HPLC法測定尼群地平片的含量

【摘 要】尼群地平為二氫吡啶類鈣通道阻滯劑，具有顯著而持久的降壓及血管擴張作用。固定相為：依利特hypersilBDSC18色譜柱（4.6*250*5u），乙腈-甲醇-四氫呋喃-水（10：15：25∶50）為流動相，檢測波長為237nm；尼群地平在40～320μg·mL-1范圍內呈良好的線性關系。尼群地平的平均回收率為99.3%。本法簡便、重現性好、回收率高，可用于尼群地平片中尼群地平的含量測定。

【關鍵詞】尼群地平片；尼群地平；測定

尼群地平化學名為2，6-二甲基-4-（3-硝基苯基）-1，4-二氫-3，5-吡啶二甲酸甲乙酯。尼群地平為二氫吡啶類鈣通道阻滯劑。尼群地平化具有顯著而持久的降壓及血管擴張作用[1-3]。尼群地平化用于治療高血壓。目前生產尼群地平片的廠家主要有哈藥集團制藥總廠、上海信誼天平藥業有限公司、陜西春暉藥業有限公司、成都第一藥業有限公司、云南白藥集團大理藥業有限責任公司、廣東華南藥業集團有限公司、合肥久聯制藥有限公司、安徽省潤康藥業有限公司、浙江萬邦藥業股份有限公司、唐山吉祥藥業有限責任公司、遼寧康泰藥業有限公司、大連泛谷制藥有限公司、山西蘭花藥業有限公司等。本文用高效液相法對尼群地平片中的尼群地平的進行了含量測定。

1.儀器與試藥

1.1儀器

EX1600四元低壓梯度液相色譜儀（南京科捷分析儀器有限公司）；CO-1000型色譜柱溫箱（武漢恒信世紀科技有限公司）；UV-1800紫外/可見分光光度計（上海美譜達儀器有限公司）；XYJ-H帕恩特實驗室中央超純水系統（北京湘順源科技有限公司）；瑞士梅特勒-托利多MS精密天平（梅特勒-托利多中國公司）；QTSXR10260數控型超聲波清洗器（天津市瑞普電子儀器公司）；TΜ-1901 雙光束紫外可見分光光度計（北京普析通用儀器有限責任公司）。

1.2試藥

乙腈（淄博市淄川區鑫川化工廠）、磷酸（湖北巨勝科技有限公司）、鹽酸（襄樊金譯成精細化工有限公司）、甲醇（商丘市瑞普化工有限公司）、冰乙酸（淄博市淄川區鑫川化工廠）、磷酸氫二銨（淄博市淄川區鑫川化工廠）、四氫呋喃（襄樊金譯成精細化工有限公司）。

2.含量測定

2.1色譜條件

依據查閱文獻及考查的結果，確定色譜條件如下[4-13]。色譜柱為依利特hypersil BDSC18 色譜柱（4.6*250*5u）；乙腈-甲醇-四氫呋喃-水（10：15：25∶50）為流動相；檢測波長為237nm；流速1.0mL·min-1；柱溫：30℃。理論板數按尼群地平峰計算應不得低于2000。

2.2供試品溶液的制備

取尼群地平片適量，研細，精密稱定至容量瓶內，加流動相適量超聲溶解，放涼，流動相定容，過0.45μm的濾膜，即得。

2.3對照品溶液的制備

精密稱取尼群地平對照品約50mg，置50毫升棕色容量瓶中，用甲醇超聲波振蕩溶解并稀釋至刻度，搖勻，精密吸取10毫升，置100毫升棕色容量瓶中，用甲醇超聲波振蕩溶解并稀釋至刻度，搖勻，即得（每1mL溶液中含尼群地平100μg）。

2.4陰性干擾試驗

按方中比例取尼群地平片輔料，按照制備工藝方法制成陰性制劑，按2.3項下方法制成供試品溶液，按色譜條件測定。結果表明：在選定條件下測得的陰性液吸收曲線在與尼群地平相同保留時間處不存在吸收峰，說明此方法具有較強的專屬性。

2.5標準曲線的制備

制備濃度為40μg·mL-1、80μg·mL-1、160μg·mL-1、200μg·mL-1、240μg·mL-1、280μg·mL-1、320μg·mL-1的對照品溶液，分別精密吸取10μL注入HPLC，記錄色譜圖。以峰面積積分值A（μg）為橫坐標，進樣量為縱坐標，繪制標準曲線，計算回歸方程。試驗表明，尼群地平對照品在40～320μg·mL-1范圍內線性關系良好。

2.6精密度試驗

精密吸取尼群地平對照品溶液10μL重復進樣6次，測定峰面積積分值，對照品峰面積積分值的RSD為0.63%。結果表明，本實驗精密度良好。

2.7重現性試驗

分別稱取同批尼群地平片樣品6份，分別制備成供試品，按色譜條件測定含量，并計算樣品的RSD值為0.55%，結果表明，此含量測定方法的重現性良好。

2.8穩定性試驗

取供試品溶液，分別在0，1，2，3，4h精密吸取供試品溶液注入液相色譜儀，進樣測定，供試品尼群地平峰面積積分值的RSD為0.63%。結果表明尼群地平至少在4h內穩定。

2.9回收率試驗

采用加樣回收試驗，取已知含量的同一批供試品各6份，精密稱定，分精密添加一定量的尼群地平對照品，按供試品制備所述方法制備供試品溶液，測定含量（同時測定樣品含量），計算回收率。6次測定的平均回收率為99.3%，RSD為0.83%。

2.10樣品含量測定

依照上述含量測定方法，測定尼群地平片三批樣品中尼群地平的含量，結果三批樣品的含量分別為標示量的99.3%、100.1%、100.5%。

3.討論

分別考察乙腈-甲醇-四氫呋喃-水（10：15：25∶50），乙腈-甲醇-水 （20∶10：70），乙腈-甲醇-冰乙酸-水（15：15∶3∶67），乙腈-甲醇-四氫呋喃-水（10：15：35∶40），乙腈-甲醇-水（20∶20：60），乙腈-甲醇-四氫呋喃-水（10：25：25∶40），磷酸鹽緩沖液（0.01mol/L磷酸氫二銨溶液， 用磷酸調節pH 值6.0）-乙腈（50：50）不同比例的流動相，結果以乙腈-甲醇-四氫呋喃-水（10：15：25∶50）為流動相，供試品各峰分離效果最好，故選用乙腈-甲醇-四氫呋喃-水（10：15：25∶50）為流動相。本實驗采用高效液相法對尼群地平片中尼群地平的含量進行測定，為今后對尼群地平片的質量標準修訂提供依據。本實驗方法是一種簡便、準確、安全的測定尼群地平片含量的方法。尼群地平片中尼群地平的含量為標示量的95-105%。

【參考文獻】

[1]Kazda S，倪西平.尼群地平抗高血壓效能中的利尿作用[J].國外醫學.藥學分冊，1989（06）.

[2]桑舉陽.尼群地平及其聯合用藥的降壓效應評價[J].河南診斷與治療雜志，1995（01）.

[3]陳厚柏，劉伊麗，張榮華，劉仕勤.尼群地平治療高血壓患者血藥濃度與抗血小板聚集及降壓作用的關系[J].中國循環雜志，1994（02）.

[4]靳春林，王竹林.尼群地平原料藥及相關物質的測定方法[J].山東醫藥工業，1995（04）.

[5]米振清，劉芹.HPLC法測定尼群地平片的含量[J].齊魯藥事，2007（02）.

[6]黃春明，周全，張恒弼，任玉林.氣相色譜法測定血漿中尼群地平[J].中國醫院藥學雜志，1998（08）.

[7]馬玉榮，朱代舜.尼群地平片劑的鈰量法測定[J].中國醫藥工業雜志，1995（09）.

[8]張秋榮，查嶺，鄭東娜，王旭東，劉宏民.HPLC測定復方尼群地平片中尼群地平和氫氯噻嗪的含量[J].中國藥學雜志，2007（20）.

[9]朱世民，成全，胡秀貞，彭慈貞.尼群地平幾種測定方法的比較[J].藥學學報，1988（07）.

[10]岳志華，牛秀華，張啟明.關于中國藥典與英國藥典（2005年版）尼群地平原料和片劑中有關物質檢查HPLC方法的比較與討論[J].中國藥品標準，2007（05）.

[11]唐玉紅.離效液相色譜法測定尼群地平的含量[J].現代儀器，2003（01）.

[12]黎月玲，鄭企琨，黃作君.高效液相色譜法測定尼群地平片的含量[J].中國醫院藥學雜志，2000（10）.

[13]杜江波.用高效液相色譜法測定血清中尼群地平的濃度[J].陜西醫學檢驗，1998（01）.