蒙藥用植物棉團鐵線蓮總生物堿和總黃酮含量的測定

摘要：目的 研究蒙藥用植物棉團鐵線蓮的總生物堿和總黃酮含量。方法 用乙醇提取棉團鐵線蓮的總生物堿和總黃酮，采用分光光度法測定其含量。結果 棉團鐵線蓮的總生物堿含量為：0.0056 mg/g，黃酮含量為0.1085 mg/g。結論 蒙藥用植物棉團鐵線蓮中富含有黃酮類化合物和生物堿類化合物，其生物堿含量較高。

關鍵詞：蒙藥用植物；棉團鐵線蓮；總生物堿；總黃酮

棉團鐵線蓮（Clematis hexapetala.）別名山蓼、棉花團、威靈仙，為毛茛科（Ranunculaceae）鐵線蓮屬多年生宿根草本植物。在我國分布于內蒙古、甘肅東部、陜西、山西、河北、遼寧、吉林、黑龍江。生固定沙丘、干山坡或山坡草地，尤以東北及內蒙古草原地區較為普遍。分布廣，資源豐富[1]。棉團鐵線蓮全草入蒙藥，夏末、秋前采收。具有破痞，調溫，\"協日烏素\"，止腐，消腫，止瀉之功效。臨床上主治寒痞，消化不良，寒性\"協日烏素\"病，\"吾雅曼\"病，黃水瘡，瘡瘍，水腫，寒瀉，祛除各種瘤的功效[2]。最近研究發現其具有抗腫瘤、降血壓、降糖、抑菌、抗氧化等藥理作用，主要有效成分為生物堿類化合物[3-4]。本研究測定蒙藥用植物棉團鐵線蓮的總生物堿含量和總黃酮含量，為這一民主植物藥的開發利用提供實驗數據。

1資料與方法

1.1一般資料 實驗用棉團鐵線蓮采自內蒙古呼和浩特市大青山，采摘后自然晾干，粉碎后過100目的篩子，保存于陰涼干燥處。鹽酸小檗堿標準品和蘆丁標準品購于中國生物檢定所。主要儀器有，HH-W600數顯恒溫三用水箱，SG8200H超聲波清洗器，GL-22M高速冷凍離心機，SHB-B95 循環水式多用真空泵，IKA- RV10B25 旋轉蒸發儀和UV-2000紫外可見分光光度計等。

1.2鹽酸小檗堿標準曲線的制作 精確稱取2.5 mg鹽酸小檗堿標準品，用甲醇定容至25 mL得到母液，分別吸取0.5 mL、1 mL、1.5 mL、2 mL、2.5 mL、3.5 mL、4.5 mL 母液于5 mL玻璃試管中，再分別用甲醇定容至刻度，以甲醇為空白對照在 408 nm下測吸光值，以鹽酸小檗堿濃度（mg/mL）為橫坐標，吸光度為縱坐標繪制標準曲線，測定總生物堿的含量。

1.3鹽酸小檗堿標準曲線的制作 準確稱取蘆丁標準品 25.00 mg于 100 mL 容量瓶中，加入少量80%乙醇，溶解，定容至刻度，搖勻，得蘆丁標準溶液，濃度為0.25 mg/mL。精確量取蘆丁標準品溶液0 mL、0.5 mL、1.0 mL、2.0 mL、2.4 mL分別置于10 mL刻度的試管中，均用蒸餾水稀釋至2.40 mL，各加5 %亞硝酸鈉0.40 mL，混勻，放置6 min，加10%硝酸鋁0.40 mL混勻，放置6 min，加4.3%氫氧化納4.0 mL，最后用水稀釋至刻度，混勻，放置15 min。以試劑空白為參比，在506 nm處測定吸光度值。以吸光度為縱坐標，濃度為橫坐標繪制標準曲線。

1.4總生物堿的提取測定方法 稱取4 g棉團鐵線蓮干粉，加入80 mL pH為3的95%乙醇，50℃下提取1 h，反復提取2次，合并濾液，旋轉蒸發得乙醇浸膏，用10 mL 1%鹽酸溶解，過濾，濾液用25%氨水調節pH至10，用三氯甲烷萃取2次取下層，合并濾液，旋轉蒸發，用5 mL甲醇溶解，在408 nm下測定其吸光度。

1.5總黃酮的提取測定方法 準確稱取棉團鐵線蓮干粉1.00 g于試管中，加入80%乙醇10 ml ，浸泡30 min（含研磨時間），加1g石英砂研磨，離心，取上清液。取提取1 mL于10 mL有刻度試管中，加水至2.40 mL，加5%亞硝酸鈉0.40 mL，混勻，放置6 min，加10%硝酸鋁0.40 mL混勻，放置6 min，加4.3%氫氧化納4 mL，最后用水稀釋至刻度，混勻，放置15 min以試劑空白為參比，在506 nm處測定吸光度值，代入標準曲線，計算黃酮含量。

2結果

2.1總生物堿含量 以鹽酸小檗堿濃度為橫坐標，吸光值為縱坐標繪制標準曲線，得到回歸方程：y=10.118x+0.0160，R=0.9980，見圖1。棉團鐵線蓮總生物堿在418 nm處的吸光度為0.075，見表1，根據回歸方程計算棉團鐵線蓮干粉中提取到的總生物堿含量為0.1085 mg/g。

2.2總黃酮含量 以蘆丁標準品濃度為橫坐標，吸光值為縱坐標繪制標準曲線，得到回歸方程：y=0.051x-0.0161，R=0.9881，見圖2。棉團鐵線蓮總黃酮在506 nm處的吸光度為0.999，見表1，根據回歸方程計算棉團鐵線蓮干粉中提取到的總生物堿含量為0.0056 mg/g。

圖1 小檗堿標準曲線 圖2 蘆丁標準曲線

3結論

棉團鐵線蓮是蒙古民族獨特的藥用植物，具有破痞，調溫，\"協日烏素\"，止腐，消腫，止瀉之功效。臨床上主治寒痞，消化不良，寒性\"協日烏素\"病，\"吾雅曼\"病，黃水瘡，瘡瘍，水腫，寒瀉，祛除各種瘤的功效[2]。通過本研究發現棉團鐵線蓮含有生物堿和黃酮類化合物。總生物堿含量較高，在本實驗條件下，1 g干粉中提取到的總生物堿含量為0.1085 mg。黃酮含量為0.0056 mg/g，含量較低。

綜上所述，棉團鐵線蓮總生物堿和總黃酮的提取工藝條件簡便、含量較高，因此進一步加強其總生物堿和總黃酮的的分離純化和藥理研究，使其得到有效的開發和利用，對社會和經濟發展具有重大意義和價值。

參考文獻：

[1]劉立波，楊慧，王錦.鐵線蓮屬植物研究進展[J].安徽農業科學，2009，37（15）：6959-6961.

[2]張鴿香，武珊珊.我國鐵線蓮屬植物的研究現狀及其園林應用方式[J].安徽農業科學，2010，38（22）：12076-12078.

[3]劉立波，楊慧，王錦.鐵線蓮屬植物研究進展[J].安徽農業科學，2009，37（15）：6959-6961.

[4]孫鳳，楊得坡.鐵線蓮屬植物的化學成分研究進展[J].中國中藥雜志，2009，34（20）：2660-2668. 編輯/張燕