調(diào)節(jié)性T細(xì)胞在腫瘤免疫微環(huán)境中的作用及其機(jī)制研究進(jìn)展

摘要：腫瘤免疫微環(huán)境在腫瘤的演進(jìn)過程中發(fā)揮著重要作用，越來越多的研究證實(shí)，調(diào)節(jié)性T細(xì)胞（Tregs）雖然在維持機(jī)體免疫穩(wěn)態(tài)、預(yù)防自身免疫性疾病方面發(fā)揮著重要作用，但在腫瘤微環(huán)境內(nèi)的Treg細(xì)胞卻減弱機(jī)體的抗腫瘤免疫。

關(guān)鍵詞：腫瘤免疫免疫微環(huán)境調(diào)節(jié)性T細(xì)胞

傳統(tǒng)的治療手段，如手術(shù)、化療、放療、內(nèi)分泌治療，生物靶向治療對早期癌效果顯著，但對中晚期甚至伴有遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移的癌患者治療效果卻不理想。近年來對惡性腫瘤預(yù)后因素研究中，越來越受關(guān)注的是：腫瘤免疫微環(huán)境中Treg細(xì)胞對腫瘤預(yù)后的影響，本文就近幾年有關(guān)腫瘤免疫微環(huán)境中Treg細(xì)胞的相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行梳理并綜述如下。

1 調(diào)節(jié)性T細(xì)胞的來源及分類

調(diào)節(jié)性T細(xì)胞（Regulatory cell，Treg），是指能識別靶細(xì)胞主要組織相容性復(fù)合體（MHC）分子所提呈的T細(xì)胞受體（TCR）-抗原肽，并發(fā)揮一定免疫抑制功能的T細(xì)胞。根據(jù)Treg細(xì)胞表面標(biāo)志物不同，可以將Treg細(xì)胞分為天然產(chǎn)生的自然調(diào)節(jié)性T細(xì)胞（nTreg）如CD4+、CD25+Treg和誘導(dǎo)產(chǎn)生的適應(yīng)性調(diào)節(jié)性T細(xì)胞（iTreg）包括Tr1、Th3等細(xì)胞，主要分泌IL-10和TGF-β發(fā)揮免疫副調(diào)控作用。另外尚有CD8 Treg、NKT細(xì)胞等，與自免疫性身疾病的發(fā)生關(guān)系密切，其異常表達(dá)可導(dǎo)致自身免疫性疾病。

2 主要分子表面標(biāo)志及功能

2.1叉頭狀/翅膀狀螺旋轉(zhuǎn)錄因子（forkhead/winged helix transcription factor，F(xiàn)oxp3）被認(rèn)為是目前CD4+CD25+Treg最具特異性的分子標(biāo)志物，是CD4+CD25+Treg生長發(fā)育和具有抑制功能所必須的核轉(zhuǎn)錄因子[1]。Liu F，Aruga T研究報道Foxp3能抑制腫瘤免疫，導(dǎo)致患者生存率下降，乳腺癌浸潤Foxp3Treg的數(shù)量顯著高于正常乳腺組織，以癌旁組織為甚，乳腺癌浸潤Foxp3Treg增多與較短的無病生存期（disease-free survival，DFS）和總生存（oversurvival，OS）相關(guān)[2，3]?；谶@些研究，很多團(tuán)體嘗試通過降低Foxp3的表達(dá)來增強(qiáng)腫瘤免疫，但是最近的研究發(fā)現(xiàn)Foxp3表現(xiàn)出的不同表型在某些人群卻與良好的預(yù)后相關(guān)。Ronald J.deleeuw等認(rèn)為Foxp3與腫瘤的預(yù)后價值取決于腫瘤的所在位置及分子分型相關(guān)，有5項(xiàng)研究一致認(rèn)為肝癌中Foxp3的表達(dá)同不良預(yù)后相關(guān)，而4項(xiàng)研究則認(rèn)為Foxp3的表達(dá)同結(jié)直腸癌良好的預(yù)后相關(guān)，另外Foxp3對不同的乳腺癌分子亞型也有不同的預(yù)后價值[4]。是什么導(dǎo)致了預(yù)后差異的存在，一方面，同研究的技術(shù)差異相關(guān)，包括特定的Foxp3抗體的使用、評分策略和統(tǒng)計(jì)方法相關(guān)，另一方面同生物的廣泛差異性相關(guān)。目前雖然關(guān)于引起Foxp3表達(dá)及促進(jìn)抑制腫瘤免疫的機(jī)制不是很清楚，但已證實(shí)：T細(xì)胞的受體信號通路（TCR）、IL-2、TGF-β及轉(zhuǎn)錄因子等都會影響Foxp3的表達(dá)[5]。

2.2 CD127 CD127是白介素（IL-7）受體ɑ鏈（IL-7Rɑ），在胸腺細(xì)胞的分化、外周成熟T細(xì)胞維持穩(wěn)態(tài)以及病毒感染后特異性記憶T細(xì)胞的產(chǎn)生及維持均起著重要的作用[6].Seddiki N，Santner-Nanan B[7]等發(fā)現(xiàn)利用CD127可以更好的識別人體外周血中CD4+CD25+Treg細(xì)胞；CD127借助其細(xì)胞表面的表達(dá)，使轉(zhuǎn)錄因子Foxp3能夠更好的識別和隔離人體Treg細(xì)胞并進(jìn)行功能分析。劉友忠等將69例甲狀腺乳頭狀癌患者同23例結(jié)節(jié)性甲狀腺腫做對照，結(jié)果發(fā)現(xiàn)外周血中CD4+CD25+CD127low調(diào)節(jié)性T細(xì)胞占CD4+T細(xì)胞的比例與甲狀腺乳頭狀癌腺外侵犯、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及并發(fā)橋本與否呈顯著相關(guān)[8]。因此最新的觀點(diǎn)認(rèn)為CD4+CD25+CD127l-ow比CD4+CD25+Foxp3在特異性的檢測Treg分子表明標(biāo)志更有價值。

2.3其它 如CTLA-4：細(xì)胞毒淋巴細(xì)胞相關(guān)抗原-4（cytotoxic T lymphocyte associated antigen-4，CTLA-4）雖然也可作為CD4+CD25+Treg的細(xì)胞表面標(biāo)志，但它并非Treg特異性的標(biāo)志，它在細(xì)胞中發(fā)揮著關(guān)鍵的作用，它能夠扭轉(zhuǎn)TCR誘導(dǎo)的終止信號，雖然不能夠影響到Treg細(xì)胞的活力，但對Treg細(xì)胞免疫突觸的形成起著關(guān)鍵的作用[9]。GITR：是指糖皮質(zhì)激素誘導(dǎo)的腫瘤壞死因子受體（glucocorticoid-induced tumor necrosis factorreceptor，GITR）家族相關(guān)基因，主要在胸腺自然調(diào)節(jié)性T細(xì)胞上表達(dá)。Shimizu[10]and Cohen[11]等認(rèn)為GITR在Tregs表面持續(xù)高表達(dá)，并且能抑制Treg細(xì)胞的免疫抑制活性并降低機(jī)體Foxp3的表達(dá)，這表明GITR對Treg細(xì)胞的免疫抑制作用起負(fù)調(diào)控作用。

3 調(diào)節(jié)性T細(xì)胞在腫瘤免疫微環(huán)境中的作用及機(jī)制

3.1作用大量研究顯示：腫瘤患者外周血、腫瘤組織以及引流淋巴結(jié)中Treg細(xì)胞的數(shù)量和比例均有不同程度的上升，以腫瘤組織最為顯著，而且Treg細(xì)胞數(shù)量和功能與腫瘤患者的病程和預(yù)后相關(guān)[12]。目前認(rèn)為Treg免疫抑制作用主要通過兩種途徑：非特異性抑制途徑和特異性抑制途徑[13]。Treg的非特異性抑制功能沒有主要組織相容性復(fù)合體（MHC）限制性，可廣泛抑制DC、NK、巨噬細(xì)胞、CIM+和CD8+淋巴細(xì)胞等免疫細(xì)胞的功能。體外混合淋巴細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)表明，Treg能夠高效抑制CIM+和CD8+淋巴細(xì)胞的增殖和細(xì)胞因子分泌，誘導(dǎo)它們凋亡。特異性抑制途徑是由于Treg具有特異性T細(xì)胞免疫復(fù)合體TCR，存在特異性的MHC限制性，因而可被特異性的腫瘤相關(guān)抗原激活，然后抑制這些與抗原對應(yīng)的特異性CD4+、CD8+和B淋巴細(xì)胞活性的發(fā)揮，最終導(dǎo)致免疫細(xì)胞對腫瘤抗原產(chǎn)生耐受[13，14]。

3.2基本機(jī)制現(xiàn)已明確，Tregs不是通過單一的某種機(jī)制而是通過一系列的機(jī)制抑制機(jī)體的免疫功能[15]。各種Tregs作用機(jī)制不同，分別如下：①nTreg在體內(nèi)和體外均可抑制初始T細(xì)胞增殖和擴(kuò)增。其作用機(jī)制可分為兩類：細(xì)胞因子介導(dǎo)的抑制和細(xì)胞直接接觸介導(dǎo)的抑制。體內(nèi)實(shí)驗(yàn)表明IL-10和TGF-B對CD4+CD25+T細(xì)胞的抑制作用必不可少[16]。而體外研究數(shù)據(jù)顯示細(xì)胞-細(xì)胞接觸而非細(xì)胞因子在抑制作用中發(fā)揮重要作用，因?yàn)榭笽L10和抗TGF-B的抗體不能阻斷CD4+CD25+T細(xì)胞的抑制作用。有實(shí)驗(yàn)表明，TGF-B不僅可作為可溶性細(xì)胞因子，而且可表達(dá)于激于CD4+CD25+T細(xì)胞表面，因而可以細(xì)胞膜接觸的方式相互作用。②iTreg細(xì)胞Groux等研究發(fā)現(xiàn)，體外IL-10反復(fù)刺激CD4+T細(xì)胞可誘導(dǎo)T細(xì)胞分化產(chǎn)生Tr1調(diào)節(jié)性T細(xì)胞。Tr1細(xì)胞可產(chǎn)生高水平的IL-10，大量的IFN-C、IL-5和TGF-B，但不產(chǎn)生或僅產(chǎn)生少量的IL-4和IL-2。Tr1細(xì)胞能夠抑制初始T細(xì)胞的激活。而且與CD4+CD25+T細(xì)胞相似，其體內(nèi)抑制作用依賴于IL-10，而體外抑制作用機(jī)制可能是細(xì)胞-細(xì)胞接觸。因此，NKT細(xì)胞激活具有雙向性，在某些情況下有利于Th1型細(xì)胞因子的產(chǎn)生，在其他情況下則有利于Th2型細(xì)胞因子的產(chǎn)生，從而發(fā)揮免疫抑制作用。除了促進(jìn)免疫應(yīng)答向Th2型偏移以外，NKT細(xì)胞還可誘導(dǎo)T細(xì)胞無能或改變APC的功能發(fā)揮免疫抑制作用。通過總結(jié)這些文獻(xiàn)，提示我們調(diào)節(jié)性T細(xì)胞抑制腫瘤細(xì)胞免疫是多個環(huán)節(jié)和多種細(xì)胞因子共同作用的結(jié)果，且不同Treg細(xì)胞作用機(jī)制既有相同也有不同的地方，特別是在腫瘤復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移方面。

4結(jié)論

越來越多的研究證實(shí)，Treg細(xì)胞在腫瘤發(fā)生和發(fā)展的多個環(huán)節(jié)中發(fā)揮著重要的介導(dǎo)作用。如何在不誘發(fā)自身免疫病的前提下，利用機(jī)體的內(nèi)在免疫微環(huán)境，調(diào)節(jié)機(jī)體的免疫抑制狀態(tài)、阻止Treg細(xì)胞的增殖及分化、抑制Treg細(xì)胞抗腫瘤免疫的功能。

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