P16、ER、CEA在宮頸腺癌和子宮內(nèi)膜癌鑒別診斷中的臨床意義*

楊偉洪 鐘守軍 段立峰 米賢軍

宮頸腺癌（cervical adenocarcinoma）較鱗癌少見，而近年來有研究顯示，與宮頸鱗癌相比，宮頸原發(fā)腺癌發(fā)病率逐漸升高，在西方國家中宮頸腺癌在宮頸癌中占比為25%左右。據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道宮頸腺癌可發(fā)生于18~84歲婦女，其平均發(fā)病年齡與宮頸鱗癌相仿，約49歲左右，多發(fā)生于更年期婦女，近年發(fā)病有年輕化趨勢[1]。子宮內(nèi)膜腺癌和宮頸原發(fā)腺癌生物學(xué)行為均可向下擴(kuò)展與向上延伸，宮頸腺癌多數(shù)起源于宮頸管內(nèi)膜，最常見的為頸管內(nèi)膜型，它可向子宮內(nèi)膜方向分化形成子宮內(nèi)膜樣癌和透明細(xì)胞癌，亦可向輸卵管上皮方向分化形成漿液乳頭狀腺癌[2-3]。子宮內(nèi)膜腺癌也可以呈現(xiàn)漿液性改變，兩者有時(shí)在組織形態(tài)上具有相似之處，在活檢和診刮標(biāo)本中來依靠形態(tài)學(xué)區(qū)分兩者比較困難的。兩者的治療及手術(shù)方式不同，因此宮頸腺癌和子宮內(nèi)膜腺癌的鑒別診斷很重要。本研究采用SP免疫組化法檢測32例子宮頸腺癌和32例子宮內(nèi)膜腺癌中P16、ER和CEA蛋白的表達(dá)情況并進(jìn)行回顧性分析，現(xiàn)報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取本院2003年1月-2014年1月確診原發(fā)性宮頸腺癌標(biāo)本32例及子宮內(nèi)膜腺癌32例石蠟包埋標(biāo)本，

其中宮頸腺癌組患者年齡30~72歲，中位年齡45.2歲；子宮內(nèi)膜腺癌組年齡28~68歲，中位年齡43.8歲。

1.2 試劑與方法 ER鼠抗人單克隆抗體、CEA單克隆抗體購自上海長嘉生物技術(shù)有限公司，P16單克隆抗體購自美國羅氏生物技術(shù)有限公司，為即用型抗體，免疫組化試劑盒以及DAB顯色劑均購自美國羅氏公司。石蠟切片常規(guī)脫蠟后應(yīng)用全自動免疫組化染色儀（美國羅氏公司）進(jìn)行免疫組化染色，每批染色設(shè)置均設(shè)已知陽性及陰性對照。

1.3 結(jié)果判斷 P16蛋白陽性定位于胞核和/或胞質(zhì)，ER蛋白陽性定位于細(xì)胞核，CEA蛋白陽性定位于胞質(zhì)和/或胞膜。根據(jù)陽性細(xì)胞在組織中所占面積分為4個(gè)等級：<5%為（-）、5~10%為弱（+）或可疑（+）、10%~30%為陽性，≥30%為強(qiáng)陽性。陰性、弱陽性及可疑陽性組合并為陰性病例組，陽性及強(qiáng)陽性合并為陽性病例組。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用SPSS 17.0軟件對收集的數(shù)據(jù)進(jìn)行整理與統(tǒng)計(jì)分析，計(jì)數(shù)資料采用 字2檢驗(yàn)，P<0.05為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

P16、ER和CEA陽性表達(dá)率在子宮頸腺癌中分別為65.63%（21/32）、28.13%（9/32）、81.25%（26/32）， 而 在子宮內(nèi)膜腺癌中分別為9.36%（3/32）、75.00%（24/32）、43.75%（14/32）。子宮頸腺癌中P16、CEA陽性表達(dá)率高于子宮內(nèi)膜腺癌中（P<0.05），子宮內(nèi)膜腺癌中ER的陽性表達(dá)率明顯高于子宮頸腺癌（P<0.05），見表1。

表1 P16、ER和CEA在宮頸腺癌及子宮內(nèi)膜腺癌組織中的表達(dá) 例（%）

3 討論

子宮內(nèi)膜腺癌屬于婦科常見惡性腫瘤，其發(fā)病率居高不下。近年來，宮頸腺癌發(fā)病率也逐漸提高。宮頸原發(fā)腺癌和子宮內(nèi)膜癌的來源通常難以判定，臨床診斷中通常難以對子宮頸原發(fā)腺癌、宮體下段子宮內(nèi)膜腺癌予以診斷，特別是采用診刮方法診斷時(shí)，更難以得到準(zhǔn)確的診斷結(jié)果。即使在患者手術(shù)后對患者子宮全切標(biāo)本展開分析，對兩者展開組織學(xué)定位也存在一定難度。然而，在臨床治療中，對子宮內(nèi)膜腺癌、宮頸原發(fā)腺癌予以準(zhǔn)確診斷，是確定有效治療措施、選定合理手術(shù)方案、對預(yù)后進(jìn)行轉(zhuǎn)歸評價(jià)的必要條件，子宮頸腺癌與子宮內(nèi)膜樣腺癌具有不同的手術(shù)方式和治療方案，患者的預(yù)后也不同，如子宮內(nèi)膜腺癌對激素治療敏感性好，患者預(yù)后較好，然而宮頸腺癌對激素治療并不敏感，如將宮頸腺癌誤診為子宮內(nèi)膜腺癌則會影響患者治療效果，導(dǎo)致治療最佳時(shí)機(jī)延誤，故而探討兩者有效的診斷方法具有重要意義。

原發(fā)性宮頸腺癌近年在普通人群中的發(fā)病率有逐漸上升的趨勢。腫瘤大體上無特征性改變。組織學(xué)可分為以下幾種類型：黏液性腺癌、子宮內(nèi)膜樣腺癌、透明細(xì)胞腺癌、漿液性腺癌、中腎腺癌等[4]。其中宮頸管亞型是最常見的類型，約占宮頸腺癌的70%，鏡下表現(xiàn)類似頸管上皮細(xì)胞，并有黏液分泌，黏液不顯著時(shí)不易與侵犯宮頸的子宮內(nèi)膜腺癌區(qū)分。子宮內(nèi)膜樣腺癌亞型僅在高分化時(shí)才有可能從形態(tài)上與子宮內(nèi)膜腺癌鑒別。本次研究通過免疫組化方法對子宮內(nèi)膜腺癌、宮頸原發(fā)腺癌組織中的P16、ER、CEA等表達(dá)情況進(jìn)行檢查，探討P16、ER、CEA檢查在兩者鑒別診斷中的應(yīng)用價(jià)值，以期為臨床提供有力依據(jù)。

基因P16是一種定位于人類染色體9p21的腫瘤抑制基因，該區(qū)域容易出現(xiàn)染色體雜合、倒置及易位等現(xiàn)象，是細(xì)胞周期調(diào)節(jié)蛋白之一，它可競爭抑制細(xì)胞素DI與CDK4結(jié)合，并特異性地抑制CDK4的活性，使抑癌基因Rb的蛋白處于非磷酸化的活性狀態(tài)，從而阻止細(xì)胞由Gl期進(jìn)入S期，抑制細(xì)胞繁殖。若P16ink4A基因出現(xiàn)突變，可導(dǎo)致細(xì)胞異常增生。Negri等[5]通過免疫組化檢測28例宮頸原位腺癌與浸潤性宮頸腺癌時(shí)，發(fā)現(xiàn)P16陽性表達(dá)率100%，而高危HPV感染率100%，由此可知P16屬于宮頸腺癌標(biāo)志物。生物學(xué)研究表明，宮頸原發(fā)腺癌與高危型HPV關(guān)系密切[6]，高危型HPV E7病毒蛋白可與Rb結(jié)合并使其失活.導(dǎo)致P16蛋白的過度表達(dá)[7-8]。P16在宮頸原發(fā)腺癌中彌漫陽性或強(qiáng)陽性表達(dá)，在子宮內(nèi)膜癌中陰性或弱陽性表達(dá)[9-11]。從這一結(jié)論可知，在子宮內(nèi)膜腺癌、宮頸原發(fā)腺癌鑒別診斷中P16可發(fā)揮重要的應(yīng)用價(jià)值。有研究顯示，ER在在宮頸內(nèi)膜腺癌中并無表達(dá)，而在子宮內(nèi)膜腺癌中有所表達(dá)。Alkushi等[12]報(bào)道ER在子宮內(nèi)膜腺癌中有較強(qiáng)表達(dá)，陽性率在70%~90%之間，在宮頸原發(fā)腺癌中通常為弱表達(dá)，陽性率在10%~40%之間；CEA是提取自胎兒腸、結(jié)腸腺癌的腫瘤相關(guān)抗原，是內(nèi)胚層分化縮短，其在腫瘤組織內(nèi)陽性表達(dá)率較高。正常組織中膽囊上皮細(xì)胞、胃腸中均有CEA的表達(dá)，而宮頸腺癌、宮頸鱗癌中均有表達(dá)，故而CEA并無明顯特異性。相關(guān)研究顯示，在宮頸原發(fā)腺癌中大多呈廣泛陽性或強(qiáng)陽性表達(dá)，陽性率為50%~100%，子宮內(nèi)膜腺癌中常呈灶性表達(dá)，陽性率為0~50%。

在本研究中，P16、ER、CEA在宮頸原發(fā)腺癌中的陽性表達(dá)率分別為65.63%、28.13%、81.25%，在子宮內(nèi)膜腺癌中則分別為9.36%、75.00%、43.75%，P16、CEA在子宮頸腺癌多數(shù)病例中廣泛陽性或強(qiáng)陽性表達(dá)而在子宮內(nèi)膜腺癌中灶性弱陽性或陰性表達(dá)，ER在子宮內(nèi)膜腺癌中高表達(dá)而在宮頸腺癌中低表達(dá)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，與之前的報(bào)道基本一致[13-15]，提示P16、ER、CEA蛋白聯(lián)合檢測表達(dá)作為輔助性的免疫組織化學(xué)標(biāo)記來鑒別子宮頸腺癌和子宮內(nèi)膜腺癌具有較好的臨床應(yīng)用價(jià)值。

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