通過生豬生產(chǎn)鏈追蹤耐甲氧西林金黃色葡萄球菌

隨著人們對耐甲氧西林金黃色葡萄球菌（Methicillin-Resistant Staphylococcus Aureus，MRSA）愈加了解，其對公共衛(wèi)生的威脅已有所下降。然而，這并不意味著所有的謎團都已解開。比利時科研人員對豬肉生產(chǎn)鏈中的MRSA傳播進行了廣泛的研究，并對多株分離株進行了分類。

當然，這已經(jīng)不是2007年了。在那一年，人們都在圍繞耐甲氧西林金黃色葡萄球菌（Methicillin-Resistant Staphylococcus Aureus，MRSA）這一炙熱的話題進行國際性討論。該耐藥菌一開始在荷蘭的豬群中發(fā)現(xiàn)，隨后周邊國家的豬群也相繼出現(xiàn)。直至這些年，MRSA主要影響免疫力下降的住院病人，例如對老年人；對老年人來說，該細菌可能是致命的。因而，在養(yǎng)豬生產(chǎn)中發(fā)現(xiàn)有MRSA的存在，引起人們對畜牧業(yè)生產(chǎn)中使用抗生素及其對引起細菌耐藥性的潛在風險進行了廣泛討論。許多人擔心人類健康可能會因此受到威脅。

在2013年，人們對MRSA已經(jīng)有了較多的了解，來自農(nóng)業(yè)和漁業(yè)研究所（Institute for Agricultural and Fisheries Research，ILVO）的食品安全研究主任Marc Heyndrickx教授說：“我們現(xiàn)在知道與家畜相關的MRSA并不會直接威脅人類，基于這一點，我們無須像6年前那樣過分擔心。然而，所不同的是MRSA的特性在于其有很強的適應性。它能夠很容易地獲得及丟失某些基因，因而能輕易地轉移某些抗性基因。從長遠來看，這可能是需要提防的地方，因此與家畜相關的MRSA威脅并沒有完全消除。”

Heyndrickx說到的是與家畜相關的MRSA——因為并不是所有的MRSA都一樣。常規(guī)的做法是將MRSA分為3種不同的類型，它們都具有（略微）不同的基因組成和毒力。顧名思義，醫(yī)院獲得性MRSA主要存在于醫(yī)院，可感染老年人和免疫力低下的人群，如重癥監(jiān)護病人。此外，還有一種類型的MRSA被定義為“社區(qū)獲得性MRSA”。ILVO的食品安全研究員Marijke Verhegghe博士解釋稱：“這類變種相對來說已為人所知。社區(qū)獲得性MRSA在普通人群中廣泛傳播，并已對醫(yī)院使用的某些抗生素慢慢產(chǎn)生了耐藥性。社區(qū)獲得性MRSA毒力較強，但通常其對抗生素的耐藥性不是很高。”

Verhegghe解釋說，在歐洲，家畜相關的MRSA一般來源于ST398克隆株。“在畜牧業(yè)生產(chǎn)中可以發(fā)現(xiàn)這點，而且在養(yǎng)豬生產(chǎn)中，該病毒能感染人。在醫(yī)院很少發(fā)現(xiàn)這種類型的MRSA，這已得到多項研究證實。此外，該克隆株通常對畜牧業(yè)生產(chǎn)中使用的抗生素具有耐藥性，甚至對在醫(yī)院使用的抗生素也有一定程度的耐藥性。

1 臨床試驗

家畜相關的MRSA可能不太容易傳播到醫(yī)院，但它是如何在農(nóng)場傳播并最終導致豬肉污染呢？為了更多地了解MRSA可能利用的確切傳播途徑，在2009～2012年，Verhegghe在比利時的農(nóng)場中進行了廣泛研究。該研究主要在羅斯勒周邊地區(qū)進行，該地區(qū)位于法蘭德斯生豬養(yǎng)殖區(qū)的中心地帶。由于混合型農(nóng)場在比利時是相對普遍的現(xiàn)象，因而她將這一現(xiàn)象也包括在研究中。屠宰場和屠宰程序在她的概述中都有提及。

Verhegghe的研究分為4個步驟：

● 首先，調(diào)查30家農(nóng)場，并采集MRSA病例的樣本。

● 其次，選取4家農(nóng)場，對每家農(nóng)場的12頭母豬產(chǎn)下的仔豬從出生直至屠宰進行監(jiān)測。

● 再次，在豬運往屠宰場的過程中，采集各組中一頭豬的胴體樣本。

● 最后，分析食物鏈——來自屠宰場的豬肉是否存在MRSA？

在研究MRSA的侵襲路徑時，鑒別和分類的問題又一次出現(xiàn)。由于MRSA基因組的適應性極強，似乎存在很多分離株，因而需要一種先進有效的方法用以鑒定某一時期何種MRSA分離株占主導。在研究了幾種分型方法之后，相對較新的MLVA分型法應運而生，全稱為“多位點可變數(shù)目串聯(lián)重復序列分析”，該方法能有效區(qū)分MRSA分離株。

根據(jù)縱向研究的結果制成圖1，由此可有助于了解眾多遺傳變種菌株。在豬生長的不同階段，通常會發(fā)現(xiàn)MRSA的不同菌株。一些菌株在每個農(nóng)場均有出現(xiàn)，一些在部分農(nóng)場出現(xiàn)，而另一些在下次檢測時出現(xiàn)或已消失。

2 高和低的定植率

第1步的結果：對30家農(nóng)場進行檢測，與農(nóng)場中其他動物相比，豬明顯更易感染MRSA。在30家農(nóng)場中，10家農(nóng)場只飼養(yǎng)豬，10家農(nóng)場混合飼養(yǎng)豬和家禽，另外10家農(nóng)場同時飼養(yǎng)豬和牛。在這30家農(nóng)場的26家中，發(fā)現(xiàn)豬存在MRSA定植。在混合飼養(yǎng)的農(nóng)場中，從家禽和牛中也能分離到耐藥菌株，但耐藥性不及在豬中分離的菌株強（表1）。

研究的第2步，對生豬生產(chǎn)各個階段的MRSA流行情況進行縱向研究，得出了不平常的結論。可以明顯區(qū)分所謂的“高定植率”和“低定植率”農(nóng)場。如圖2所示，在高定植農(nóng)場（農(nóng)場C和D），母豬在產(chǎn)仔時已有MRSA定植，仔豬在剛出生后出現(xiàn)了MRSA定植，僅幾天后定植率高達100 %。另一方面，在低定植率農(nóng)場（農(nóng)場A和B），仔豬在哺乳期并未出現(xiàn)或僅有少量的MRSA定植。一旦仔豬進入斷奶期，MRSA定植數(shù)急劇上升。

有多種理論可以解釋這其中的差別。Verhegghe指出了一種可能性，即斷奶應激可能在MRSA感染過程中發(fā)揮重要作用。Heyndrickx做了以下假設，“很可能是當仔豬感染甲氧西林敏感金黃色葡萄球菌（Methicillin-Susceptible Staphylococcus Aureus，MSSA）或其他金黃色葡萄球菌時，感染MRSA的機會會減少。即使相互感染，不同的金黃色葡萄球菌會為了自己的生存位置競爭，而且有跡象表明，當MSSA已經(jīng)存在時，MRSA不易定植。當斷奶后使用對其他金黃色葡萄球菌敏感的抗生素時，MRSA會有更多的定植機會。” 最后出現(xiàn)的情況是，當豬年齡增長且抗生素使用減少時，在之后的肥育期MRSA的發(fā)病率會再次回落。

總而言之，農(nóng)場中的仔豬和母豬都可能是感染源。有證據(jù)表明，環(huán)境也可能發(fā)揮一定的作用。此外，Verhegge還總結了其他一些結論。在用遺傳手段標記了一些分離株后，她發(fā)現(xiàn)極少有分離株在感染中真正能占據(jù)主導地位；母豬中的MRSA分離株與其所產(chǎn)仔豬的MRSA分離株并不總是一致；有些MRSA分離株有區(qū)域特異性；有些可能與環(huán)境有關。

3 屠宰場

第3步在一家屠宰場進行，從一批豬的40個半片胴體中進行棉拭采樣：每片胴體采食6個不同的部位——后肢、腹部、背部、小腸腔、胸骨和前肢。在47 %的胴體樣本中發(fā)現(xiàn)了家畜相關的MRSA。大部分MRSA發(fā)現(xiàn)于前肢樣本。Verhegghe認為，“這最可能與去除內(nèi)臟過程中對前肢的關注相對較少有關。值得一提的是，這僅是在一家衛(wèi)生狀況極佳的屠宰場得到的研究結果。”

最后一步，在4家肉食店進行豬肉檢測——再次采集6種不同的豬肉類型樣本。在6周的時間里，從排骨、培根、肉末、肋骨、耳朵和前肢采集樣本。在檢測的所有類型的豬肉樣本中，超過50 %檢測到了MRSA，不過大部分樣本的污染水平較低。檢測發(fā)現(xiàn)肋骨、前肢和耳朵最容易被污染，其中耳朵樣本污染率達到100 %。Verhegghe評論說：“排骨污染的原因容易解釋，這是因為在屠宰場搬運胴體或從卡車搬運到肉食店時，排骨通常容易被擠壓。前肢和耳朵容易污染的原因在于胴體燙毛時有時并不充分。”

4 研究意義

了解MRSA的所在及其如何傳播顯然會有助于生產(chǎn)者防止其進一步傳播。Verhegghe總結說：“因此更有效的衛(wèi)生措施可以有助于減少MRSA發(fā)生的次數(shù)。” 她指出，如果豬肉生產(chǎn)商與豬直接接觸，則應注意手部衛(wèi)生；同時應使用衛(wèi)生防護品，穿特殊的防護服。

退一步說，Verhegghe的發(fā)現(xiàn)以及國際研究勾勒出了豬肉總生產(chǎn)鏈和家畜相關性MRSA可能傳播路徑的一幅框架圖。

Heyndrickx說：“如果每天與豬接觸，在理論上家畜相關性MRSA可能會影響人類。據(jù)了解，養(yǎng)豬生產(chǎn)者、獸醫(yī)和屠宰場人員可能會攜帶MRSA細菌。但是，在正常情況下，與人體接觸24 h后MRSA會消失。 而且，由于MRSA很難在人與人之間傳播，即使豬場中同住一屋的人，或住在豬場但通常不進入豬舍的人員，都不容易攜帶該細菌。”對平常人來說，對豬肉進行適當?shù)呐腼儗苊獬霈F(xiàn)很多問題，因為高溫會殺死該細菌。Heyndrickx說：“一手拿著生肉，一手擦鼻子，很可能會傳播該細菌，但即使這樣，得病的可能性也很小。”□□

原題名：Following MRSA through the pig production chain（英文）

原作者：Vincent ter Beek