復方苦參腔內灌注治療對惡性胸腔積液患者胸水中VEGF、MMP含量的影響

張振安，安 靜，張風林，袁亞軍

(唐山市人民醫院唐山市腫瘤醫院呼吸科，河北 唐山 063000)

復方苦參腔內灌注治療對惡性胸腔積液患者胸水中VEGF、MMP含量的影響

張振安，安 靜，張風林，袁亞軍

(唐山市人民醫院唐山市腫瘤醫院呼吸科，河北 唐山 063000)

目的 探討復方苦參腔內灌注治療對惡性胸腔積液患者胸水中VEGF、MMP含量的影響。方法選擇在本院接受住院治療的惡性胸腔積液患者作為研究對象，隨機分為接受常規胸腔內化療的對照組及接受復方苦參腔內灌注治療的觀察組，比較兩組患者的治療后胸水VEGF、MMP含量及T細胞亞群分布差異。結果(1)觀察組患者接受治療后的VEGFA、VEGFB、VEGFC水平均顯著低于對照組患者(P＜0.05)；(2)觀察組患者接受治療后的胸水MMP-2及MMP-9含量均顯著低于對照組患者(P＜0.05)；(3)觀察組患者接受治療后的CD3+、CD4+、CD4+/CD8+水平均明顯高于對照組患者(P＜0.05)。結論復方苦參腔內灌注治療可以明顯降低患者胸水VEGF、MMP含量，優化機體免疫功能。

惡性胸腔積液；復方苦參；VEGF；MMP

惡性腫瘤晚期多可出現惡性胸腔積液，患者可在短期內出現呼吸困難、血液循環障礙燈胸腔大量積液表現，嚴重影響正常生活。胸腔穿刺抽吸積液是減少惡性胸水患者胸腔積液量、緩解呼吸癥狀的有效方式，在胸水明顯減少后胸腔內注入化療藥物可以抑制病情、減緩胸水產生速度，改善患者的生存質量[1]。復方苦參為一類具有抑制腫瘤細胞增殖轉移的中成藥物，其毒副作用小，且可增強患者免疫功能，是與化療藥物聯用于胸腔注射的理想藥物[2]。本文旨在探討復方苦參腔內灌注治療對惡性胸腔積液患者胸水中血管內皮生長因子(VEGF)、基質金屬蛋白酶(MMP)含量的影響。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇于2013年6月至2014年6月間在本院住院治療的惡性胸腔積液患者76例作為研究對象，原發腫瘤均經病理組織學及細胞學檢查證實，B超現實胸腔中大量積液且于其中找到癌細胞，排除低蛋白血癥、心力衰竭等其他引發胸腔積液因素。所有患者及其家屬在了解研究過程后均簽署知情同意書。按照隨機數表法將所有入組患者分為接受常規化療的對照組和在常規治療基礎上加入復方苦參腔內灌注治療的觀察組，每組各38例。觀察組患者中男性21例，女性17例，年齡48～83歲，平均(67.12±8.04)歲，全身狀況卡氏評分61～83分，平均(70.72±5.83)分，原發腫瘤中肺癌23例，乳腺癌6例，卵巢癌5例，其他4例；對照組患者中男性20例，女性18例，年齡47～82歲，平均(66.53±7.12)歲，全身狀況卡氏評分62～82分，平均(70.41±5.65)分，原發腫瘤中肺癌21例，乳腺癌7例，卵巢癌5例，其他5例。兩組患者的基線資料差異無統計學意義，P＞0.05，具有可比性。

1.2 治療方法 經B超定位后進行胸腔穿刺置入中心靜脈導管，間斷負壓引流抽吸積液，至B超復查證實為少量積液后，對照組給予胸腔注射卡鉑400 mg+地塞米松5 mg+生理鹽水30 ml，囑患者緩慢變換體位，以利于藥物分布。觀察組患者額外胸腔注射復方苦參注射液30 ml。以上治療每周進行一次，以4次為一個療程，連續治療兩個療程以上。

1.3 觀察指標

1.3.1 VEGF水平 接受不同治療方案前1 d及治療后1 d抽取患者胸水5 ml，采用酶聯免疫吸附法檢測胸水中的血管內皮生長因子A(VEGFA)、血管內皮生長因子B(VEGFB)、血管內皮生長因子C(VEGFC)水平，測定時嚴格按照試劑盒說明進行操作。

1.3.2 MMP水平 接受不同治療方案前后抽取患者胸水5 ml，采用酶聯免疫吸附法檢測基質金屬蛋白酶-2(MMP-2)及基質金屬蛋白酶-9(MMP-9)含量，測定時嚴格按照試劑盒說明進行操作。

1.3.3 淋巴細胞亞群 接受不同治療方案前后抽取患者外周靜脈血5 ml，采用ELISA法測定T細胞亞群分布情況，具體包括CD4+、CD8+、CD4+/CD8+。

1.4 統計學方法 采用SPSS18.0軟件對上述數據進行統計學分析，計量資料以均數±標準差(±s)表示，組間比較采用t檢驗、計數資料采用χ2檢驗，經P＜0.05為差異具有統計學意義。

2 結果

2.1 VEGF水平比較 治療前兩組患者的外周血VEGF水平比較差異均無統計學意義(P＞0.05)，觀察組患者接受治療后的VEGFA、VEGFB、VEGFC水平均顯著低于對照組，差異均有統計學意義(P＜0.05)，見表1。

表1 兩組患者接受不同治療方案前后的VEGF水平比較(±s，pg/ml)

表1 兩組患者接受不同治療方案前后的VEGF水平比較(±s，pg/ml)

組別治療前治療后觀察組對照組t值P值VEGFA 291.09±46.32 287.13±45.09 0.573＞0.05 VEGFB 351.67±61.09 353.21±63.35 0.438＞0.05 VEGFC 221.57±38.32 213.44±37.65 0.653＞0.05 VEGFA 86.76±11.12 223.43±31.17 6.482＜0.05 VEGFB 123.23±18.44 314.68±51.33 5.375＜0.05 VEGFC 74.65±9.23 187.78±23.36 7.523＜0.05

2.2 MMP水平比較 治療前兩組患者的胸水MMP水平比較差異均無統計學意義(P＞0.05)，觀察組患者接受治療后的胸水MMP-2及MMP-9含量均顯著低于對照組，差異均有統計學意義(P＜0.05)，見表2。

2.3 T細胞亞群分布比較 治療前兩組患者的T細胞亞群分布差異均無統計學意義(P＞0.05)，觀察組患者接受治療后的CD3+、CD4+、CD4+/CD8+水平均明顯高于對照組，差異均有統計學意義(P＜0.05)，見表3。

表2 兩組患者接受不同治療前后的MMP水平比較(±s，mg/L)

表2 兩組患者接受不同治療前后的MMP水平比較(±s，mg/L)

觀察組對照組t值P值281.27±31.82 279.14±30.26 0.374＞0.05 198.23±23.19 201.37±29.38 0.734＞0.05 116.27±11.04 218.63±19.37 6.492＜0.05 102.72±12.45 163.11±28.43 5.291＜0.05

表3 兩組患者接受不同治療前后的T細胞亞群分布情況比較(±s)

表3 兩組患者接受不同治療前后的T細胞亞群分布情況比較(±s)

組別治療前治療后觀察組對照組t值P值CD3+(%) 50.04±2.17 49.45±2.65 0.342＞0.05 CD4+(%) 41.18±3.66 41.54±4.43 0.264＞0.05 CD4+/CD8+1.73±0.23 1.68±0.15 0.546＞0.05 CD3+(%) 54.54±4.47 48.13±2.56 4.243＜0.05 CD4+(%) 43.43±4.23 38.09±3.76 5.135＜0.05 CD4+/CD8+2.24±0.33 1.71±0.19 4.535＜0.05

3 討論

惡性胸腔積液是惡性腫瘤晚期常見并發癥，原發病灶以肺癌、乳腺癌及惡性淋巴瘤多見。惡性胸腔積液產生迅速，患者可伴有呼吸困難及低蛋白血癥，嚴重者出現肺不張及感染，對患者的生活質量亦造成巨大沖擊。中大量惡性胸腔積液患者最為明顯的臨床癥狀是呼吸困難，穿刺抽吸胸腔積液是改善患者呼吸癥狀最為直接與有效的方式。目前臨床多推薦在抽取胸腔積液后，腔內關注化療藥物以控制積液產生速度、緩解臨床癥狀，盡可能延長患者有質量的生存時間[3-4]。

胸腔反復注射化療藥物雖然可以取得確切療效，但是單純重復局部應用化療藥物，對于一般狀況較好的患者治療強度偏弱，不利于療效的鞏固。復方苦參注射液是一種主要成分為苦參堿、氧化苦參堿的純中藥制劑，其可抑制腫瘤細胞的DNA合成、抑制相關酶活性、阻斷腫瘤細胞的正常周期、誘導腫瘤細胞凋亡，同時苦參堿具有止血止痛、增強機體免疫能力的作用，且目前臨床尚未報道其具有明顯毒副作用[5-6]。故復方苦參注射液有望配伍化療藥進行胸腔內注射，鞏固甚至擴大治療效果，改善患者的全身狀態。

VEGF是目前已知的促血管新生能力最明確的細胞因子，包括VEGFA、VEGFB、VEGFC等多種亞型，通過結合相應受體激活信號通路，進而促進血管內皮細胞增殖遷移以生成新血管[7]。新生血管是惡性腫瘤生存及增殖的基礎，惡性腫瘤患者血清及體液中的VEGF含量大幅上升，且其水平與腫瘤分期密切相關[8]。本次研究中我們檢測了治療前后患者胸水中的VEGF含量，結果顯示治療前患者胸水中的VEGF含量大幅高于正常水平，但兩組間差異無統計學意義(P＞0.05)，治療后兩組患者的VEGF各亞型水平均有所降低，其中觀察組患者的VEGF亞型水平顯著低于對照組患者(P＜0.05)。由此可見復方苦參胸腔灌注可以顯著降低患者的VEGF含量，減弱腫瘤血管新生。

在腫瘤細胞向血管遷移及侵入的過程中，基底膜及細胞外基質降解是關鍵步驟，在該過程中腫瘤細胞分泌的基質金屬蛋白酶MMP-2和MMP-9起到重要作用[9]。MMP-2和MMP-9可降解粘連蛋白，并在此基礎上催化具有活性的可溶性片段，參與到腫瘤細胞的增殖遷移中去。目前有研究[10]顯示，MMP-2及MMP-9陽性患者的無瘤生存期及5年生存率均顯著低于陰性患者。在上述研究中，我們同樣檢測了治療前后患者胸水中的MMP水平，結果顯示治療前兩組患者的胸水MMP-2、MMP-9含量高于正常人，但組間差異無統計學意義(P＞0.05)，接受治療后兩組患者的MMP-2、MMP-9含量均降低，但是觀察組患者降幅更大，與對照組比較差異有統計學意義(P＜0.05)。由此可見，復方苦參胸腔灌注可以顯著降低患者的胸水MMP含量，降低腫瘤細胞遷移能力，對于抑制患者病情進展具有積極作用。

在制約腫瘤細胞活性的同時，增強患者自身免疫功能是緩解患者病情的重要途徑[11]。本研究中，我們觀察了兩組患者治療前后T淋巴細胞分布情況，結果顯示治療前兩組間差異無統計學意義(P＞0.05)，治療后觀察組患者接受治療后的CD3+、CD4+、CD4+/CD8+水平均明顯高于對照組患者(P＜0.05)。CD3+淋巴細胞代表全T淋巴細胞、CD4+淋巴細胞代表輔助性T淋巴細胞，CD8+代表抑制性T淋巴細胞[12]，CD3+、CD4+、CD4+/ CD8+水平的上升標志著患者細胞免疫功能增強，說明胸腔內注射復方苦參有助于患者免疫功能的提升，對于其整體病情的控制具有積極的意義。

綜上所述，復方苦參腔內灌注治療可以明顯降低患者胸水VEGF、MMP含量，優化機體免疫功能，值得臨床上推廣應用。

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Effect of compound matrine intracavity perfusion on VEGF,MMP levels in hydrothorax in patients of malignant pleural effusion.

ZHANG Zhen-an,AN Jing,ZHANG Feng-lin,YUAN Ya-jun.
Department of Respiratory Medicine,Tangshan People's Hospital,Tangshan Cancer Hospital,Tangshan 063000,Hebei,CHINA

ObjectiveTo analyze the effect of compound matrine intracavity perfusion on vascular endothelial growth factor(VEGF),matrix metalloproteinase(MMP)levels in hydrothorax in patients of malignant pleural effusion.MethodsPatients with malignant pleural effusion in our hospital were selected as research objects,which were randomly divided into control group with conventional intrathoracic chemotherapy and observation group with compound matrine intracavity perfusion.VEGF,MMP levels and T cell subgroup distribution were compared between the two groups after treatment.Results(1)VEGFA,VEGFB,VEGFC levels after treatment in observation group were significantly lower than those in the control group(P＜0.05).(2)The levels of MMP-2 and MMP-9 after treatment in observation group were significantly lower than those in control group(P＜0.05).(3)The levels of CD3+,CD4+,CD4+/CD8+after treatment in observation group were significantly higher than those in control group(P＜0.05).ConclusionCompound matrine intracavity perfusion could significantly decrease VEGF,MMP content in hydrothorax in patients of malignant pleural effusion,and optimize body's immune function.

Malignant pleural effusion;Compound matrine;Vascular endothelial growth factor(VEGF);Matrix metalloproteinase(MMP)

R655

A

1003—6350（2015）02—0166—03

10.3969/j.issn.1003-6350.2015.02.0059

2014-07-21)

河北省中醫藥學會資助項目(編號：20132106)

張振安。E-mail：dr_zhangjian@163.com