晚期乳腺癌患者Survivin的表達(dá)情況及與放療敏感性的關(guān)系

艾秀清，張銀華，司馬義力·買買提尼亞孜，木妮熱·木沙江

（新疆醫(yī)科大學(xué)附屬腫瘤醫(yī)院乳腺放療科，新疆烏魯木齊830011）

晚期乳腺癌患者Survivin的表達(dá)情況及與放療敏感性的關(guān)系

艾秀清，張銀華，司馬義力·買買提尼亞孜，木妮熱·木沙江＊

（新疆醫(yī)科大學(xué)附屬腫瘤醫(yī)院乳腺放療科，新疆烏魯木齊830011）

目的 對晚期乳腺癌患者Survivin的表達(dá)情況及對放療敏感性的分析。方法 選取首診并確診為晚期乳腺癌（局部T4期）并喪失手術(shù)治療機會的30例女性患者作為研究對象。對入組患者行TAC方案全身化療及放療，根據(jù)放療敏感性進(jìn)行分組，分為放療敏感組和放療不敏感組，比較2組放療前后Survivin表達(dá)情況。結(jié)果 ①Survivin蛋白在晚期乳腺癌患者放療敏感組和放療不敏感組組的高表達(dá)率分別為40%（8／20）和80.0%（8／10），兩組差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。②放療敏感組中Survivin表達(dá)平均值為（29.10±14.68），顯著低于放療不敏感組（46.71±15.54）（P＜0.05）。③放療敏感組和放療不敏感組組的凋亡指數(shù)分別是（15.39±3.15）和（8.17±1.96），兩組間差異顯著（P＜0.05）。Survivin高表達(dá)組和Survivin低表達(dá)組的凋亡指數(shù)分別是（10.23±2.33）、（14.78± 1.69），兩組間差異顯著（P＜0.05）。④放療后，放療敏感組Survivin表達(dá)為（20.33±7.89），與放療前相比，差異顯著（P＜0.05）。放療不敏感組為（42.48±13.87），與放療前相比，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。結(jié)論 Survivin表達(dá)水平與放療敏感性之間存在密切關(guān)系，可以作為預(yù)測乳腺癌放療敏感性、療效評價及預(yù)后的指標(biāo)。

乳腺癌；Survivin；乳腺癌放療；敏感性；療效

（Chin J Lab Diagn，2015，19：0912）

乳腺癌是女性最常見的惡性腫瘤之一。生存素（Survivin）是新近發(fā)現(xiàn)的最強的凋亡抑制基因［1］，具有抑制細(xì)胞凋亡和調(diào)節(jié)細(xì)胞分裂的雙功能蛋白［2］。放射治療主要是通過直接物理作用（DNA雙鏈斷裂）和誘導(dǎo)細(xì)胞內(nèi)相關(guān)基因表達(dá)介導(dǎo)凋亡來促使腫瘤細(xì)胞死亡。腫瘤細(xì)胞對凋亡的敏感性和對輻射的敏感性是一致的。本研究擬對放療前后癌組織中Survivin在表達(dá)情況進(jìn)行分析，對Survivin表達(dá)與放療敏感性的關(guān)系進(jìn)行探討，為使用Survivin預(yù)測乳腺癌放療敏感性及判斷療效評價、預(yù)后提供理論依據(jù)，現(xiàn)將結(jié)果報道如下。

1 對象與方法

1.1 一般資料

選取2013年4月至2014年4月期間就診于我院，首診并確診為晚期乳腺癌（局部T4期）并喪失手術(shù)治療機會的30例女性患者作為研究對象，患者年齡35－67歲，平均（53.6±6.3）歲。

納入標(biāo)準(zhǔn)：①局部T4期，首診已喪失手術(shù)治療機會的晚期女性乳腺癌患者；②所有入組患者均行病理學(xué)診斷，首次病理確診為乳腺浸潤性導(dǎo)管癌并有實體腫瘤存在；③入組前未行任何乳腺腫瘤的治療；④全身情況好可耐受放化療且放化療后臨床評估可行局部姑息手術(shù)治療；⑤中途放棄治療者退出；⑥所有患者臨床資料和隨訪記錄完整。

根據(jù)放療敏感性對患者進(jìn)行分組，分為放療敏感組和放療不敏感組。對完全緩解（CR）和部分緩解（PR）評價為放療敏感；對穩(wěn)定（NC）和進(jìn)展（PD）評價為放療不敏感。CR 14例，PR 6例，NC 9例，PD 1例。即放療敏感20例，放療不敏感10例。

兩組患者在年齡、病程等方面比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義，具有可比性。

1.2 治療方法及觀察指標(biāo)

對入組患者行TAC方案全身化療，療程為6個周期。化療結(jié)束行乳腺局部行放療，放療使用美國瓦里安clinac23EX高能電子直線加速器進(jìn)行晚期乳腺癌患者三維調(diào)強放射治療。

患者放療結(jié)束后一個月使用近期療效評價標(biāo)準(zhǔn)對放療療效進(jìn)行評價。可以通過臨床查體實體、B超、MRI結(jié)合評價。療效評估后可行姑息性手術(shù)治療。

采用鏈酶菌抗生物素蛋白過氧化物酶（SP）法，對放療前后癌組織Survivin的表達(dá)進(jìn)行檢測。一抗：鼠抗人Survivin單克隆抗體工作液，二抗及相應(yīng)SP染色試劑盒購自北京中山生物技術(shù)公司。Survivin以細(xì)胞核和（或）細(xì)胞質(zhì)出現(xiàn)棕黃顆粒為陽性細(xì)胞。由病理科專家在未知患者資料的情況下進(jìn)行結(jié)果讀取，選擇5個高倍視野（×400），每個視野計數(shù)100個細(xì)胞。Survivin陽性結(jié)果判定參照Lgaws等方法：胞質(zhì)或胞核呈黃色至棕黃色者為陽性表達(dá)細(xì)胞。將陽性細(xì)胞數(shù)按其數(shù)量及顯色強度分為3級：表達(dá)弱陽性（＋），即陽性細(xì)胞數(shù)＜10%，表達(dá)強陽性（＋＋＋），即陽性細(xì)胞數(shù)＞60%，多數(shù)細(xì)胞呈黃色至棕黃色；表達(dá)中度陽性（＋＋），即陽性細(xì)胞數(shù)在10%－60%。

1.3 統(tǒng)計學(xué)處理

使用SPSS17.0統(tǒng)計學(xué)軟件包，計數(shù)資料的比較采用χ2檢驗，計量資料的比較采用t檢驗，以P＜0.05具有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 Survivin蛋白在晚期乳腺癌患者中的表達(dá)情況

30例病例標(biāo)本中，高表達(dá)率為53.3%，Survivin蛋白在晚期乳腺癌患者放療敏感組和放療不敏感組的高表達(dá)率分別為40.0%（8／20）和80.0%（8／10），兩組比較有統(tǒng)計學(xué)差異（χ2＝4.28，P＜0.05）。提示Survivin蛋白在放療不敏感組中的表達(dá)水平要顯著高于放療敏感組，這說明Survivin蛋白表達(dá)與晚期乳腺癌的放療敏感性呈顯著負(fù)相關(guān)，即Survivin蛋白低表達(dá)的晚期乳腺癌患者對放射治療更加敏感。（見表1）

表1 Survivin蛋白在晚期乳腺癌患者中的表達(dá)情況

2.2 晚期乳腺癌患者的Survivin表達(dá)情況及細(xì)胞凋亡指數(shù)

放療敏感組中Survivin表達(dá)與放療不敏感組兩組比較，差異有統(tǒng)計學(xué)差異（P＜0.05）。提示Survivin表達(dá)水平與晚期乳腺癌患者的放療敏感性呈顯著負(fù)相關(guān)，即Survivin低表達(dá)的晚期乳腺癌患者對放射治療更加敏感。（見表2）

隨機選取5個髙倍視野計數(shù)1000個腫瘤細(xì)胞中凋亡細(xì)胞所占百分比，計算凋亡指數(shù)（apoptotic index，AI）：AI（%）＝凋亡細(xì)胞數(shù)／觀察細(xì)胞總數(shù)× 100%。放療敏感組與放療不敏感組的凋亡指數(shù)之間比較，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。提示細(xì)胞凋亡與放療敏感性呈正相關(guān)。Survivin高表達(dá)組和Survivin低表達(dá)組的凋亡指數(shù)兩組之間比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）；提示Survivin表達(dá)與放療敏感性呈負(fù)相關(guān)。（見表2、表3）

表2 晚期乳腺癌患者的Survivin表達(dá)情況及細(xì)胞凋亡指數(shù)

表3 Survivin表達(dá)與細(xì)胞凋亡的關(guān)系

2.3 放療前后Survivin表達(dá)情況的變化

放療前或放療后2組患者Survivin表達(dá)之間均有顯著性差異（P＜0.05或0.001）。放療后2組患者Survivin表達(dá)均有所下調(diào)，放療敏感組與放療前相比差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）；放療不敏感組與放療前相比，差異未見統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。（表4）

表4 放療前后Survivin表達(dá)情況的變化

3 討論

細(xì)胞凋亡受一系列凋亡促進(jìn)因子和凋亡抑制因子的共同調(diào)節(jié)［3］。現(xiàn)有研究表明腫瘤的發(fā)生、發(fā)展和消退不僅是細(xì)胞增殖失控、分化異常的結(jié)果，而且與細(xì)胞凋亡失衡有關(guān)。細(xì)胞過度增殖和（或）凋亡抑制，進(jìn)而造成細(xì)胞無限生長，從而形成腫瘤。腫瘤組織在無外界因素如輻射、藥物等干預(yù)時，也會發(fā)生細(xì)胞凋亡，被稱為自發(fā)性細(xì)胞凋亡（spontaneous apoptosis）。大量的研究發(fā)現(xiàn)，細(xì)胞凋亡及放射誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡可能與腫瘤的放射敏感性有關(guān)，腫瘤細(xì)胞對凋亡的敏感性和對輻射的敏感性是一致的。如果能從凋亡相關(guān)基因中找到與放射敏感性有關(guān)的特異性指標(biāo)，通過誘導(dǎo)或抑制其表達(dá)來提高患者對放射治療的敏感性，進(jìn)而提高腫瘤治療的效率［4］。

生存素（Survivin）是新近發(fā)現(xiàn)的最強的凋亡抑制基因，幾乎在所有的癌組織中均有表達(dá)［5］。不僅與腫瘤的發(fā)生、發(fā)展有關(guān)，而且其表達(dá)往往與腫瘤的惡性程度、預(yù)后不良呈正向關(guān)系，是一個潛在價值的腫瘤標(biāo)志，是預(yù)測腫瘤預(yù)后及評價臨床治療效果的重要指標(biāo)可作為腫瘤治療的新靶點［6，7］。Survivin基因具有調(diào)節(jié)細(xì)胞凋亡和細(xì)胞周期的雙重作用，大量研究揭示了它與腫瘤細(xì)胞凋亡、細(xì)胞周期調(diào)控和放射敏感性之間的密切關(guān)系［8，9］。

有學(xué)者［10］報道隨著Survivin表達(dá)強度增強，放療療效不斷下降，且Survivin與放射敏感性存在負(fù)向線性相關(guān)；研究認(rèn)為Survivin表達(dá)水平可預(yù)測腫瘤患者對放療的敏感性。這與以往［11，12］研究結(jié)果一致。本研究發(fā)現(xiàn)，Survivin蛋白在放療不敏感組中的表達(dá)水平要顯著高于放療敏感組，這說明Survivin蛋白表達(dá)與晚期乳腺癌的放療敏感性呈顯著負(fù)相關(guān)，即Survivin蛋白低表達(dá)的晚期乳腺癌患者對放射治療更加敏感。研究對放療敏感與凋亡指數(shù)的關(guān)系進(jìn)行分析發(fā)現(xiàn)，細(xì)胞凋亡與放療敏感性呈正相關(guān)，Survivin表達(dá)與放療敏感性呈負(fù)相關(guān)。對放療前后Survivin表達(dá)情況進(jìn)行分析發(fā)現(xiàn)，放療后Survivin表達(dá)有所下調(diào)，以敏感組最為顯著。提示Survivin可能參與了癌癥的發(fā)生與發(fā)展；放療后其表達(dá)下調(diào)，這與放療后腫瘤細(xì)胞增殖受到抑制及促進(jìn)腫瘤細(xì)胞凋亡有關(guān)，提示放療能有效地逆轉(zhuǎn)癌組織局部腫瘤細(xì)胞Survivin的表達(dá)，Survivin的表達(dá)可以作為觀察放療療效的客觀指標(biāo)［13，14］。

綜上所述，Survivin表達(dá)水平與放療敏感性之間存在密切關(guān)系。研究Survivin在晚期乳腺癌首次確診病理癌組織中及放療前后癌組織中的表達(dá)水平，同時與患者放射治療后的近期臨床療效評價相結(jié)合，可使Survivin作為預(yù)測乳腺癌放療敏感性、療效評價及預(yù)后的指標(biāo)。

［1］Nagata Y，Araki N，Kimura H，et al.Neoadjuvant chemotherapy by transcatheter Arterial infusion method for uterine cervical cancer［J］.J Vascerv Radiol，2000，11（3）：313.

［2］Kobierski J，Mielcarek P，Brzoska B，et al.Neoadjuvant chemotherapy in the treatment of advanced cervical cancer［J］.Ginekol Pol，2002，73（9）：807.

［3］古力娜.庫爾班，鐘 薇.細(xì)胞凋亡、Fas、Cox－2在宮頸癌放療敏感性中的研究進(jìn)展［J］.新疆醫(yī)科大學(xué)學(xué)報，2008，31（6）：648.

［4］Sardi JE，Boixadera MA，Sardi JJ，et al.Neoadjuvant chemotherapy in cervical cancer［J］.a new trend Curr Obstct Gynecol，2005，17（1）：43.

［5］Xiang Yan－qun，Yao He－rui，Wang Shu－sen，et al.Prognostic value of Survivin and Livin in nasopharyngeal carcinoma［J］.Laryngoscope，2006，116（1）：126.

［6］郝 輝，李 娟，李亞輝，等.Survivin和Caspase－3蛋白表達(dá)與食管鱗癌放療療效的關(guān)系［J］.河北醫(yī)藥，2012，34（15）：2248.

［7］Li F，Ackmnann EJ，Bennett CF，et al.Heiotrspiceel divistim defects and apoptesis induced by interference with Survivin function［J］.Nat Cell，1999，1（8）：461.

［8］華 曄，陳德玉，戴春華，等.直腸腺癌放療前后survivin的表達(dá)及其與放療敏感性的關(guān)系［J］.山東醫(yī)藥，2011，51（1）：61.

［9］高碧燕，張 明，楊 毅，等.survivin與宮頸鱗癌新輔助化療和放療敏感性的相關(guān)性研究［J］.實用癌癥雜志，2010，25（5）：133.

［10］魏曉麗，張玉，劉敏麗，等.乳腺癌組織中Survivin、Ki67的表達(dá)變化及意義［J］.山東醫(yī)藥，2013，53（3）：12.

［11］王大勇.乳腺癌患者手術(shù)治療前后Survivin的表達(dá)及臨床意義［J］.河北醫(yī)藥，2013，（18）：2749.

［12］魏楊輝，張宗明，楊莉濤，等.survivin、galectin－3、Ki－67在乳腺癌組織中的表達(dá)及其意義［J］.山東醫(yī)藥，2013，53（36）：14.

［13］王蘊眾.Survivin和Cox－2在乳腺浸潤性導(dǎo)管癌組織中的表達(dá)及臨床意義［J］.現(xiàn)代腫瘤醫(yī)學(xué)，2013，21（11）：2448.

［14］宮惠琳，張鎖平，張冠軍，等.Survivin、MMP－2在乳腺癌中的表達(dá)及其相關(guān)性研究［J］.重慶醫(yī)科大學(xué)學(xué)報，2012，37（2）：106.

Expression of Survivin in advanced breast cancer patients and the analysis of its radiation sensitivity

AI Xiu－qing，ZHANG Ying－h(huán)ua，Simayili Maiaitiniyazi，et al.（Department of Radiation Oncology，Cancer Hosptial of Xinjiang Medical University，UrumQi 830011，China）

Objective To expression of Survivin in patients with advanced breast cancer and analysis its radiotherapy sensitivity.Methods 30female patients with advanced breast cancer（T4stage）who lost the chance of operation treatment were chosen for the study.all underwent TAC chemotherapy and radiotherapy，the patients were divided into non sensitive group and sensitive group according to the sensitivity to radiotherapy，comparing with the expression of Survivin in 2groups before and after radiotherapy.Results ①Survivin protein high expression rates were 40%in patients with advanced breast cancer radiotherapy group and radiotherapy is not sensitive group（8／20）and 80%（8／10），with significant difference between two groups（P＜0.05）.②The radiation sensitive groups in the Survivin expression of mRNA average value was（29.10±14.68），was significantly lower than the radiation resistant group（46.71±15.54）（P＜0.05）.③The radiation sensitive group and radiation insensitive group apoptosis index was（15.39±3.15）and（8.17±1.96），the difference between the two groups was significant（P＜0.05）.High expression of Survivin group and Survivin group of low expression of apoptosis index were（10.23±2.33），（14.78±1.69），the difference between the two groups was significant（P＜0.05）.④After radiotherapy，radiotherapy group Survivin expression was（20.33± 7.89），compared with before radiotherapy，significant difference（P＜0.05）.Not sensitive to radiotherapy group（42.48 ±13.87），compared with before treatment，no significant difference（P＞0.05）.Conclusion To study the relationship between Survivin expression and radiation sensitivity，can be used as a prediction of breast cancer radiotherapy sensitivity，curative effect evaluation and prognosis.

Survivin；breast cancer；radiotherapy；sensitivity；curative effect

R737.9

A

艾秀清（1975－），女，主治醫(yī)師，碩士，研究方向：乳腺腫瘤放射治療。

2014－06－15）

1007－4287（2015）06－0912－04

新疆醫(yī)科大學(xué)科研創(chuàng)新基金（XJC201380）課題名稱：Survivin在晚期乳腺癌組織中的表達(dá)與放療敏感性的相關(guān)性研究

＊通訊作者