四川省免疫學(xué)會常務(wù)理事，四川省免疫學(xué)會風(fēng)濕免疫專業(yè)委員會主任委員，四川省風(fēng)濕病學(xué)專業(yè)委員會副主任委員，四川省醫(yī)師協(xié)會風(fēng)濕免疫分會候任會長。主要研究方向：彌漫性結(jié)締組織病的發(fā)病機制及免疫治療。

R593.22

A

1672-6170(2015)05-0062-04

2015-07-17)