抗凝劑對血小板計數的影響

薛 可

抗凝劑對血小板計數的影響

薛 可

目的 觀察不同抗凝劑對血小板計數的影響。方法 使用乙二胺四乙酸二鉀(EDTA-K2)和檸檬酸鈉兩種抗凝劑采血真空管, 并隨機采集148例患者的血常規標本, 然后運用SYSMEX-1800i血細胞分析儀進行檢測。另外, 對血液標本進行涂片, 在顯微鏡下觀察血小板的凝集狀況, 計數血小板數量。結果 乙二胺四乙酸二鉀和檸檬酸鈉抗凝樣本顯微鏡檢測血小板聚集的情況之間存在差異, 采集依賴性假性血小板減少癥患者血液之后立刻進行檢測, 結果顯示差異具有統計學意義(P＜0.05)；2 h和4 h后儀器法檢測結果差異具有統計學意義(P＜0.05)。結論 乙二胺四乙酸二鉀有可能會造成血小板假性減少,使用檸檬酸鈉抗凝在一定程度上可以減少乙二胺四乙酸二鉀對血小板計數的影響, 另外, 時間等其他因素也會導致血小板假性較少。

血小板；乙二胺四乙酸二鉀；檸檬酸鈉；血小板凝集

在人體內, 血小板在止血和血栓形成過程中起著比較重要的作用, 并且, 還參與到了動脈粥樣硬化和炎性反應的過程中, 因此, 血小板計數在診斷和治療血栓和出血性疾病中有著非常重要的意義［1］。據臨床分析, 血小板聚集會造成血小板數量假性大量減少, 從而導致假性血小板減少。由于假性血小板的發生率比較低, 容易導致臨床上出現漏診的情況,假如在診斷疾病時沒有及時發現血小板減少的現象, 則容易發生誤診［2］。本次研究主要探究不同的抗凝劑對血小板計數的影響, 為臨床診斷提供可靠的理論依據。

1 資料與方法

1.1 一般資料 本次研究選取2011～2013年在本院接受治療的148例患者, 其中男72例, 女76例。

1.2 儀器與試劑 使用SYSMEX-1800i血細胞分析儀, EDTA-K2和檸檬酸鈉真空抗凝管。SYSMEX-1800i全套試劑,校準品以及質控品。

1.3 方法 在測定過程中每天使用質控品作質控, 每隔6個月對儀器進行一次校準。根據儀器操作規程嚴格進行操作,使用血細胞分析儀檢測血標本, 并且同時制備血涂片, 觀察形態和血小板聚集的狀況, 進行血小板計數。

1.4 統計學方法 應用SPSS19.0統計學軟件對數據進行統計分析。計量資料以均數±標準差( -x±s)表示, 采用t檢驗；計數資料采用χ2檢驗。P＜0.05為差異具有統計學意義。

2 結果

直接涂片顯示：EDTA-K2和檸檬酸鈉抗凝血涂片顯微鏡觀察發現存在血小板聚集的現象, 見表1。SYSMEX-1800i血細胞分析儀計數結果顯示, 對患者進行采血之后立刻對EDTA-K2進行檢查, 抗凝血小板計數平均值顯著低于檸檬酸鈉抗凝劑, 而且2 h后、4 h后儀器法檢測結果顯示差異有統計學意義(P＜0.05), 見表2。經過t檢驗和χ2分析顯示, EDTA-K2組差異有統計學意義(F=60.42, P＜0.05)；檸檬酸鈉組差異有統計學意義(F=98.04, P＜0.05)；兩組之間不同時間, t值分別為6.374、6.482、4.191, 差異具有統計學意義(P＜0.05)。

表1 兩種抗凝管不同時間對血小板聚集的影響(n)

表2 兩種抗凝管不同時間對血小板計數的影響( x-±s, ×109/L)

3 討論

乙二胺四乙酸(EDTA)鹽不會對紅細胞、白細胞形態產生較大的影響, 因此, 國際血液標準化委員會建議將EDTA-K2當作血細胞計數的抗凝劑, 并且被廣泛應用于世界各地。但是, EDTA-K2容易導致血小板中的某些成分發生變化, 從而造成血小板聚集、堆積的現象, 最后導致血細胞計數儀無法正確地識別血小板, 造成血小板假性減少［3］。

目前, 關于EDTA-K2導致血小板假性減少的報導雖然比較多, 但是對于發生的機制目前還尚未有統一的定論。有學者認為發生的原因是, 在作為免疫介導的血液中, 出現的冷抗血小板自身抗體, 這種EDTA依賴的冷抗血小板自身抗體可以和單核細胞或者是淋巴細胞膜上Fc受體, 出現衛星現象。抗凝劑的問題就是EDTA造成血小板減少的關鍵問題,臨床上有學者認為, 可以改用檸檬酸鈉抗凝樣本從而獲取準確地血小板計數, 排除血小板聚集的影響可以得到更加準確的血小板計數, 本次研究主要圍繞著觀察和比較兩種抗凝劑對血小板計數的影響, 找到更可靠的抗凝方法, 從而實現血小板計數更加精準地目的, 為臨床診治工作提供可靠的理論依據［4］。

分析本次研究結果發現, 兩種抗凝劑對血小板的凝集造成較大的差異, EDTA-K2對血小板計數的影響效果比檸檬酸鈉更大, 同時, 還證實了標本靜置的時間也會對血小板假性減少產生影響, 2 h內EDTA-K2對血小板假性減少的影響效果比檸檬酸鈉更加明顯, 并且隨著時間的不斷延長而減小,符合劉鐵牛等［5］提出的血小板假性減少和標本靜置時間、實際、抗凝劑、溶血、溶血素、血小板大小以及形態等有關系。但是, 由于血小板計數還受到采血時間、方式以及采血之后是否搖勻等因素的影響, 因此, 在日常工作中, 還應該對血細胞分析儀檢測血小板結果減低的病例經過涂片鏡下觀察、顯微鏡下手工計數等方式來盡量減少血小板計數假性減少錯誤的發生。另外, 還需要醫生在實際檢測的過程中提高自身的業務能力, 還要多和臨床聯系, 盡量減少誤差。

［1］ 李寶琴, 張永珍, 張麗, 等.抗凝劑致血小板計數偏差的原因探討.河北醫藥, 2013, 2(20):29-30.

［2］ 杜維東, 耿曉茹.不加抗凝劑回輸腹腔內出血323例報告.中國社區醫師(醫學專業半月刊), 2012, 7(4):74-75.

［3］ 姜學慧, 王英芳.比較兩種抗凝劑對血小板測定結果的影響與分析.中國醫學創新, 2012, 14(35):85-86.

［4］ 馮永青, 翟春璽.不同時間、溫度、抗凝劑對血漿凝血酶原時間測定結果的影響.陜西醫學檢驗, 2014, 2(1):214-215.

［5］ 劉鐵牛, 周萍.乙二胺四乙酸二鉀抗凝劑致血小板依賴性凝集79例分析.華南國防醫學雜志, 2012, 11(3):96-97.

10.14163/j.cnki.11-5547/r.2015.16.085

2014-12-29］

450000 鄭州大學附屬鄭州中心醫院檢驗科