循證檢驗在新生兒溶血病檢驗中的應用分析

潘慶珍

循證檢驗在新生兒溶血病檢驗中的應用分析

潘慶珍

目的 探討應用循證檢驗在新生兒溶血病檢驗中的應用價值。方法 選取100例可疑或已證實為新生兒溶血病的患兒血液進行循證檢驗, 即使用微柱凝膠免疫分析法進行直抗(直接抗人球蛋白試驗)、游離(游離抗體試驗)和放散(抗體釋放試驗)試驗, 并對原陰性結果進行復檢, 分析檢驗結果。結果 直抗試驗復檢陽性率提高26.00%、游離試驗復檢陽性率提高11.00%、放散試驗復檢陽性率提高8.00%。結論 對新生兒溶血病進行循證檢驗能提高檢驗的準確性, 驗證試驗陰性的原因。

循證檢驗；新生兒溶血病；微柱凝膠免疫；三項試驗；應用

新生兒溶血病(HDN)是新生兒的一種常見溶血性疾病,主要是由于夫妻血型不合, 致使母親體內產生與胎兒紅細胞lgG血型抗體相結合的免疫抗體, 所引起的被動免疫性疾?。?］。若得不到及時治療, 可使患兒出現高膽紅素血癥等嚴重并發癥, 進而造成患兒黃疸、貧血、智力缺陷等, 甚至死亡, 因此, 盡早確診是關鍵。這就涉及新生兒溶血病的血液檢驗問題, 但受多種因素的影響, 實際的檢驗結果往往與理論存在較大差異, 從而易出現漏診和誤診現象。經過多年的臨床實踐, 發現循證檢驗是提高新生兒溶血病檢驗的準確率的有效辦法, 本研究即為探討循證檢驗在新生兒溶血病檢驗中的應用價值, 現報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2013年1月～2014年1月本院收治的100例可疑或已證實為新生兒溶血病的患兒作為研究對象。患兒年齡2～6 d, 平均年齡(3.57±0.82)d；女64例、男36例。根據溶血三項檢驗結果, 確診75例, 可疑25例。

1.2 方法

1.2.1 儀器和試劑選擇 血清學檢測機選擇TD-3A型離心機、嬰兒HDN不完全抗體體檢測卡、RHD和ABO血型檢測卡、FYQ型免疫微柱孵育機、選擇長春博訊生物技術有限責任公司生產的放散試劑盒。

1.2.2 三項檢驗方法 取3～5 ml乙二胺四乙酸二鉀抗凝靜脈血液送檢, 包括監測嬰兒的RHD、ABO血型, 并采用微柱凝膠免疫法進行三項檢驗, 即直抗試驗、游離試驗和放散試驗(具體的檢驗操作步驟和方法參照第3版操作規程)。但檢測前應使用離心機進行約3 min的檢測卡離心, 防止檢測卡存在氣泡和干膠。另外, 檢驗前還應注意離心靜脈血標本, 2～3 min, 3000 r/min, 以盡快沉淀纖維蛋白, 防止影響檢測的準確性。檢測標本宜在20～25℃的室內進行, 防止出現冷凝集而影響檢測結果。結果需在加入試劑和標本的檢測卡進行1次離心后再判讀。

1.2.3 復檢方法 對三項檢驗方法中原陰性結果進行復檢。其中, 直抗陰性復檢時采用原試驗紅細胞2倍濃度進行試驗。游離陰性復檢則采用2倍原游離試驗血漿試驗, 若新生溶血病為母嬰RH血型不合引起, 則使用O型紅細胞和母體血清行游離試驗。若為母嬰ABO血型不合引起, 則應檢測母體血液中相應的lgG抗體效價, 同時用2-巰基乙醇(2-Me)滅活lgM抗體, 以代替患兒的血清。放散陰性復檢則需要增加一定的紅細胞比例, 用經過酶處理后的紅細胞替代原有的紅細胞。

1.3 陰陽性判斷標準［2］陽性：紅細胞凝集塊附于凝膠中或表面, 這提示血清中的血細胞被致敏或存在相關抗體；陰性：紅細胞出現沉降并達到凝膠底部形成紅細胞扣, 這提示血清中的血細胞未被致敏或不存在相關的抗體。

2 結果

經過循證檢驗后, 三項復檢試驗的陽性率均有所提高。其中, 支抗試驗中陰性有54例, 對原陰性結果進行復檢, 新增26例陽性, 陽性率提高26.00%；游離試驗中陰性有30例,對原陰性結果復檢后新增11例陽性, 陽性率提高11.00%；放散試驗中陰性有16例, 對原陰性結果復檢后新增8例陽性,陽性率提高8.00%。見表1。

表1 100例新生兒溶血病循證檢測結果(n, %)

3 討論

新生兒溶血病主要由于母嬰血型不合(主要是RH血型系統和ABO血型系統不合)而導致母體血型抗體進入胎兒血液, 從而對新生兒的紅細胞造成破壞的一種免疫性疾病。根據相關研究, 我國新生兒溶血病約有85%為ABO血型不合引起［3］。患有新生兒溶血病, 輕則出現水腫、貧血、肝脾重大等, 重則會造成患兒智力障礙、運動受限、核黃疸, 甚至危及生命安全, 嚴重影響患兒的生活質量, 給患兒的家庭帶來沉重的負擔。因此, 盡早確診和治療是關鍵。目前, 臨床診斷新生兒溶血病主要是進行血液實驗室檢驗, 其中, 直抗試驗(直接抗人球蛋白試驗)、游離試驗(游離抗體試驗)和放散試驗(抗體釋放試驗)三項試驗是診斷的主要依據。從理論上, 對新生兒溶血病的三項試驗檢驗結果均應呈陽性。但在實際的檢驗過程中, 受抗體、體內抗原、方法學等因素的影響, 實際的檢驗結果往往與理論存在很大差別, 這也是導致誤診和漏診的重要原因［4］。因此, 提高實驗室的檢驗準確率成為實驗室的重要研究課題。

在實驗室試驗檢驗中, 常用微柱凝膠免疫法進行三項檢驗。該方法具有快速、簡便、判斷準備率較高等優勢, 因而成為實驗室檢測新生兒溶血病的常規檢測方法。微柱凝膠技術是近年來國內外都大力推廣的一種有效檢測技術, 其基本原理是在混有葡聚糖凝膠的小試管中孵育血清和紅細胞, 在經過離心后紅細胞發生沉淀, 則提示抗原抗體存在不相適應情況, 也就是陰性反應, 可判定為陰性；但若抗體吸附于凝膠中或其表面, 致使紅細胞難以下沉, 則提示抗原抗體相適應, 即為陽性反應, 可判定為陽性［5］。這種檢測方法與傳統的試管檢測法相比, 操作不僅更為簡單, 耗時更短, 且檢驗陽性率更高。但用微柱凝膠免疫法進行三項檢驗時, 也存在一些不足, 如由于剛出生的新生兒的抗原位點較少、ABO抗原發育不完全, 因而抗原性較弱, 難以與IgG抗體結合, 因而進行直抗試驗時易呈若陽性或陰性。根據相關研究, 認為胎兒體內的IgG抗體會與體液細胞上的一些抗原發生中和, 進而導致部分抗體被處理失效, 造成游離試驗陰性。而放散試驗中, 則主要是由于采血時間較晚, 使很多致敏紅細胞遭到破壞而呈陰性。這些因素的存在, 在很大程度上降低了新生兒溶血病的檢測準確性。

為提高檢測的準確性, 本研究中采用循證檢驗的辦法, 大大提高了三項檢驗的陽性率(支抗試驗陽性率提高26.00%、游離試驗陽性率提高11.00%、放散試驗陽性率提高8.00%), 很好地驗證了與理論不相符的原因, 不為是臨床提高新生兒溶血病檢測準確率的有效方法, 值得推廣。

［1］ 林建鋒.微柱凝膠技術檢測在新生兒ABO溶血病的應用.中外健康文摘, 2013(4):97-98.

［2］ 楊麗.微柱凝膠法在新生兒溶血病檢測中的應用效果.中國現代藥物應用, 2014, 8(14):53-54.

［3］ 劉明芳.淺析新生兒溶血三項檢測.世界最新醫學信息文摘, 2014, 14(3):93, 98.

［4］ 邱華.母嬰血型不合導致的新生兒溶血病實驗室分析.中國現代藥物應用, 2014, 8(16):84-85.

［5］ 蔣峻峰.微柱凝膠免疫檢測法在新生兒溶血病中的應用研究.檢驗醫學與臨床, 2014, 11(17):2362-2363.

10.14163/j.cnki.11-5547/r.2015.18.085

2015-01-21］

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