無應(yīng)激皮特蘭豬的選育

涂尾龍，畢業(yè)于南京農(nóng)業(yè)大學(xué)，一直從事動物遺傳育種工作。目前主持省部級項(xiàng)目一項(xiàng)，參加多項(xiàng)國家自然基金項(xiàng)目、市級項(xiàng)目，主筆發(fā)表核心期刊論文數(shù)篇。長期在豬場從事生產(chǎn)、無應(yīng)激皮特蘭豬的選育等育種工作，近年來正在培育申農(nóng)白豬。

尊敬的各位領(lǐng)導(dǎo)、專家、同行，大家好！非常感謝組委會給我這么一個和大家交流學(xué)習(xí)的機(jī)會。接下來，我將介紹下我們上海市農(nóng)業(yè)科學(xué)院畜牧獸醫(yī)研究所豬育種課題組在無應(yīng)激皮特蘭豬選育及雜交利用方面的工作。

皮特蘭豬原產(chǎn)于比利時布拉邦特地區(qū)，是先由比利時的本地豬與法國的貝衣豬雜交，后又引入英國的泰姆沃斯豬的血統(tǒng)雜交而成，1955年被歐洲各國所公認(rèn)，是近十幾年來歐洲較為流行的豬種。

皮特蘭豬后軀和背部肌肉豐滿，是目前瘦肉率最高的豬種，可達(dá)70 %以上，在我國主要是被用作二元或三元雜交生產(chǎn)的父本，以提高雜交商品豬的瘦肉率水平。

雖然皮特蘭豬具有極高的瘦肉率，但在國內(nèi)并未能大面積推廣，主要原因是其存在比較嚴(yán)重的應(yīng)激反應(yīng)，也就是該豬常常在運(yùn)輸途中突然死亡或出現(xiàn)PSE肉（即灰白、松軟、滲出液汁），從而導(dǎo)致生產(chǎn)上的巨大損失。

我國每年生豬出欄數(shù)超過6億頭，由于應(yīng)激綜合癥引起的死亡和PSE豬肉，每年損失巨大。據(jù)研究，絕大部分外種豬具有較高頻率的氟烷敏感隱性基因，尤其是皮特蘭豬。

現(xiàn)代生物學(xué)研究表明，導(dǎo)致應(yīng)激發(fā)生的是位于豬第6號染色體上p11-q21區(qū)域的氟烷基因。目前已知氟烷基因存有三種基因型：NN、Nn、nn，前兩種基因型對氟烷氣體不敏感。

1988年上海市農(nóng)業(yè)科學(xué)院畜牧獸醫(yī)研究所成為國內(nèi)首次從法國引進(jìn)皮特蘭豬的單位。

國內(nèi)首次針對氟烷基因展開皮特蘭豬的分子育種，將PCR-RFLPs的檢測結(jié)果作為群體選育的主要依據(jù)。采用分子選育與常規(guī)育種相結(jié)合的方法，對獲得的無應(yīng)激皮特蘭豬開展群體繼代選育。

技術(shù)思路與方案（圖1）：

第一階段，無應(yīng)激皮特蘭豬選育群建立。

首先，在皮特蘭豬群中搜尋或?qū)牖蛞M(jìn)N基因。其次，圍繞獲得的具N基因的皮特蘭豬進(jìn)行擴(kuò)繁，擴(kuò)大群體中N基因的頻率，選留具NN基因型的皮特蘭豬，構(gòu)建無應(yīng)激皮特蘭豬選育群。

第二階段，對選育群開展群體繼代選育。

選育過程采用分子選擇與常規(guī)育種相結(jié)合，確保每個世代中群體中n基因的準(zhǔn)確檢測與選擇剔除。開展性能測定并進(jìn)行選擇，提升生產(chǎn)性能，多個世代后，選育出無應(yīng)激皮特蘭豬。其中，針對市場優(yōu)質(zhì)肉生產(chǎn)的需要，徹底剔除n基因，開展具NN基因型的優(yōu)質(zhì)、高瘦肉率無應(yīng)激皮特蘭豬新品系選育；針對生豬高效養(yǎng)殖的需要，剔除n基因至低水平的頻率，徹底剔除nn基因型。

第三階段，雜交與配套組合的選擇與利用。

以選育出的無應(yīng)激皮特蘭豬為核心，開展與不同生產(chǎn)用種豬的雜交試驗(yàn)，包括地方豬、培育豬及洋種豬，進(jìn)行配合力的測定，據(jù)此進(jìn)行配套組合的選擇，找到最優(yōu)雜交配套組合。

經(jīng)PCR擴(kuò)增，其片段長度為118 bp，經(jīng)HhaI酶切后，顯性純合體（NN，陰性）產(chǎn)生85 bp和33 bp兩個片段；隱性純合體（nn，陽性）不能切開，只有一條118 bp的片段；雜合體（Nn）則產(chǎn)生118 bp、85 bp 和33 bp三個片段。

從2003年11月開始，從圖2中可以看出，在2003年11月～2004年3月之間，NN基因型在有的生產(chǎn)批次間還會出現(xiàn)空白，但就整體的一個趨勢而言，NN基因型的數(shù)量呈上升趨勢，而nn基因型在開始時數(shù)量較多，經(jīng)過不斷的基因檢測，剔除nn基因型，檢測結(jié)果顯示其數(shù)量不斷降低，進(jìn)入2006年皮特蘭群體內(nèi)基本上不再出現(xiàn)nn基因型個體。

NN基因型從第1～9批檢測時間段內(nèi)，其頻率在10 %左右浮動，平均為5.88 %，Nn基因型則為52.60 %，nn基因型為41.52 %。從第10批開始NN基因型頻率逐漸升高，一直到第17批頻率升高到1，以后幾個批次雖然有升降，但始終維持在較高頻率。從第17～28批一共有12批，其NN基因型頻率平均為89.54 %，而Nn基因頻率則從第17批降為0，接下來的幾個批次雖有反彈，但均維持在較低頻率，平均為10.08 %，nn基因型從第17批次降為0后，除了第23批次外，其余均為0。這說明經(jīng)過多個世代有選擇性地剔除n基因以及完全淘汰nn基因型的豬，在選育群體中基本上已經(jīng)沒有nn基因型皮特蘭豬了。

氟烷基因在皮特蘭群體中與背膘EBV極顯著相關(guān)，與肢蹄評分、日增重、母系指數(shù)、父系指數(shù)等表型顯著相關(guān)，與其他性狀不相關(guān)。其中，NN個體在日增重方面表現(xiàn)出明顯的優(yōu)勢，在背膘EBV、父系指數(shù)及母系指數(shù)中Nn個體表現(xiàn)較好，但是nn個體在肢蹄方面表現(xiàn)好于其他兩種基因型。

三種基因型的豬的胴體瘦肉率分別為：NN的70.18 %，Nn的72.08 %，nn的76.74 %，呈現(xiàn)NN

雜交組合試驗(yàn)結(jié)果表明，在其他飼養(yǎng)條件基本相同時，肥育試驗(yàn)為119 d時，（皮·杜）×申組合（I）和（杜·皮）×申組合平均日增重（g/d）基本相當(dāng)，分別為569.07、569.81，差異不顯著；而（皮·杜）×申組合（I）高于皮×申組合52 g左右，差異不顯著；肥育時間均為135 d時，（皮·杜）×申組合（II）高于杜×申組合52 g左右，差異不顯著。此階段的結(jié)果表明，在同等條件下，（皮·杜）×申和（杜·皮）×申組合分別優(yōu)于皮×申組合和杜×申組合，充分顯示了雜交公豬的優(yōu)勢。