液基細胞學技術、HPV檢測聯合陰道鏡在宮頸病變中的應用價值

摘要：目的 分析和探討液基細胞學技術（Thin-Cytologic Test ，TCT）、高危型人乳頭狀瘤病毒（Human papilloma virus， HPV ）檢測聯合陰道鏡在宮頸癌和癌前病變中的應用價值。方法 對2013年11月18日～2014年2月7日在天津泰達醫院婦產科門診就診的患者行機會性篩查，以液基細胞學、HPV檢測為篩查方法，陰道鏡下活檢組織病理學診斷為最終診斷標準，評價機會性篩查用于宮頸癌早期診斷、早期治療的意義，從而確定液基細胞學技術、HPV檢測聯合陰道鏡在宮頸病變中的應用價值。結果 在2155例篩查者中，對TCT陽性227例患者進行HPV病毒檢查，隨著TCT細胞學檢查病變級別的增高，HPV檢查患者陽性率也增高，由此證明，HPV的陽性率隨細胞學監測級別的升高而升高；在對TCT與HPV兩種檢查結果均顯示陽性的102例患者行陰道鏡下病理活檢，結果高危型HPV陽性患者中，組織學檢查陽性者明顯高于低危型HPV陽性患者。隨著宮頸病變嚴重程度的增加，HPV感染患者高危型陽性率顯著增高。結論 TCT、高危型HpV DNA檢測聯合陰道鏡可明顯提高CIN的陽性檢出率，降低漏診率，三者同時應用于癌前病變檢查中能更好地發現宮頸癌前病變，具有重要的臨床應用價值。

關鍵詞：液基細胞學檢查；人乳頭瘤病毒；宮頸癌；陰道鏡

近年研究發現，宮頸癌現今是僅次于乳腺癌的女性惡性腫瘤之一，嚴重威脅著女性患者的健康。宮頸癌的發病年齡為40～60歲[1]。有研究表明[2]宮頸癌是唯一可以早期發現早診斷、早治療的婦科癌癥。從子宮頸上皮內瘤變（CIN）到出現原位癌、早期癌、浸潤癌是一個連續發展的過程，時間間隔較長，需10～15 年時間[3]，其發展為原位癌的風險是正常人群的20倍，發展成浸潤癌的風險是正常人群的7倍[4]。因此若能盡早發現和及時治療，可阻止其發展成宮頸癌。預防和降低宮頸癌發病率及病死率的關鍵在于有效篩查癌前病變及監測預后。目前宮頸癌篩查方法多，費用差別大，本文通過分析液基細胞學（TCT）及HPV-DNA的檢查結果，對比電子陰道鏡下定位活檢病理檢查結果，評價TCT聯合HPV在檢測宮頸癌前病變和宮頸癌早期診斷中的應用價值。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取2013年3月～2014年1月本院婦科門診對已婚或未婚有同房史初次就診接受宮頸癌篩查的患者2155例，年齡17～69歲，平均33.46歲。其中有258例為無癥狀要求體檢。2155例患者中宮頸光滑265例，1890例有不同程度的分泌物增多、血性白帶、接觸性出血及宮頸糜爛、肥大、充血、息肉等病變。所有患者均無子宮切除及宮頸手術治療史，無其他惡性腫瘤疾病史，非生殖系統炎癥急性期、非月經期、妊娠期或哺乳期。

1.2方法 2155例均進行TCT檢查，對其中臨床可疑病變的1890例患者同時行HPV-DNA檢查。對TCT陽性（ASCUS及以上為陽性）伴HPV-DNA檢測陽性或臨床高度懷疑宮頸病變102例患者，同時行陰道鏡下定位宮頸活組織活檢，病理標本由專人閱片作出最后診斷。

1.2.1TCT檢測 用特制的宮頸刷在宮頸口刷5圈取標本，將采集標本的毛刷放入盛有ThinPrep保存液的小瓶中漂洗，用美國進口的THINPREP-2000全自動細胞檢測制備儀制片，制成直徑為2cm的薄層細胞涂片，95%酒精固定，HE染色。細胞學診斷采用2001年國際癌癥協會（NCI）推薦的TBS分類法，根據細胞異型性程度依次診斷為正常范圍（NILM）、意義不明的非典型鱗狀細胞（ASC.US）、非典型鱗狀上皮細胞不除外高度病變（ASC.H）、低度鱗狀上皮內病變（LSIL）、高度鱗狀上皮內病變（HSIL）、鱗狀細胞癌（SCC）、意義不明的非典型腺細胞（AG.US）和腺癌（AC）。

1.2.2HPV-DNA監測 采用HPV核酸擴增雜交對HPV進行基因分型，以患者HPV感染為陽性進行統計分析。取宮頸分泌物或脫落細胞提取目的DNA，PCR體外擴增，核酸分子快速雜交儀為平臺，根據導流雜交原理，使目的分子穿過在已固定好核酸探針的低密度基因芯片膜。該技術可一次性快速檢測占中國人群HPV感染95%的21種基因型，其中15種高危亞型：16、18、31、33、35、39、45、51、52、53、56、58、59、66、68，6種低危亞型：6、11、42、43、44和81，使用試劑盒由天津金域醫學檢驗所提供。

1.2.3陰道鏡下宮頸組織病理檢查 采用德國生產的華萊士zoonsope SLC-2000型陰道鏡，陰道鏡觀察主要以病灶的邊界形態、顏色、血管結構和碘反應，4個征象反映病灶的異常。用干棉簽擦去宮頸表面及陰道內分泌物，觀察鱗柱狀交界及血管，再用3%醋酸溶液涂在宮頸表面l min后鏡下觀察出現白色上皮、鑲嵌、點狀血管和各種異形血管，接著碘溶液試驗，不著色為碘試驗陽性區。對檢出結果TCT陽性、HPV陽性及兩項同時陽性的病例均行陰道鏡下檢查，經醋酸試驗后對可疑部位在陰道鏡下進行定位取材活檢，宮頸無異常時選取3、6、9和12點等多個點位組織，必要時采取宮頸錐切，收集標本送病理科進行病理診斷，所有標本由2名病理科醫師閱片并做出病理診斷。病理診斷標準分為：正?；蜓装Y，宮頸上皮內瘤變（CIN），包括輕度不典型增生（CINⅠ），中度不典型增生（CINⅡ），重度不典型增生和原位癌（CINⅢ），鱗狀細胞癌。

1.3統計學方法 全部數據的統計由SPSS11.5及Excel軟件建立數據庫，用SPSS11.5統計軟件進行統計，計數資料比較用χ2檢驗，P<0.05為差異具有統計學意義。

2 結果

2.1HPV的陽性率隨細胞學監測級別的升高而升高 在2155例篩查者中，TCT異常者227例，占10.5%，其中ASC-US186例，占8.6%，LSIL24例，占1.1%，HSIL13例，占0.6%，SCC4例，占0.1%。隨著TCT細胞學檢查病變級別的增高，HPV檢查患者陽性率也增高，宮頸癌患者HPV陽性率達100%。結果有統計學意義（P<0.05），見表1。

2.2HPV的陽性率隨組織學檢查病變級別的升高而升高 對TCT與HPV兩種檢查結果均顯示陽性的102例患者行陰道鏡下病理活檢，結果表明，高危型HPV陽性患者中，組織學檢查陽性者明顯高于低危型HPV陽性患者。隨著宮頸病變嚴重程度的增加，HPV感染患者高危型陽性率顯著增高。宮頸癌患者HPV陽性率達100%。結果具有統計學意義（P<0.05），見表2。

3 討論

TCT宮頸細胞學檢查是宮頸癌篩查的主要方法。具有無創性，特異性好，與傳統的巴氏相比明顯的提高了標本的滿意度與宮頸異常細胞檢出率，對疾病的性質作出較準確的判斷可使宮頸癌的發病率和病死率大幅下降，但易受主觀因素影響，診斷水平參差不齊。

HPV檢測已成為宮頸的另一種防癌篩查手段，持續的高危型HPV感染是發生CIN及癌的重要條件。一項中國的防癌篩查分析說明，高危型HPV作為宮頸癌的初篩手段具有很好的敏感性和特異性[5～7]。將其與細胞學檢查相配伍，對可疑病例可結合陰道鏡下活檢，能大大提高宮頸病變診斷的準確率，做到早期發現，早期治療，對宮頸癌的防治起到重要的作用。當TCT和HPV均陽性時，隨CIN級別增高HPV感染和陽性率均增高，TCT聯合HPV檢測對宮頸病變的靈敏度達100%，說明HPV的檢測和基因分型對宮頸癌的早期防治有著非常積極的意義。

液基細胞學技術聯合HPV檢測及陰道鏡聯合作用，能夠最大限度地彌補各種篩查方法的缺點和不足，在宮頸癌前病變的篩查中，是一種高效、便捷的篩查方法，對于判斷人群中宮頸病變的發展趨勢、預防宮頸癌發生具有重要作用。

參考文獻：

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