外周血基質(zhì)金屬蛋白酶－9（MMP－9）和血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子檢測(cè)在子宮肌瘤早期診斷中的應(yīng)用研究

劉文博，陳玲玲，曹麗娟

（承德市中心醫(yī)院婦產(chǎn)科，河北承德067000）

外周血基質(zhì)金屬蛋白酶－9（MMP－9）和血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子檢測(cè)在子宮肌瘤早期診斷中的應(yīng)用研究

劉文博，陳玲玲，曹麗娟＊

（承德市中心醫(yī)院婦產(chǎn)科，河北承德067000）

子宮肌瘤屬于良性腫瘤，在女性生殖器中極其常見，可導(dǎo)致月經(jīng)過多等異常出血。據(jù)調(diào)查，在子宮肌瘤患者中有40%會(huì)伴隨異常子宮出血現(xiàn)象。當(dāng)前臨床認(rèn)為子宮異常出血關(guān)聯(lián)于子宮內(nèi)膜微環(huán)境出現(xiàn)改變，進(jìn)而導(dǎo)致月經(jīng)紊亂?？刂圃陆?jīng)需保證凝血與血管收縮功能的正常發(fā)揮，同時(shí)還與月經(jīng)后子宮內(nèi)膜重建時(shí)的血管形成有關(guān)。VEGF屬于強(qiáng)效調(diào)節(jié)因子，可促進(jìn)血管形成；而基質(zhì)金屬蛋白酶（MMP－9）密切關(guān)聯(lián)于子宮腫瘤的生長(zhǎng)與發(fā)展。本文為探討MMP－9與VEGF診斷子宮肌瘤的臨床價(jià)值，現(xiàn)回顧性分析40例患者的臨床資料，報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取我院2013年5月至2014年5月收治的子宮肌瘤患者40例作為研究對(duì)象，設(shè)為觀察組，年齡在39至54歲，平均（46.3±3.1）歲?；颊呔憩F(xiàn)出經(jīng)期延長(zhǎng)、經(jīng)量增加、下腹部疼痛、有硬塊等癥狀，而后經(jīng)超聲、病理檢查后確診。選取同期在我院體檢的健康婦女40例設(shè)為對(duì)照組，年齡為37至52歲，平均（43.7±3.5）歲，排除患有婦科疾病患者。使用B超對(duì)兩組子宮內(nèi)膜予以檢測(cè)，結(jié)合厚度、孕酮以及血清雌二醇分為分泌期與增生期。本組排除標(biāo)準(zhǔn)：高血壓、惡性腫瘤、糖尿病、心臟病、肝腎功能與血尿功能異常以及近期服用激素類藥物患者。

1.2 檢測(cè)方法［1］

主要采用免疫組織化學(xué)染色法對(duì)VEGF與MMP－9予以檢測(cè)，需使用VEGF、MMP－9、單克隆鼠抗與SP試劑盒，具體步驟如下：連續(xù)切片厚石蠟，為4μm，準(zhǔn)備3張，開展VEGF與MMP－9以及蘇木素－伊紅染色；按照常規(guī)法行脫蠟與水化處理，PBS沖洗，持續(xù)3次，5min／次；經(jīng)由微波爐開展抗原修復(fù)處理，行VEGF染色；在3張切片中均使用過氧化酶，并于室溫開展孵育，時(shí)間持續(xù)10min， PBS沖洗，持續(xù)3次，5min／次，再加入非免疫血清10%，同樣孵育10min，再將多余液體去掉，添加50 μl第一抗體，孵育60min后按照上述次數(shù)與步驟行PBS沖洗，而后再添加第二抗體，有生物素標(biāo)記，孵育10minPBS沖洗。最后行DBA顯色處理，蘇木素復(fù)染后給予脫水處理，使用中性樹膠予以封片。

1.3 觀察指標(biāo)

分別在增生期與分泌期兩個(gè)階段檢測(cè)兩組患者VEFG水平與MMP－9水平，進(jìn)行組間對(duì)比。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采取統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件SPSS19.0對(duì)匯總數(shù)據(jù)進(jìn)行分析和處理。計(jì)量資料采取（±s）表示，組間數(shù)據(jù)對(duì)比采取t檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料采取率（%）表示，組間率對(duì)比采取χ2檢驗(yàn)；對(duì)比以P＜0.05為有顯著性差異和統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組增生期與分泌期VEFG水平對(duì)比

見表1。

表1 兩組增生期與分泌期VEFG水平對(duì)比（±s，pg／ml）

表1 兩組增生期與分泌期VEFG水平對(duì)比（±s，pg／ml）

n 分泌期增生期觀察組40 214.27±30.53 195.37±26.41對(duì)照組40 128.12±25.23 51.49±9.25 t 6.877 17.027 P 0.0000.000

2.2 兩組增生期與分泌期MMP－9水平對(duì)比見表2。

表2 兩組增生期與分泌期MMP－9水平對(duì)比（±s，ng／mL）

表2 兩組增生期與分泌期MMP－9水平對(duì)比（±s，ng／mL）

n 分泌期增生期觀察組40 290.69±33.78 236.78±30.91對(duì)照組40 131.53±15.38 106.65±16.76 t 13.561 11.721 P 0.0000.000

3 討論

在中年婦女中子宮肌瘤發(fā)病率較高，臨床經(jīng)統(tǒng)計(jì)后發(fā)現(xiàn)約為25%。該病初期癥狀不明顯，隨著病情惡化會(huì)誘發(fā)盆腔疼痛與月經(jīng)不調(diào)等癥狀，若病情嚴(yán)重還會(huì)導(dǎo)致急性扭轉(zhuǎn)。臨床多認(rèn)為雌激素為子宮肌瘤發(fā)病的基本因素，該病發(fā)展離不開雌激素持續(xù)作用與肌瘤組織中雌激素受體的高表達(dá)。隨著臨床對(duì)子宮肌瘤研究的逐漸深入，發(fā)現(xiàn)肌瘤組織中VEFG與MMPS家族存在異常表達(dá)，且在促進(jìn)子宮肌瘤病情發(fā)展中發(fā)揮重要作用。

VEFG為肝素結(jié)合性雙價(jià)糖蛋白，其表達(dá)密切關(guān)聯(lián)于生長(zhǎng)因子、細(xì)胞因子、局部氧濃度以及激素等，且機(jī)體中諸多生長(zhǎng)因子與細(xì)胞因子在對(duì)VEFG表達(dá)進(jìn)行調(diào)節(jié)時(shí)會(huì)發(fā)揮其間接作用，加快血管與抗血管的生成［2］。人體子宮內(nèi)膜中會(huì)表達(dá)出VEFG，同時(shí)其變化具有周期性，在分泌晚期其表達(dá)強(qiáng)度會(huì)達(dá)到高峰。若在子宮肌瘤增生過長(zhǎng)子宮內(nèi)膜表達(dá)中出現(xiàn)VEFG減少現(xiàn)象，則會(huì)致使血管結(jié)構(gòu)出現(xiàn)不良現(xiàn)象，進(jìn)而誘發(fā)子宮異常出血。而子宮肌瘤患者在分泌期與增生期其VEFG會(huì)出現(xiàn)上升現(xiàn)象，致使微血管生成更多，導(dǎo)致異常子宮出血［3］。在本研究中，觀察組相較于對(duì)照組其分泌期（t＝6.877、P＝0.000）與增生期（t＝17.027、P＝0.000）的VEFG顯著高于對(duì)照組，對(duì)比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。

MMPS是蛋白水解酶家族，其中含有Ca2＋與Zn2＋，成員在17個(gè)以上［4，5］。依據(jù)作用底物的差別可分為四類，其中MMP－9為IV型膠原酶，作用在于對(duì)基底膜與其結(jié)締組織等ECM予以降解，主要是對(duì)存在于基底膜中的巢蛋白予以分解。在惡性或者正常腫瘤MMP－9均有所表達(dá)［6，7］。在VEFG于 MMP－9的共同作用下會(huì)形成新生血管，并對(duì)基底膜造成破壞，為腫瘤生長(zhǎng)、浸潤(rùn)以及轉(zhuǎn)移創(chuàng)造了優(yōu)良環(huán)境。在本研究中觀察組相較于對(duì)照組其分泌期（t＝13.561、P＝0.000）與增生期（t＝11.721、P＝0.000）的MMP－9顯著高于對(duì)照組，對(duì)比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。

綜上所述，在子宮肌瘤患者中若VEFG與MMPS水平存在異常則提示子宮肌瘤發(fā)生或者在逐漸惡化，故而可將其作為判斷標(biāo)準(zhǔn)，以盡早診斷子宮肌瘤［8］。

［1］王志偉.FGFR－2和MMP－9在膀胱移行細(xì)胞癌中的表達(dá)及臨床意義［D］.天津醫(yī)科大學(xué)，2013.

［2］申麗媛.WAVE1、MMP－2及MMP－9在上皮性卵巢癌中的表達(dá)及其臨床意義［D］.重慶醫(yī)科大學(xué)，2013.

［3］周少飛.乳頭狀甲狀腺癌患者外周血中MMP－2、MMP－9、TIMP－1、TIMP－2的研究［D］.山東大學(xué)，2013.

［4］李慧敏，李一雷，宋雪霏.人子宮頸癌組織中MMP－26、MMP－9和TIMP－4的表達(dá)及其意義［J］.吉林大學(xué)學(xué)報(bào)（醫(yī)學(xué)版），2010，02（14）：354，433.

［5］蘇書娟，邢魯奇，陳登庭，等.MMP－2、MMP－9在乳腺導(dǎo)管癌中表達(dá)及意義［J］.中國(guó)公共衛(wèi)生，2011，3（21）：268.

［6］Wormald PJ.The agger nasi cell：the key to understanding the anatomy of the frontal recess［J］.Otolaryngol Head Neck Surg，2011，129：497.

［7］Choi BI，Lee HJ，Han JK，et al.Detection of hypervascular nodular hepatocellur carcinomas：value of triphasic helical CT compared with iodized oil CT［J］.AJR，2010，157（2）：219.

［8］Khan MA，Combs CS，Brunt EM，et al.Positron emission tomography scanning in the evaluation of hepatocellular carcinoma［J］.Ann Nucl Med，2009，14（2）：121.

劉文博（1982－），女，副主治醫(yī)師，研究方向：婦科腫瘤。

2014－12－08）

1007－4287（2015）06－0983－02

＊通訊作者