雞馬立克氏病的診斷與防制

達雪娟

摘 要：雞馬立克氏病（MD）是雞的最嚴重的免疫抑制性疾病和傳染性腫瘤疾病，危害較為嚴重。本文對MD的診斷與防制進行了討論，分析了流行特點和發病原因，重點對雞馬立克氏病的發生、臨床癥狀及主要病理變化和實驗室診斷作了較詳細的描述。通過對發病原因和流行特點的討論與分析，對于預防和減輕下一個生產周期內疾病的再度發生及其造成的損失極為重要，同時也為養殖場制定長期而有效的綜合防制措施提供依據。

關鍵詞：馬立克氏病；診斷；防制

中圖分類號：S854.4 文獻標識碼：C 文章編號：1001-0769（2015）09-0055-04

雞馬立克氏病是臨床上常見的淋巴組織增生性疾病，以對外周神經、性腺、虹膜、各種內臟器官、肌肉和皮膚的單個或多個的組織器官發生單核細胞浸潤為特征。自1970年Marek報道的外周神經和脊神經根的單核細胞浸潤引起的公雞輕癱，是MD的最早記載。在1914年美國報道了該病的暴發，隨后，荷蘭、英國和其他許多國家也發現了本病。在上世紀六七十年代，對本病的研究取得了非凡的成果，其中最大的成果是成功地和有規律地進行了該病的人工傳播。但病原的強細胞結合性使病原的分離較困難，直到1967年，英國和美國幾乎同時各自獨立地在細胞培養上成功地增殖了病原，從而確定皰疹病毒為該病病原[1]。到目前為止，許多養殖場主要應用HVT在出殼24 h內接種疫苗，已取得了良好的預防效果。但也有一些養殖戶對本病的免疫接種沒有足夠重視，在臨床上有的養殖戶未能對雛雞免疫接種或未能及時免疫接種，從而導致臨床上仍有本病的存在[2]。在2014年社會實踐活動中，發現了武威市部分農戶飼養的蛋肉商品代雜雞，出現跛行、死亡及視力障礙等現象。通過走訪了2個村，80多個農戶，共觀察3 000羽雞，其中，發病的1 140羽，死亡420羽，在剖檢死亡雞只時，同時采集病料送往甘肅畜牧工程學院進一步進行了實驗室檢查，最終確定為雞馬立克氏病，現將其報道如下：

1 發病情況

本次走訪的2個村80多農戶，飼養的雞苗大部分來自于私人土法孵化的小雞，發病雞的年齡多在8周到14周齡之間，調查的雞群共計3 000羽，其中出現癥狀的1 140羽，死亡420羽，發病率為38 %，死亡率為14 %。

2 發病原因

雞馬立克氏病是由皰疹病毒引起的一種淋巴組織增生性疾病，此病的特點是病雞的外周神經、性腺、虹膜、各種臟器、肌肉和皮膚出現單核細胞浸潤，并伴隨麻痹和產生內臟腫瘤，它是一種淋巴瘤性質的腫瘤疾病，對養雞業的發展危害相當嚴重。自1970年從火雞身上分離出火雞皰疹病毒FC126號病毒株，用以制成疫苗以來，此病得到了較好的控制，對養雞業的損失大大降低[3]。但近幾年在許多地區又出現了較大規模的流行，現就其發病原因簡述如下：

2.1 疫苗質量

疫苗的質量在運輸和保存過程中出現問題。停電、意外暴曬、超溫保存等，或疫苗受到污染、失效、稀釋液達不到質量要求等。

2.2 疫苗劑量及免疫技術

疫苗的劑量不足或免疫技術的錯誤，疫苗的噬斑單位不足；疫苗稀釋后不立即使用或不現配現用，導致疫苗效價降低；稀釋倍數錯誤，造成注射劑量不足；免疫接種方法、途徑、部位不正確等。

2.3 早期感染及超強毒

早期感染及超強毒的存在環境消毒不徹底，有野毒和超強毒存在，使雛雞在免疫前感染（早期感染）。另外，皰疹病毒免疫后需2周時間才能達到免疫高峰，在這段時間也很容易受到MD野毒和超強毒的感染（免疫潛伏期內感染）。

2.4 母源抗體

母源抗體的影響親代雞群經皰疹病毒疫苗免疫后，其子代如再用同種疫苗免疫，就會受母源抗體影響，降低效價。

2.5 變異病毒的出現

由于病毒的變異，使得火雞皰疹病毒疫苗免疫失敗。

2.6 疫苗保護率

疫苗本身的保護率最高可達85 %～90 %，所以雞群免疫后，仍可能有少部分雞感染、發病，隨之排毒，如果不經常搞好衛生消毒，就會造成病毒的傳播。

2.7 某些微生物的影響

由于某些致病性微生物的早期感染，而影響了火雞皰疹病毒的免疫效果。

2.8 雞群免疫系統

也有人認為有些雞群免疫系統缺乏或功能不全[4]。

3 主要癥狀

一般病雞精神尚好，并有食欲。病情較重的雞采食減少，精神沉郁，日漸消瘦，被毛粗亂，個別雞站立不穩，有的雞下肢麻痹，遇刺激時兩腿前后伸展，呈“劈叉”姿勢。有的病雞一側或兩側的翅膀下垂，頭下垂或頭頸歪斜，嗉囊擴張，食物時不能后轉。但往往由于飲不到水而脫水，吃不到飼料而衰竭；有的病雞表現瞳孔縮小，嚴重時僅有針尖大小；虹膜邊緣不整齊，呈環狀或斑點狀，顏色由正常的桔紅色變為彌漫性的灰白色，呈“魚眼狀”。輕者表現對光線強度的反應遲鈍，重者對光線失去調節能力，最終失明或被其他雞只踐踏，最后均以死亡而告終。

4 病理變化

剖檢時，部分病雞的背部、頸部、翅膀等皮膚上常有大如蠶豆、小如麥粒的結節，除發現部分病死雞皮膚上有大小不一的腫瘤結節外，所有病死雞消瘦。生前有神經癥狀的雞剖檢時，發現坐骨神經、臂神經等均有不同程度的炎癥，導致其粗大（是原來的2～3倍），表面橫紋消失。有的病死雞肝臟、脾臟等器官上常有大如豆粒、小如米粒，邊緣不整齊灰白色的結節。切面呈脂肪樣但肝臟異常腫大，比正常大5～6倍，正常肝小葉結構消失，表面呈粗糙或顆粒性外觀。有的甚至整個卵巢被腫瘤組織代替，呈花菜樣腫大，腺胃外觀有的變長，有的變圓，胃壁明顯增厚或薄厚不均，切開后腺乳頭消失，黏膜出血、壞死。通過該病的發生及癥狀和剖檢觀察，初步診斷為雞馬立克氏病[5]。為進一步確診，采病雞羽毛（盡量多帶毛囊髓）12份，送往甘肅畜牧工程學院化驗室做瓊脂擴散沉淀反應。

5 診斷

5.1 臨診診斷

根據發病年齡主要發生于8周齡～14周齡的雞。臨床上有的表現為典型的“劈叉”姿勢，頭下垂及頭頸歪斜，有的一只眼虹膜正常色素消失，呈同心環狀或斑點狀的灰白色，腹瀉等癥狀，部檢時見到有的雞出現一側坐骨神經、臂神經等明顯增粗，呈淡黃色，在放大鏡下觀察，神經表面橫紋消失，有的病雞肝、脾、卵巢等器官出現腫瘤結節或彌漫性腫大，初步診斷為雞馬立克氏病，為進一步確診，無菌采取了病雞肝、脾、卵巢等器官，送甘肅畜牧工程學院化驗室進行確診。

5.2 實驗室診斷

5.2.1 細菌學檢查

取送檢肝、脾、卵巢等器官，進行了組織觸片，自然干燥后，用酒精燈火焰固定，利用革蘭氏染色法和美藍染色法兩種方法染色，顯微鏡檢查，其結果為細菌學檢查陰性（即沒有看到任何可疑細菌）[6]。同時將其接種于普通肉湯培養基、普通瓊脂平板培養基和鮮血瓊脂培養基上進行培養，37 ℃ 48 h，肉湯未發生變化（即無菌膜、菌環形成、清亮度未變、管底也無沉淀物形成）；普通瓊脂平板和鮮血瓊脂平板上無菌落形成。也就是細菌分離培養呈陰性。

5.2.2 血清學試驗

將送檢羽毛剪下含有羽髓的部分，加少量生理鹽水后充分擠壓，得到羽髓懸液用作被檢抗原（標準抗原和陽性血清由哈爾濱獸醫研究所制備）[7]。采用瓊脂凝膠沉淀實驗（AGP）對MD被檢抗原進行檢測，用含8 %NaCl、pH 7.2的PBS和1 %瓊脂糖制備凝膠板，然后按七孔法打孔（共做三組），反應板孔徑為5 mm，孔間距為3 mm，瓊脂凝膠板厚度為3 mm，中央孔加標準陽性血清，周圍孔1.4孔加標準抗原，其條孔各加1份被檢抗原，加樣時將孔加滿但不能溢出。加樣后將瓶倒置于37 ℃溫箱中待其反應，48 h后取出。結果標準抗原和8份待檢抗原與陽性血清孔之間出現明顯的灰白色沉淀線，說明8份被檢抗原中含有MD病毒，確診為雞馬立克氏病[8]。

6 防制措施

6.1 免疫接種

本病是由病毒引起的腫瘤性疾病，一旦發生沒有任何措施可以制止它的流行和蔓延，更沒有特效的治療藥物。因此防制該病的關鍵是做好切實的免疫。

目前雞馬立克氏病疫苗使用最普遍的是火雞皰疹病毒（HVT）苗，在雞1日齡時進行免疫接種。使用HVT苗應注意以下幾方的問題。

6.1.1 疫苗的質量必須合格

出廠的產品標簽或說明書明確標出每頭份疫苗所含的蝕斑單位。當大批量購買時，應抽樣送獸藥監察部門進行檢查，測定疫苗的蝕斑單位和疫苗的穩定性。指標不合格不使用。疫苗經銷單位進貨時也應抽樣送檢，對用戶負責。現在有的進口苗每頭份含蝕斑單位是l 000。國產苗和有的進口苗為適應雞現狀，提高了蝕斑量，每頭份含2 000蝕斑單位以上或更高。因為疫苗蝕斑量直接關系到免疫的質量。

6.1.2 HVT苗

HVT苗是凍干苗，出售疫苗時還配有專門的稀釋液應清亮透明，質量不合格的不能使用。凍干苗稀釋后應在l h內用完，否則疫苗的蝕斑量將明顯下降，降低了疫苗的保護作用，也是造成免疫失敗的原因之一。另外，疫苗稀釋好以后，應將其放在冰浴的條件下（即疫苗瓶放在裝有冰塊的容器里），以避免由于溫度高影響疫苗質量[9]。

6.1.3 雞接種疫苗后

雞接種疫苗后須經15 d以上才能起到對雞的保護作用，同時應該明確指出，HVT苗并不能阻止馬立克氏病強毒株的感染，因此接種疫苗的房間、運送雛雞的容器以及育雛舍必須作好徹底的消毒，最大限度地減少環境中的馬立克氏病病毒，只有這樣才能充分發揮疫苗的保護作用。因此環境中由于馬立克氏病病毒的存在，而發生雛雞的早期感染同樣是造成免疫失敗的原因之一。

除HVT苗之外還有二價和多價疫苗，這類疫苗的保護作用高于HVT苗，而且可以保護雞群免受馬立克氏病超強毒株的感染。防制效果很好，但這類疫苗屬于細胞結合性苗，保存和運輸時疫苗必須在液氮罐中放置，給現場應用帶來了較大的困難，也是目前應用不普遍的主要原因。此外，這種疫苗的保管必須認真負責。如實地填寫保管，使用記錄。如若因管理不當，液氮罐中液氮不足甚至干涸，疫苗失效，給生產帶來的后果非常嚴重的。

最后，為提高馬立克氏病的免疫效果，還須加強其它疫病的防治工作，減少對該病免疫的干擾，如雞傳染性法氏囊病、雞傳染性貧血、雞白痢沙門氏菌病等，特別是在馬立克氏病疫苗免疫保護作用尚未建立前，上述疫病的感染、發生同樣可導致本病的免疫失敗。

加強飼養管理，減少應激因素對雞群的影響，不斷提高獸醫衛生綜合防制水平也是防制雞馬立克氏病的重要措施，不容忽視。

6.2 加強檢疫

包括平時的觀察和血清學檢疫法，平時觀察包括飼養員和管理技術人員做好雞的精神狀態、營養狀況、生長發育及運動等方面的觀察，血清學檢疫對其隨機抽樣，采羽毛囊髓做瓊脂擴散沉淀反應，若發現陽性再用此法做普檢，將檢出的陽性雞和病雞全部淘汰，尸體銷毀處理。

6.3 定期消毒

消毒應從種蛋孵化著手，在嚴格選購種蛋的基礎上用2 %的福爾馬林溶液或0.1 %的新潔爾滅溶液或0.1 %的高錳酸鉀溶液，對蛋殼洗滌消毒，孵化室及孵化設備等用甲醛定期熏蒸消毒，有條件時用1 %的敵菲特對雞舍定期帶雞消毒，對環境用 1 %～2 %的氫氧化鈉或10 %生石灰水消毒[10]。

6.4 把好引種關

應從無本病的地區、雞場引進種蛋或雞苗。引進雞苗時，應向孵化場家提出對出殼24 h內小雞全部用馬立克氏疫苗免疫。

6.5 監督和檢查

當地主管部門應加強對雞場、農戶綜合性防疫制度及防疫措施執行監督和檢查。尤其要向農戶做好免疫接種的重要性和因果關系的宣傳。采取全進全出的飼養方法，對不同來源、不同日齡的雞分群飼養。

7 討論與分析

（1） 據史料記載，雞馬立克氏病從20世紀80年代已侵入該地區，對養禽業造成巨大損失。由于對該病的高度重視，采取有效的綜合性防制措施，曾很快控制了該病的發生與流行，并向凈化趨勢發展。

（2） 由于農戶對該病的防范意識差，對雞苗的選購只問價格不求質量，私人孵化盛行，種蛋及孵化設備消毒不嚴格，對出殼24 h內的幼雛不做該病的主動免疫或延誤對幼雛的主動免疫時間，造成該病又有回升的趨勢。□□

參考文獻：（10篇，略）