摘要:丹參由脂溶性成分和水溶性成分組成,其酯溶性成分丹參酮ⅡA是治療心腦血管疾病的有效成分。本方案采用乙醇回流提取,通過正交實驗(將丹參用不同提取時間、濃度乙醇溶液、不同溶媒量及提取次數(shù)各設(shè)置3個水平)選擇最佳乙醇提取工藝條件,并以丹參酮ⅡA含量作為考察指標(biāo)。通過實驗最終得:以12倍量85%的乙醇回流提取3次,1.5 h/次,丹參酮ⅡA的提取率最高。
關(guān)鍵詞:丹參;丹參酮ⅡA;提取工藝;正交試驗
1丹參提取方法
丹參提取方法有:①水煎煮法,②乙醇回流法,③乙醇回流-水煎煮提取法,④超臨界提取法,⑤超聲提取法。
2丹參研究的現(xiàn)實意義
近年來管疾病的治療取得迅猛發(fā)展,溶栓藥物和介入治療等大大改善了冠心病患者的預(yù)后。隨著人們生活水平提高,人們越來越關(guān)注自身的健康問題,天然藥物及其保健品的需求也越來越大,為了更好地發(fā)揮丹參的藥用價值,本文采用乙醇回流提取法,運(yùn)用正交設(shè)計法,考察丹參醇提的影響因素,并以丹參酮ⅡA作為參考指標(biāo),篩選最佳提取工藝條件。
2.1實驗材料
2.1.1儀器,見表1。
2.1.2試劑及藥材 乙醇(95%) (分析純,杭州長征化工廠);甲醇 (分析醇,杭州雙林化工試劑廠);甲醇(色譜純)。丹參藥材(20140108,亳州市安利達(dá)藥業(yè)有限公司)。
2.2實驗步驟
2.2.1正交試驗的設(shè)計
2.2.1.1正交試驗因素水平表 根據(jù)影響乙醇回流提取的因素:以乙醇濃度、提取時間、溶媒量、提取次數(shù)為因素,每個因素擬定3個水平,因素水平表,見表2。
2.2.1.2 L934正交試驗 將丹參藥材粉碎為粗粉,平行精密稱取9份藥材,每份10 g,按L934正交試驗表安排實驗,以丹參酮ⅡA的含量為指標(biāo)。將丹參藥材粗粉,置蒸餾燒瓶中,精密加入規(guī)定量乙醇,稱重,加熱回流,放冷,再稱定重量,用乙醇補(bǔ)足減失重量,搖勻,合并提取液,濾過,續(xù)濾液,即得。
2.2.2含量測定
2.2.2.1色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗 以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑;甲醇-水(75-25)為流動相;檢測波長270 nm。理論塔板數(shù)按丹參酮IIA峰計算為12040。
2.2.2.2對照品溶液的制備 精密稱取丹參酮IIA對照品0.0020 g,置50 ml棕色量瓶中,加甲醇至刻度,搖勻,中含丹參酮IIA 40 g/ml。
2.2.3供試品溶液的制備 精密量取1~9號試驗回流提取液一定量,甲醇定容至25 ml棕色瓶中,搖勻,作為供試品溶液。
2.2.4供試品含量測定 分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液(用0.45 μm微孔膜濾過,取續(xù)濾液)各5 μl入液相色譜儀,測定,即得。
3實驗結(jié)果與分析
3.1實驗結(jié)果,見表3。
3.2結(jié)果分析 從表3比較R(極差)值,可以看出,因素間主次關(guān)系為B>C>A>D。即乙醇濃度影響最大,其次是加醇量,再次是提取時間,提取次數(shù)的影響最小。直觀分析正交試驗結(jié)果,確定以A2B2C3D3,即加12倍量85%的乙醇提取3次,1.5 h/次,為最佳工藝條件。
4結(jié)論
丹參是我國現(xiàn)代研究較早較多的中藥,其脂溶性成分和水溶性成分均具有顯著的藥理作用,將其開發(fā)為藥物或相應(yīng)保健品,得出更高提取率的工藝更是發(fā)揮著舉足輕重的作用,優(yōu)良工藝無疑會造福于人類。
本實驗以丹參中主要成分丹參酮ⅡA為指標(biāo),采用正交試驗法對丹參的提取工藝進(jìn)行了優(yōu)選后實驗以乙醇濃度、乙醇用量、回流時間、回流次數(shù)為因素,4個因素各分3個水平,結(jié)果表明,乙醇濃度為85%乙醇量為藥材量的12倍,回流時間為90 min,回流3次為最佳提取工藝。
中藥材的工藝研究,應(yīng)根據(jù)臨床療效的需要、處方中各組成藥物的性質(zhì)、擬制備的劑型,從傳統(tǒng)用藥的經(jīng)驗出發(fā),結(jié)合現(xiàn)代化學(xué)成分、藥理等方面的資料,并結(jié)合生產(chǎn)設(shè)備條件、經(jīng)濟(jì)技術(shù)的合理性,選擇和確定最佳生產(chǎn)工藝。本文通過試驗優(yōu)選了最佳工藝參數(shù),為全面開發(fā)利用丹參打下基礎(chǔ)。
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