Ezrin和E－cadherin在宮頸癌中的表達及其相關性探討

呂紅梅，魏雙梅

（1.黑龍江中醫藥大學佳木斯學院，黑龍江佳木斯154002；2.佳木斯市婦幼保健院）

Ezrin和E－cadherin在宮頸癌中的表達及其相關性探討

呂紅梅1，魏雙梅2

（1.黑龍江中醫藥大學佳木斯學院，黑龍江佳木斯154002；2.佳木斯市婦幼保健院）

目的 探討Ezrin和E－cadherin在宮頸癌中的表達情況及其相關性。方法 隨機選擇的50例宮頸癌組織作為宮頸癌組（A組）、50例宮頸上皮內瘤變（CIN）組織作為CIN組（B組）以及50例正常宮頸組織作為對照組（C組），用免疫組織化學法（S－P法）進行Ezrin和E－cadherin的表達情況檢測。并將表達情況與臨床資料進行統計分析。結果 Ezrin和E－cadherin在A、B、C三組中的陽性表達率分別為74.0%、36.0%、18.0%和32.0%、64.0%、90.0%，組間比較具有統計學差異（P＜0.05）；Erzin和E－cadherin在宮頸癌組織中的陽性表達與組織分化程度和淋巴結轉移具有顯著相關性（P＜0.05）；Erzin和E－cadherin在宮頸癌中的表達呈負相關（r＝－0.393，P＜0.05）。結論 Ezrin及E－cadherin的異常表達共同促進了腫瘤細胞的浸潤及轉移，可以作為初步預測宮頸癌預后的指標。

宮頸癌；Ezrin；E－cadherin；免疫組織化學法

（Chin J Lab Diagn，2015，19：0937）

腫瘤的發生、發展是一個錯綜復雜的過程，其中腫瘤細胞對人體的侵襲及轉移則是導致病情惡化的主要原因［1］。埃茲蛋白（Ezrin）作為一種膜－細胞骨架連接蛋白，可以同上皮鈣粘蛋白（E－cadherin）相互作用，參與腫瘤的侵襲及轉移［2］。本次研究探討Ezrin和E－cadherin在宮頸癌中的表達情況，以及二者與臨床病理各參數之間的規律。現將研究結果報道如下。

1 材料與方法

1.1 一般資料 隨機選取2013年1月至12月，佳木斯婦幼保健院收治的，經病理檢查確診為宮頸癌的患者50例作為A組，年齡范圍26－62歲，平均年齡（52.3±5.7）歲，其中≥45歲者34例，＜45歲者16例，鱗狀細胞癌40例，腺癌10例；高、中分化者31例，低分化者19例；伴有淋巴結轉移者24例，無淋巴結轉移者26例；Ⅰ－Ⅱa期22例，Ⅱb－Ⅳ期28例，分期標準采用2009年國際婦產科聯盟（FIGO）制定的宮頸癌臨床分期標準。另選同時段宮頸上皮內瘤變（CIN）患者50例作為B組，年齡范圍24－60歲，平均年齡（54.1±4.4）歲，因非腫瘤原因行子宮切除術的患者50例作為C組，年齡范圍25－64歲，平均年齡（53.8±5.2）歲。三組患者在一般臨床資料上不存在顯著差異（P＞0.05）。A組患者均為首次診斷有且只有宮頸癌，之前未接受過其它任何方式的治療。

1.2 研究方法 將采集到的標本切成厚3μm的切片，每例標本3張。采用免疫組織化學法（S－P法）對宮頸癌組織、CIN組織和正常宮頸組織中Ezrin和E－cadherin的表達情況進行檢測。一抗采用兔抗人的Ezrin單克隆抗體和鼠抗人的E－cadherin單克隆抗體，C組切片采用磷酸鹽緩沖液（PBS）代替一抗。SP試劑盒和DAB顯色液均購自江蘇安惠生物科技有限公司。所有操作均嚴格按照說明書上進行。

1.3 染色結果判定 Ezrin和E－cadherin蛋白主要在細胞質內表達，少數在細胞膜上表達，以細胞質或細胞膜上出現棕黃色顆粒為陽性表達。判斷標準為：每張切片隨機選擇4個互不重疊的400倍視野，每個視野計數100個細胞中染色細胞數目，每例標本計算3張切片共12個視野的平均染色細胞數：按染色細胞百分率分：陽性細胞數≤10%為0分；10%－25%為1分；25%－50%為2分；＞50%為3分。再按照陽性細胞染色強度，0分：為染色；1分：淡黃色；2分：棕黃色或黃褐色。將每個標本的切片上述兩項評分相乘，結果分為4個等級［3］：陰性（－）：0分；弱陽性（＋）：1－2分；中等陽性（＋＋）：3－4分；強陽性（＋＋＋）：5－6分。陽性率＝陽性標本數／該組標本總數×100%。

1.4 統計學方法 采用SPSS 21.0軟件對所有實驗所得數據進行處理，對計數資料用χ2檢驗，對計量資料用t檢驗，組間比較采用F檢驗，相關性分析采用Spearman相關性檢驗，P＜0.05有顯著差異。

2 結果

2.1 Ezrin和E－cadherin在各組中的表達情況Ezrin在A、B、C三組中的陽性表達率分別為74.0%（37／50）、36.0%（18／50）和18.0%（9／50），組間比較具有統計學差異（P＜0.05），而E－cadherin在A、B、C三組中的陽性表達率分別為32.0%（16／50）、64.0%（32／50）和90.0%（45／50），組間比較具有統計學差異（P＜0.05）。見表1。

表1 Ezrin和E－cadherin在各組中的表達情況（n）

表2 Erzin和E－cadherin的表達與臨床資料的關系

2.2 Erzin和E－cadherin的表達與臨床資料的關系Erzin蛋白和E－cadherin蛋白在宮頸癌組織中的陽性表達與組織分化程度，以及是否有淋巴結的遠處轉移具有顯著相關性（P＜0.05），而與年齡、組織學類型和臨床分期不存在顯著相關性（P＞0.05）。見表2。

2.3 Erzin和E－cadherin在宮頸癌組織中表達的相關性 利用Spearman相關性檢驗對Erzin和E－cadherin在宮頸癌組織中表達的相關性進行檢驗，結果發現兩者在宮頸癌中的表達呈負相關（r＝－0.393，P＜0.05）。

3 討論

Ezrin蛋白在細胞中起到連接細胞膜和微絲、微管和中間纖維的作用［4］。Auvinen在研究中發現，Erzin蛋白只有在活性狀態下，才能發揮其生物學功能——即連接功能［5］。當某些內、外源性信號使其C端的一個保守的蘇氨酸殘基磷酸化后，便可通過肌動蛋白與細胞膜相連，而與細胞膜結合在一起的N端則與細胞表面膜蛋白連接在一起，共同調節細胞與基質、細胞與細胞分子之間的黏附性，影響惡性腫瘤細胞侵襲性的生物學行為［6］。E－cadherin蛋白是Cadherin蛋白家族中的一員，是一種跨膜糖蛋白。陸洪軍在研究中發現，E－cadherin蛋白可以將同種細胞相互連接起來，起到一個粘附作用［7］。當E－cadherin表達減少，這種作用就會減弱，當其發生在腫瘤組織中時，會導致腫瘤細胞發生遠處轉移更加容易。Daniele等發現，在高侵襲性腫瘤細胞中E－cadherin出現表達的減弱或消失［8］。由E－cadherin介導的同種細胞間的黏附功能的異常可由它自身功能的異常引起，也可由與它相連的Ezrin蛋白引起。

本次研究結果顯示：Ezrin在三組間的陽性表達率分別為74.0%、36.0%和18.0%，組間比較具有統計學差異（P＜0.05），E－cadherin在三組間的陽性表達率分別為32.0%、64.0%和90.0%，組間比較具有統計學差異（P＜0.05）。二者表達的異常貫穿于整個宮頸疾病發生發展的過程。在對兩種蛋白的陽性表達與臨床資料的相關性的分析中發現，兩種蛋白均與組織分化程度和是否存在淋巴結遠處轉移有顯著的相關性（P＜0.05）。腫瘤組織分化程度越高，Ezrin陽性率越低，E－cadherin陽性率越高，而當腫瘤出現淋巴結遠處轉移時，Ezrin的陽性表達顯著升高，而E－cadherin的陽性表達卻顯著降低，這與El Hamdani的研究結果一致［9］。經Spearman等級相關分析證實，二者的表達呈負相關（r＝－0.393，P＜0.05），充分提示激活后的Ezrin蛋白可以使E－cadherin蛋白從細胞膜轉移到細胞內，造成胞內蓄積，導致同種細胞間黏附能力下降，共同促進腫瘤細胞的侵潤及轉移，促進宮頸癌的發生及發展［10］。提示Ezrin及E－cadherin在腫瘤細胞侵襲發展中具有著一定的作用，二者的異常表達可能提示著患者的預后不良。

綜上，Ezrin及E－cadherin的異常表達共同促進了腫瘤細胞的浸潤及轉移，可以作為初步預測宮頸癌預后的指標。

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［9］El Hamdani W，Amrani M，Attaleb M，et al.EGFR，p16INK4a and E－cadherin immuno－histochemistry and EGFR point mutations analyses in invasive cervical cancer specimens from Moroccan women.［J］.Cellular and Molecular Biology，2010，5（6）：402.

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To investigate the expression and correlation of Ezrin and E－cadherin in cervical cancer

LüHong－mei1，WEI Shuangmei2.（1.Heilongjiang University of Chinese Medicine Jiamusi College，Jiamusi 154002，China；2.Jiamusi Maternal and Child Health Hospital Jiamusi）

Objective To investigate Ezrin and E－cadherin expression in cervical carcinoma and their correlation.Methods 50patients of cervical carcinoma were randomly selected as cervical carcinoma group（A group），50patients of cervical intraepithelial neoplasia（CIN）were selected as CIN group（B group）and 50patients of normal cervical tissues were selected as control group（group C）.Using immunohistochemical method（S－P method）to test the Ezrin and E－cadherin’s expression and the expression with the clinical data for statistical analysis.Results The positive expression of Ezrin and E－cadherin in A，B，C groups were respectively 74%，36%，18%and 32%，64%，90%，comparison between groups with statistical difference（P＜0.05）；Erzin and E－cadherin expression in cervical cancer tissues and tissue differentiation and lymph node metastasis was significantly associated with（P＜0.05）；negatively correlated with expression of Erzin and E－cadherin in cervical cancer（R＝0.393，P＜0.05）.Conclusion The abnormal expression of Ezrin and E－cadherin can promote the invasion and metastasis of tumor cells，can be used as a preliminary prediction index of prognosis of cervical cancer.

Cervical cancer；Ezrin；E－cadherin；Immunohistochemical method

R737.33

A

呂紅梅（1974－），女，主治醫師，醫學碩士，主要研究方向：腫瘤病理。

2014－08－09）

1007－4287（2015）06－0937－03