解脲支原體耐藥性研究分析

摘要：目的 分析本地區(qū)解脲支原體（Ureaplasma urealyticum， UU）臨床分離株對臨床常用9種抗菌藥耐藥情況。方法 采用體外微量折點(diǎn)稀釋法，應(yīng)用珠海麗珠生物公司提供的試劑盒，嚴(yán)格按照試劑盒操作手冊進(jìn)行培養(yǎng)及藥敏試驗(yàn)。結(jié)果 本地區(qū)UU對強(qiáng)力霉素、美滿霉素及克拉霉素比較敏感，其次為交沙霉素和阿奇霉素，而羅紅霉素、氧氟沙星、左氧氟沙星、司帕沙星敏感率均不高。結(jié)論 針對UU感染的經(jīng)驗(yàn)治療，應(yīng)首選強(qiáng)力霉素、美滿霉素及克拉霉素，應(yīng)當(dāng)盡可能根據(jù)抗菌藥敏結(jié)果合理使用抗菌藥治療生殖道支原體感染。

關(guān)鍵詞：解脲支原體；抗菌藥物敏感試驗(yàn)；耐藥

支原體屬于原核微生物，缺乏細(xì)胞壁。近年來，許多研究證實(shí)支原體（UU、MH）與非淋病性尿道炎[1]、前列腺炎[2]、不育癥[3]及新生兒呼吸疾病[4]等多種疾病有關(guān)。故對支原體感染的危害不容忽視。目前，臨床上常用抗菌藥來治療支原體感染，而隨著抗菌藥的使用支原體的抗菌耐藥性必然發(fā)生某些改變。為觀察我地區(qū)UU、MH感染者抗菌藥耐藥性的變化，本文特作以下探討。

1 資料與方法

1.1一般資料 184例來自我社區(qū)2011年3月1日～2013年6年30日婦產(chǎn)科等門診患者，多為女性。臨床表現(xiàn)為下列之一：尿頻、尿不盡、尿痛、燒灼感，女性伴有白帶增多、外陰紅腫等癥狀。

1.2方法

1.2.1標(biāo)本采集 男性（患者取樣前至少1h內(nèi)不要小便）以無菌拭子深入尿道2～4cm處，輕輕轉(zhuǎn)動并停留10s后取出分泌物；女性以無菌拭子在宮頸管內(nèi)通過鱗柱狀上皮交界處輕輕轉(zhuǎn)動15～20s后取出分泌物。

1.2.2支原體培養(yǎng)鑒定及藥敏試驗(yàn) 支原體培養(yǎng)鑒定藥敏試劑盒由珠海麗珠試劑公司提供，嚴(yán)格按照試劑盒操作說明進(jìn)行，藥敏試劑有強(qiáng)力霉素（DOX）、美滿霉素（MIN）、交沙霉素（JOS）、克拉霉素（CLA）、羅紅霉素（ROX）、阿奇霉素（AZI）、氧氟沙星（OFL）、左氧氟沙星（LEV）、司帕沙星（SPA）。將尿道或?qū)m頸拭子標(biāo)本接種于現(xiàn)配的培養(yǎng)基中，擠壓使拭子中標(biāo)本滲入后棄拭子，充分混勻液體培養(yǎng)基，分別準(zhǔn)確量取50μl至微量孔中（除C-：加有50μl培養(yǎng)基的空白孔） ， 再加入無菌石蠟油封蓋， 35℃～37℃，24h和48h觀察結(jié)果。根據(jù)每孔生長情況分別判斷UU或MH鑒定及藥敏試驗(yàn)結(jié)果。

1.3結(jié)果判斷標(biāo)準(zhǔn) 陽性：支原體生長；陰性：不生長或支原體濃度小于等于104 ccu/ml。敏感（S）：兩孔均為不生長；中敏（ I） ： 高濃度孔不生長，低濃度孔生長；耐藥（R） ：兩孔均為生長。

2 結(jié)果

檢測出UU單獨(dú)感染陽性病例為134例， UU感染對9種抗菌藥敏感結(jié)果見表1。UU單獨(dú)感染時(shí)，強(qiáng)力霉素、美滿霉素及克拉霉素比較敏感，其次為交沙霉素和阿奇霉素，而羅紅霉素、氧氟沙星、左氧氟沙星、司帕沙星敏感率均不高。

3 討論

用于臨床治療的藥物大體分為三類：①喹諾酮類，如氧氟沙星、左氧氟沙星、司帕沙星等，抑制支原體的核酸的代謝；②大環(huán)內(nèi)酯類如阿奇霉素、交沙霉素、克拉霉素、羅紅霉素，抑制支原體的蛋白合成；③半合成四環(huán)素類如美滿霉素、強(qiáng)力霉素等，抑制蛋白質(zhì)合成并使其細(xì)胞膜通透性改變，使胞內(nèi)的核苷酸及其他重要成分外漏，從而抑制DNA復(fù)制。但支原體耐藥機(jī)制比較復(fù)雜。研究表明[5]：大環(huán)內(nèi)酯類可作為甲基化酶的誘導(dǎo)物，引起核糖體50S大亞基甲基化，導(dǎo)致作用靶點(diǎn)改變會引起UU對其耐藥。研究認(rèn)為[6]：引起支原體對喹諾酮類耐藥的主要原因是靶酶-DAN解旋酶的改變。DNA解旋酶是一種Ⅱ型拓?fù)洚悩?gòu)酶，有2個(gè)A亞基2個(gè)B亞基組成，分別由gyrA和gyrB編碼，其殘基68～107區(qū)為喹諾酮耐藥區(qū)（quinolones regions of drug-resistance， QRDR），若此區(qū)堿基突變致使編碼氨基酸發(fā)生改變造成酶結(jié)構(gòu)的改變，引起空間構(gòu)象變化從而阻止藥物進(jìn)入作用部位引起耐藥。但研究發(fā)現(xiàn)：支原體可通過轉(zhuǎn)座子Tn916等從鏈球菌、葡萄球菌等轉(zhuǎn)接tetm基因，因此有可能對四環(huán)素類產(chǎn)生耐藥。

隨著抗菌藥的廣泛應(yīng)用耐藥問題越來越嚴(yán)重，由于地區(qū)抗生素使用習(xí)慣不同，不同地區(qū)支原體的耐藥率存在差異。本文結(jié)果表明：在本地區(qū)支原體對強(qiáng)力霉素、美滿霉素敏感率最高。UU單獨(dú)感染時(shí)，強(qiáng)力霉素、美滿霉素及克拉霉素比較敏感，其次為交沙霉素和阿奇霉素，而羅紅霉素、氧氟沙星、左氧氟沙星、司帕沙星敏感率均不高。結(jié)果提示：針對UU單獨(dú)感染的經(jīng)驗(yàn)治療，應(yīng)首選強(qiáng)力霉素、美滿霉素及克拉霉素。而UU保持高度的敏感性的原因，可能是由于這類抗生素副作用較大，在本地較少使用有關(guān)。本地區(qū)支原體對強(qiáng)力霉素及美滿霉素保持較高的敏感性，原因可能是本地區(qū)較少使用該類藥物有關(guān)。

綜上所述，支原體在本地區(qū)有較高的感染率，臨床治療應(yīng)當(dāng)盡可能根據(jù)抗菌藥敏結(jié)果合理使用抗菌藥治療生殖道支原體感染。

參考文獻(xiàn)：

[1]Yu JT，Tang WY， Lau KH，et al.Role of Mycoplasma genitalium and Ureaplasma urealyticum in non-gonococcal urethritis in Hong Kong[J].Hong Kong Med J，2008，14（2）：125-129.

[2]Radoni A，Kovacevi V，Markoti A，et al.The clinical significance of Ureaplasma urealyticum in chronic prostatitis[J].J Chemother， 2009； 21（4）：465-466.

[3]Zeighami H，Peerayeh SN，Yazdi RS，et al.Prevalence of Ureaplasma urealyticum and Ureaplasma parvum in semen of infertile and healthy men[J].Int J STD AIDS，2009，20（6）：387-390.

[4]Pandey A， Dhawan B，Gupta V， et al.Clinical significance of airways colonization with Ureaplasma urealyticum in premature （<34 wk） neonates[J].Indian J Med Res， 2007，125（5）：679-684.

[5]Malewa E，Dimitrowa C.Experimental orchitis in white rats caused by Ureaplasma urealyticum[J].Zentralbl Allg Pathol，1983，128（5-6）：391-397.

[6]Soroka AE，Akopian TA，Taraskina AE，et al.Study of isolation of fluoroquinolone- resistant Ureaplasma urealyticum and identification of mutant sites[J].Chin Med J，2002，115（10）：1573-1575.編輯/成森