吡諾克辛鈉滴眼液的質量分析與標準改進

李海霞，劉維彬，李智慧，田海燕，劉洪海

(德州市食品藥品檢驗檢測中心，山東 德州 253000)

吡諾克辛鈉滴眼液，曾用名白內停滴眼液、卡他靈滴眼液、卡它林滴眼液(Catalin)。吡諾克辛鈉滴眼液主要成分是吡諾克辛鈉，化學名1－羥－5－氧－5H－吡啶并－［3，2－α］－吩惡嗪－3－羧酸鈉。主要治療初期老年性白內障、輕度糖尿病性白內障或并發性白內障等。白內障形成的原因之一是由于若香氨基酸的代謝過程反常，生成醌類物質，致使晶狀體的可溶性蛋白質變成不溶性蛋白質，晶狀體變渾濁，視力持續減退。醌類物質對晶狀體可溶蛋白質的作用可被吡諾克辛競爭性抑制［1］。全世界因白內障致盲的占46%［2］，該藥物對白內障的發展具有一定的抑制功效［3］。吡諾克辛鈉滴眼液由藥片和專用溶液組成，每粒藥片含吡諾克辛鈉0.8mg;每瓶內裝溶劑15mL。國內現行標準有2個，衛生部藥品標準二部第四冊及國家食品藥品監督管理總局標準YBH16882006，檢驗項目包括性狀、鑒別(化學反應、紫外鑒別)、檢查(含量均勻度、專用溶劑的裝量、pH值、微生物限度或無菌、可見異物)、含量測定，但是缺少有關物質的檢查(衛生部藥品標準二部第四冊)、滲透壓摩爾濃度等安全性檢查項目。

1 依據現行質量標準檢驗結果與分析

1.1 總檢驗結果 本次試驗共檢驗51批次吡諾克辛鈉滴眼液，涉及生產企業4家，使用現行質量標準檢驗，合格率為100%。

1.2 分項檢驗結果與分析

1.2.1 性狀 51批次樣品均符合規定，藥片為橙色片，專用溶劑為無色液體。

1.2.2 鑒別 51批次樣品均符合規定，化學鑒別均顯正反應;紫外光譜在230 nm與433 nm處均有最大吸收，且實測吸光度比值均在1.82～1.97之間。

1.2.3 根據各個廠家藥品GMP認證的進度，分別檢查了無菌或微生物限度，所有批次的樣品均符合規定。

1.2.4 含量均勻度 51批樣品S值在1.48～4.14;A+1.8S值在2.23～9.76，均符合規定，合格率100%。其中2個廠家的49批樣品S值走勢圖分別見圖 1、2。

圖2 20批同廠家吡諾克辛鈉滴眼液含量均勻度S值走勢圖

1.2.5 專用溶劑的裝量 標準規定每瓶的裝量均應在14.3～15.7mL，經檢驗均符合規定，且90%樣品的平均裝量在15mL以上。

1.2.6 pH值 標準規定應在5.7～6.7之間，檢驗結果均在6.1～6.3之間;同廠家不同批次pH值差別不明顯，不同廠家之間pH值變化相對較小。其中2個廠家49批樣品pH走勢圖見圖3、4。

圖3 29批同廠家吡諾克辛鈉滴眼液pH值走勢圖

圖4 20批同廠家吡諾克辛鈉滴眼液pH值走勢圖

1.2.7 有關物質 僅1家企業的產品按照國家食品藥品監督管理總局標準YBH16882006檢驗有關物質項，其雜質總和為0.2%，其限度為1.0%。

1.2.8 含量測定 51批次樣品的平均含量在95.4% ～101.6%之間。結果表明，兩個廠家的吡諾克辛鈉含量測定值波動不大，質量穩定。其中2個廠家49批次平均含量見圖5、6。

2 有關物質檢查及其檢驗結果分析

圖5 29批同廠家吡諾克辛鈉滴眼液含量測定值走勢圖

圖6 20批同廠家吡諾克辛鈉滴眼液含量測定值走勢圖

現行標準對有關物質未加以控制，為了更好的控制產品質量，參考有關文獻［4～6］，采用 HPLC 法測定有關物質含量，用于控制產品質量。

2.1 儀器與試藥 Agilent 1260高效液相色譜儀，包括:真空脫氣機，G13llA四元泵，G1313A自動進樣，G1315A紫外檢測器和 Chem station工作站;XD105DU分析天平;水為純化水，乙腈與四氫呋喃為色譜純，其他試劑均為分析純。

2.2 方法與結果

2.2.1 色譜條件與系統適用性 色譜柱:Agilent色譜柱 C18(4.6mm ×250mm，5μm);流動相:磷酸鹽溶液(取4.5 g磷酸氫二鈉溶于1000mL水，用磷酸調節 pH至6.0)－乙腈－四氫呋喃(81∶18∶1);檢測波長433 nm;流速:0.8mL·min－1;柱溫:30℃;進樣量:20μL;在該色譜條件下吡諾克辛鈉與相鄰雜質峰的分離度大于1.5，理論塔板數按吡諾克辛鈉計在3000以上。

2.2.2 溶液的配制 取吡諾克辛鈉藥片1片置15mL專用溶劑中溶解，作為有關物質測定供試液;精密量取1mL至100mL量瓶中，用專用溶劑稀釋至刻度，搖勻，作為有關物質測定對照溶液。

2.2.3 專屬性考察 取吡諾克辛鈉原料10mg至10mL量瓶中用專用溶劑稀釋至刻度，作為儲備液;取儲備液1.0mL至20mL量瓶中，加入30%過氧化氫2mL放置30min后，加入0.1 mol·L－1硫代硫酸鈉2mL中和，用其專用溶劑稀釋至刻度，搖勻，作為氧化破壞溶液;取吡諾克辛鈉原料于4500 Lx照度下放置7天后取出，用專用溶劑稀釋至50 μg·mL－1的濃度，搖勻，作為光照破壞溶液;取吡諾克辛鈉原料于105℃下放置24 h，放冷后，用專用溶劑稀釋稀釋至50 μg·mL－1的濃度，搖勻，作為高溫破壞溶液。分別取上述溶液注入液相色譜儀，記錄色譜圖。結果表明，在該色譜條件下能有效檢查出破壞條件下產生的雜質，主峰與雜質峰完全分離，主峰純度大于990，表明本方法專屬性良好。

2.2.4 線性關系考察 精密量取“2.2.2”項下有關物質測定供試液各 1mL，分別至 10、25、50、100、200、250mL容量瓶中，分別用專用溶劑逐級稀釋成濃度成線性的溶液，分別精密量取6個線性濃度的溶液各20μL，注入液相色譜儀，記錄色譜圖。以待測物濃度C為橫坐標，峰面積A為縱坐標，進行線性回歸，線性方程為 A=87.705C－7.0368，r=0.9999。結果表明，在0.21 ～10.66 μg·mL－1濃度范圍內線性關系良好。

2.2.5 檢測線與定量限 精密量取“2.2.2”項下有關物質對照液1mL至25mL量瓶中，用專用溶劑稀釋至刻度并進樣測定，信噪比S/N為3.2，最低檢測濃度為0.02 μg·mL－1;最低定量限為0.1 μg·mL－1。

2.2.6 精密度試驗 取“2.2.2”項下有關物質對照液，在“2.2.1”項下條件重復進樣分析6次，以峰面積計算RSD為0.50%(n=6)，表明本方法精密度良好。

2.2.7 重復性試驗 取同一批有關物質測定供試液按“2.2.1”項下條件重復進樣分析6次，分別計算雜質含量，計算結果RSD為0.04%(n=6)，表明本方法重復性良好。

2.2.8 有關物質測定結果 取4個廠家共8批次吡諾克辛鈉滴眼液樣品，照“2.2.2”項方法分別制備有關物質供試品溶液與對照溶液，取對照溶液20μL注入液相色譜儀，調節檢測器靈敏度，使主成分的色譜峰高約為滿量程的20% 再精密量取供試品溶液和對照溶液各20μL，分別注入色譜儀，記錄色譜圖，以自身對照法計算有關物質含量，各雜質峰面積之和不得大于對照溶液主峰面積(1.0%)，結果見表1。

表1 吡諾克辛鈉滴眼液有關物質檢查結果

3 結果及討論

3.1 法定方法的質量分析 對51批樣品依據現行質量標準檢驗，結果均為符合規定，說明該品種質量穩定，能過基本滿足臨床使用要求。

在含量項下的結果分析圖表中，發現生產企業各批次含量趨勢偏低，提示應對主料投放進行必要復查，查找含量偏低的原因。

3.2 現行標準存在的問題

3.2.1 文獻報道［7］，吡諾克辛鈉滴眼液在臨床使用過程中出現了說明書以外的不良反應，很有可能是由于樣品自身或是雜質所致?，F行標準中無有關物質檢查項，不能很好的控制產品質量，有其必要性建立其有關物質測定方法。

3.2.2 試驗表明，吡諾克辛鈉在光照、氧化及高溫條件下均有雜質峰產生，但因各廠家的生產工藝與配方有所不同，并未形成統一的質量標準，故有必要建立統一的有關物質檢查方法。

3.2.3 色譜條件的選擇 試驗中8批次樣品來自4個生產廠家，均參照國家食品藥品監督管理總局標準YBH16882006檢驗，對照溶液不出峰或出峰很小，改用各自的專用溶劑為稀釋溶劑，準確度高，4個廠家不同批次的藥品均得到理想的有關物質檢驗結果。

4 結論及建議

藥品質量評價分析的目的是確保上市藥品質量可靠，人民群眾用藥安全有效，另一方面也利于企業的健康發展。本文考察了吡諾克辛鈉滴眼液的質量現狀，并對現行質量進行了評價，對法定標準檢驗方法進行分析，發現還有待于進一步完善提高。通過本文的探索性研究，建議在吡諾克辛鈉滴眼液標準中，增加有關物質檢查和滲透壓摩爾濃度檢查［8］。

［1］陳新謙，金有豫，湯光.新編藥物學［M］.第15版.北京:人民衛生出版社，2005:76.

［2］張靜.白內障的手術方式和藥物治療進展［J］.中國醫藥導報，2011，8(30):13 －14.

［3］Ciuffi M，Neri S，Francheli S，et al.Protective effect of pirenoxine and U74389 on induced lipid peroxidation in mammalian lenses.An in vitro，ex vivo study［J］.Exp Eye Res，1999，68(3):347 －359.

［4］李金林，姚佳穎，房桂珍，等.HPLC法測定吡諾克辛鈉的含量和有關物質［J］.中國現代藥物應用，2008，2(l):36－37.

［5］李金林，周小娟，安利霞，等.HPLC法測定吡諾克辛鈉滴眼液中主藥及有關物質的含量［J］.中國藥房，2008，19(34):2696 －2698.

［6］國家藥典委員會.中華人民共和國藥典2010年版(二部)［S］.北京:中國醫藥科技出版社，2010:附錄9－10，175 －176.

［7］丁利華.吡諾克辛鈉滴眼液致眼異常1例［J］.中國執業藥師，2009，6(11):12.

［8］李智慧，田海燕，劉洪海，等.吡諾克辛鈉滴眼液滲透壓測定［J］.中國藥師，2015，18(3):513 －515.