揚州地區健康體檢人群血細胞分析參考區間的驗證分析

刁葉秋，吳艷凌

(揚州市蘇北人民醫院醫學檢驗科，江蘇 揚州225001)

近年來全自動血細胞分析儀各級醫院普遍應用，不僅為臨床提供了更多診斷數據，而且大大提高了全血細胞計數(CBC)檢測結果的精密度和準確度。而各實驗室往往會使用不同的教科書上或儀器試劑使用說明書上的參考區間作為自己的正常參考區間。這常常會出現一家實驗室的結果 “正?！倍硪患覍嶒炇医Y果“異常”的現象，造成對臨床醫生和患者的誤導，出現不必要的醫療糾紛[1]。在衛生部支持下，中華醫學會檢驗分會啟動了“中國人群重要常規臨床檢驗項目參考區間的建立”研究工作[2]。研究方案以CLSI C28-A3C文件為指導，充分考慮了中國國情和新建參考區間的實際應用性，并建立了血細胞分析參考區間的中華人民共和國衛生行業標準WS/T 405-2012[3]。該標準由衛生部于2012年12月正式發布，推薦全國各臨床實驗室使用新的血細胞分析參考區間[4]。根據

ISO15189標準要求，臨床醫學實驗室在使用新標準的參考區間時，應進行必要的驗證或評估。因此，為了科學地、合理地建立自己實驗室的血細胞參考區間范圍，盡量減少健康人群與患者人群間的數據重疊，避免漏診和誤診。我們于2013年7-8月間在本地區健康體檢人群中進行了新的血細胞分析參考區間的驗證，現報告如下。

1 材料與方法

1.1 儀器與試劑 采用日本Sysmex XE-2100全自動血液分析儀,試劑、校準品及質控品均為Sysmex公司的配套產品。儀器由廠家專業人員定期進行校準、保養及維護，且精密度、準確度等性能評價良好，參加了衛生部及江蘇省的室間質評活動。每日進行室內質控，保證儀器工作正常，結果可靠。

1.2 研究對象及標本采集 受檢個體按照WS/T 405-2012《血細胞分析參考區間》附錄A中參考個體的選擇要求進行篩選。對2013年7月至2013年8月間在本院例行健康體檢的8264名健康體檢者中進行體格及B超、心電圖、X光透視、血壓、心率等檢查，從中排除了血液性疾病、變態性疾病、呼吸系統疾病、泌尿系統疾病、消化系統疾病、寄生蟲感染、惡性腫瘤和遺傳性疾病等，篩選出6000例健康個體，其中男性3000例，女性3000例，年齡在18～70歲。標本采集均于早晨6:30-7:30，在前一天無飲酒，無劇烈運動，且當天空腹的狀態下，以乙二胺四乙酸二鉀(EDTA-K2)真空采血管采集肘部靜脈血1ml，混勻，嚴格以實驗室血細胞分析檢測程序予以操作，4h內檢測完畢。

1.3 統計學分析 使用SPSS13.0統計學軟件對所測得的白細胞(WBC)、中性粒細胞比率(NE%)、淋巴細胞比率(LY%)、嗜酸性粒細胞比率(EO%)、嗜堿性粒細胞比率(BA%)、單核細胞比率(MO%)、NE、LY、MO、EO、BA 絕對值、紅細胞(RBC)、血紅蛋白(Hb)、紅細胞比容(HCT)、平均紅細胞體積(MCV)、平均紅細胞血紅蛋白量(MGH)、平均紅細胞血紅蛋白濃度(MCHC)、血小板(PLT)18項血細胞參數進行分析統計。采用與行業標準相同的非參數秩和檢驗法，將測定值按從小到大的順序排列，將n個秩次分為100等分，與r%相應的數稱為第r百分位，以Pr表示。采用Dixon方法剔除離群值，以參考個體P2.5和P97.5分別作為參考區間的下限和上限，觀察與行業標準之間的符合性。

2 結果

將本次6000例靜脈血檢測結果調查值使用SPSS13.0統計學軟件，采用與行業標準相同的非參數秩和檢驗法，采用Dixon方法剔除離群值，獲得各項目參考個體P2.5和P97.5，分別作為參考區間的下限和上限，與WS/T 405-2012的參考區間進行比較，顯示有較好的一致性，見表1。

3 討論

在現代醫學中，臨床檢驗已成為疾病診斷、預后判斷、療效評價及健康監測的重要手段，而檢驗項目的參考區間則是分析檢驗信息的基本尺度和重要依據。實驗室必須提供給臨床一個正確適用的生物參考區間，否則會導致誤診、漏診。因此制定一個適用于本實驗室或本地區健康人群的生物參考區間十分重要。而每個實驗室、不同檢測系統檢測同一項目都應建立各自的生物參考區間的要求在目前來說仍不太現實。NCCLSC28-A2推薦可引用、轉移其他實驗室或制造商提供的生物參考區間，進行適用性驗證[5,6]。而衛生部發布的新行業標準所列的參考區間基于我國大樣本的具有代表性的人群和可溯源/多系統的檢驗結果，更適用于我國多數地區和各主要檢測系統。臨床實驗室可采用新行業標準的參考區間，使用前應按照標準有關規定進行必要的驗證或評估[7,8]。

表1 6000例靜脈血檢測結果與WS/T405-2012的參考區間比較

本次靜脈血檢測結果調查值中的18個指標均為臨床常用的診斷指標。按照WS/T 405-2012標準提供的參考區間評估、驗證和使用要求，參與驗證的個體應多于20個，超出參考區間的數據不超過10%則通過驗證。本次調查中，參與驗證的個體6000例，其中男3000例，女3000例，適用本規則。白細胞(WBC)、中性粒細胞比率(NE%)、淋巴細胞比率(LY%)、嗜酸性粒細胞比率(EO%)、嗜堿性粒細胞比率(BA%)、單核細胞比率(MO%)、NE、MO、EO、BA絕對值、男性紅細胞(RBC)、男性血紅蛋白(HB)、女性紅細胞比容(HCT)、平均紅細胞血紅蛋白濃度(MCHC)、血小板(PLT)均在 WS/T 405-2012行業標準參考區間內。而女性紅細胞(RBC)、女性血紅蛋白(HB)、男性紅細胞比容(HCT)、平均紅細胞體積(MCV)、平均紅細胞血紅蛋白量(MGH)、LY絕對值幾個指標超出行業標準參考區間，比率分別為1.5%、1.5%、2.3%、2.0%、2.0%、0.8%， 但超出的數據均小于10%，所以新的行業標準可在臨床工作中采用。綜上述，WS/T 405-2012行業標準《血細胞分析參考區間》適用于揚州地區健康人群，可以在本實驗室內應用，但仍需定期評審[9,10]。

[1]鐘堃,何法霖,王薇,等.參考區間的發展與現狀[J].中國實驗診斷學,2012,16(12):2355-2358.

[2]尚紅,陳文祥,潘柏申,等.建立基于中國人群的臨床常用檢驗項目參考區間[J].中國衛生標準管理,2013,4(1):17-21.

[3]衛生部臨床檢驗標準委員會.WS/T 402-2012臨床實驗室檢驗項目參考區間的制定[S].北京:中國標準出版社,2012:32-48.

[4]衛生部臨床檢驗標準委員會.WS/T 405-2012血細胞分析參考區間[S].北京:中國標準出版社,2012:72-100.

[5]NCCLSC28-A2.How to define and reference intervals in the clinical laboratory[S].Wayne,PA:National Committee for Clinical Laboratory Standards,2000:121-123.

[6]劉志昂,陸婷婷,蘇靖凱.BC-5380全自動血細胞分析儀的性能評價[J].實驗與檢驗醫學,2013,31(4):407-408.

[7]吳建華,王建華.XE-1800血細胞分析儀計數有核紅細胞的性能評價[J].實驗與檢驗醫學,2012,30(4):409-411.

[8]任春云,金明超,包丹妮,等.SysmexXE-2100血液分析儀定量檢測成人網織血小板的方法學評價及參考區間建立[J].實驗與檢驗醫學,2010,28(5):459-460.

[9]竇會東,周智,高申.北京房山區健康人群靜脈血細胞分析參考區間驗證分析[J].中國實驗診斷學,2014,18(11):1885-1886.

[10]王秋菊,楊改平.血細胞分析指標生物參考區間在山西省臨汾地區適用性驗證[J].實用醫技雜志,2014,21(8):819-821.