原發性高血壓伴頸動脈粥樣硬化與脂蛋白相關磷脂酶A2活性水平相關性研究

陳世豪，譚柏松，張偉堅

（南方醫科大學附屬新會醫院檢驗科，廣東 江門 529100）

原發性高血壓伴頸動脈粥樣硬化與脂蛋白相關磷脂酶A2活性水平相關性研究

陳世豪，譚柏松，張偉堅

（南方醫科大學附屬新會醫院檢驗科，廣東 江門 529100）

目的 探討原發性高血壓(EH)患者伴發頸動脈粥樣硬化(CAS)病變與脂蛋白相關磷脂酶A2 (Lp-PLA2)的相關性。方法采用ELISA方法檢測130例EH患者和50例健康人群(健康對照組)的血漿Lp-PLA2水平，根據頸動脈彩超檢查結果，130例EH患者中伴發CAS者75例，其中無斑塊18例，穩定斑塊32例，不穩定斑塊25例。結果EH伴發CAS者的Lp-PLA2中位數水平為(98～589)ng/ml，平均258 ng/ml，明顯高于單純EH者[102(59～195)ng/ml]和健康對照組[68(10～153)ng/ml]，P＜0.01；血漿Lp-PLA2診斷EH伴發CAS的ROC曲線AUC為0.971，當以177.5 ng/ml為臨界值時，其敏感度、特異性、陽性預測值、陰性預測值和準確性分別為85.3% (64/75)、97.1%(102/105)、95.5%(64/67)、90.3%(102/113)、92.2%(166/180)。EH伴發CAS患者中無斑塊組、穩定斑塊組、不穩定斑塊組Lp-PLA2水平分別平均為169 ng/ml、249 ng/ml、372 ng/ml，三組間差異有統計學意義。結論Lp-PLA2檢測對EH患者早期CAS有預測意義，為CAS早期診斷和干預治療提供積極的參考價值。

原發性高血壓；頸動脈粥樣硬化；脂蛋白相關磷脂酶A2

動脈粥樣硬化(AS)是心腦血管并發癥的病理基礎，原發性高血壓(EH)患者是促進AS發生的高危人群，心腦血管疾病致殘、致死率極高，如何早期識別AS，并進一步早期干預成為研究熱點。AS是一種炎癥性疾病，在粥樣斑塊形成、進展和最終破裂的過程中均有炎癥性反應介質的參與。脂蛋白相關磷脂酶A2(Lp-PLA2)是近年來炎性反應介質的熱點，其具有促進動脈粥樣硬化作用，與心腦血管疾病密切相關[1-2]。本研究探討原發性高血壓患者中Lp-PLA2與頸動脈硬化的關系，為早期EH人群的動脈粥樣硬化提供預測價值。

1 資料與方法

1.1 研究對象 收集2013年6月至2014年3月在本院內科確診為EH患者130例，其中男性80例，女性50例；年齡31～93歲，平均(58±13)歲，所有患者均符合2010年修訂版的《中國高血壓防治指南》的診斷標準，進行頸動脈彩超[頸動脈內中膜厚度(IMT≥0.9或有動脈粥樣斑塊)]確診75例頸動脈硬化患者(EH伴發AS組)，根據斑塊顯示無斑塊18例，穩定斑塊32例，不穩定斑塊25例。此外55例為單純EH患者，同時選取健康人群50例作為健康對照組，排除心腦血管疾病及腫瘤等疾病。所有待測者均抽取空腹晨血3 ml EDTA抗凝，分離血漿-20℃保存。

1.2 檢測方法 采用ELISA方法檢測Lp-PLA2，試劑由天津康爾克生物技術有限公司提供批號140201，嚴格按照試劑盒說明書操作，標準品及質控品為原裝配套試劑。測定儀器為瑞士TECAN全自動酶免分析儀。

1.3 統計學方法 應用SPSS13.0軟件進行數據統計分析，血漿Lp-PLA2檢測數據呈偏態分布，采用中位數表示，以非參數檢驗比較各組的Lp-PLA2差異，并采用ROC曲線確定最佳臨界值和ACU，同時對不同組合的檢測效能進行評價。以P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 各組血漿Lp-PLA2水平比較 EH伴發AS組血漿Lp-PLA2水平與單純EH組及健康對照組比較，差異均有統計學意義(U值分別為191.0、40.0，P均＜0.01)；而單純EH組與健康對照組比較差異有統計學意義(U值為552.0，P＜0.01)，見表1。

表1 各組血漿Lp-PLA2水平比較[中位數(范圍)]

2.2 血漿Lp-PLA2水平在EH伴發AS患者中的臨界值確定和檢測效能評價 以單純EH患者組和健康對照組為陰性對照組(n=105)，用ROC曲線評價檢測效能，見圖1，最佳截斷值以177.5 ng/ml為臨界值，AUC為0.971，敏感度、特異性、陽性預測值、陰性預測值和準確性分別為85.3%(64/75)、97.1%(102/ 105)、95.5%(64/67)、90.3%(102/113)、92.2%(166/180)，顯示很好的檢測效能。

圖1 EH合并AS組與非AS組（單純EH和健康人群）ROC曲線分析

2.3 EH伴AS患者中各組血漿Lp-PLA2水平比較 無斑塊組、穩定斑塊組和不穩定斑塊組血漿Lp-PLA2水平經非參數檢驗，差異均有統計學意義(U值分別為58.0、1.0、62.5，P均＜0.01)，見表2。且從無斑塊至穩定性斑塊的出現到趨向不穩定的程度，血漿Lp-PLA2水平隨之升高。

表2 EH伴頸動脈硬化患者中各組別血漿Lp-PLA2水平比較[中位數(范圍)]

3 討論

動脈粥樣硬化是引發心腦血管病變的重要危險因素，研究發現原發性高血壓患者血壓變異性(BPV)是頸動脈粥樣硬化的重要影響因素[3]。頸動脈硬化的臨床診斷依賴頸動脈B超檢測，特異性的實驗室診斷指標較少，國外已研究脂蛋白相關磷脂酶A2(Lp-PLA2)作為炎性反應介質，具有促進動脈粥樣硬化作用，可作為評估早期心腦血管疾病的預測及治療預后的重要指標。

Lp-PLA2是由441個氨基酸殘基組成的一種絲氨酸脂酶，相對分子質量為45.4 KU，是非鈣依賴的磷脂酶，主要由成熟的巨噬細胞和淋巴細胞合成和分泌，并受炎性介質的調節[4]。血小板活化因子(PAF)具有促進炎性介質釋放的作用，從而發生炎癥反應及血栓的形成。Lp-PLA2作為血小板活化因子乙酰水解酶(PAF-AH)，具有降解PAF作用，阻止PAF的炎癥活動和血栓形成[5]，所以Lp-PLA2具有抗炎和抗AS作用。而在人類中只有大約10%的Lp-PLA2與HDL結合[6]，動物實驗證明HDL-Lp-PLA2具有抗AS作用。同時，流行病學研究中發現，Lp-PLA2的活性與HDL呈明顯的負相關性[7]，但具體的機制還不清楚。

另一方面，目前研究較多的是Lp-PLA2與LDL結合從而促進AS作用，結合在LDL上的Lp-PLA2隨LDL被運送到了血管壁上易受損傷的區域，在LDL生成氧化磷脂之后，Lp-PLA2就迅速將其水解生成有生物活性的促炎物質(lyso-PC和ox-NEFA)[8]，進而刺激細胞因子產生如TNF-α和IL-6，增加斑塊內炎癥反應，而斑塊中的炎癥細胞又產生更多的Lp-PLA2，導致刺激斑塊的持續增長，細胞因子和蛋白酶降解纖維帽的平滑肌細胞和膠原基質，使斑塊變得脆弱、破裂和脫落，致使動脈粥樣硬化，從而導致心腦血管疾病的發生。

在本研究中，血漿Lp-PLA2在EH伴發AS組中的水平顯著高于單純EH組和健康對照組，經非參數Mann-WhitneyU檢驗，差異有統計學意義。結果顯示，血漿Lp-PLA2具有血管炎癥特異性，提供動脈粥樣斑塊炎癥及穩定性的信息，在頸動脈硬化診斷中有一定的特異性。臨床研究證實Lp-PLA2水平是獨立于傳統心血管危險因子預測心血管事件的新的炎癥標志物。因此，我們確定以單純EH組及健康對照組為非頸動脈硬化組(n=105)，使用ROC曲線評價檢測效能，并確定臨界值為177.5 ng/ml(AUC為0.971)，可見，血漿Lp-PLA2水平對于EH患者頸動脈硬化有很好的檢測效能。

研究根據患者斑塊顯示性質分為無斑塊組、穩定斑塊組和不穩定斑塊三組進行血漿Lp-PLA2水平比較，經非參數Mann-WhitneyU檢驗，三組間均顯示差異有統計學意義，提示在動脈粥樣硬化斑塊處存在大量Lp-PLA2，Lp-PLA2參與斑塊的形成和發展，從無斑塊至穩定性斑塊的出現到趨向不穩定的程度，血漿Lp-PLA2水平隨之升高。Lp-PLA2作為動脈粥樣硬化性腦梗死的一個獨立風險預測因子已得到一些流行病學研究的證實[9-10]，其升高會增加缺血性卒中的風險。龍璐等[11]研究證實隨著Lp-PLA2的升高，急性缺血性腦卒中患者出現頸動脈硬化斑塊的可能性逐漸增大，而且斑塊性質從穩定逐漸趨向不穩定。此外，美國心臟病協會和國家膽固醇教育計劃提出，Lp-PLA2可以作為目前CHD最好的預測因子[12]，而國內徐冬玲等[13]有研究認為對冠心病患者Lp-PLA2檢測可輔助識別斑塊的穩定程度及斑塊局部炎癥反應的程度。由此可見，對于原發性高血壓這類心腦血管高危人群，隨著對Lp-PLA2生物學活性的深入闡明，檢測方法學的提高，Lp-PLA2對于其心腦血管疾病的早期的診斷和治療中的評估都有廣闊的應用前景。

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[9]Oei HHS,van der Meer IM,Hofman A,et al.Lipoprotein associated phospholipase A2activity is associated with risk of coronary heart disease and ischemic stroke:the Rotterdam Study[J].Circulation,2005,111(5):570-575.

[10]Jenny NS,Solomon C,Cushman M.Lipoprotein-associated phospholipaseA(2)[J].Atheroclerosis,2010,2:528-532.

[11]龍 璐,王鐘明,陳 貞,等.急性缺血性腦卒中患者血漿Lp-PLA2水平與頸動脈硬化斑塊穩定性及神經功能缺損程度的關系[J].檢驗醫學,2013,28(10):885-889.

[12]蔡人權,葉 平.脂蛋白相關磷脂酶A2對預測冠心病事件的臨床價值[J].放射免疫學雜志,2010,23(2):197-199.

[13]徐冬玲,劉軍妮,杜貽萌,等.脂蛋白相關磷脂酶與冠狀動脈易損斑塊的相關性[J].中華內科雜志,2009,48(8):651-654.

Correlation between lipoprotein-associated phospholipase A2 level and carotid atherosclerosis in patients with essential hypertension.

CHEN Shi-hao,TAN Bai-song,ZHANG Wei-jian.Department of Clinical Laboratory,Xinhui Hospital,Affiliated Hospital of Southern Medical University,Jiangmen 529100,Guangdong,CHINA

ObjectiveTo study the correlation of lipoprotein associated phospholipase A2(Lp-PLA2)with carotid atherosclerosis(CAS)in patients with essential hypertension(EH).MethodsThe levels of Lp-PLA2 were measured by ELISA in 130 patients of EH(EH group)and 50 healthy subjects(healthy control group)．According to the results of cervical vascular color Doppler ultrasound examination,there were 75 patients with CAS in 130 patients with EH,and were classified into non-plaque group(18 cases),stable plaque group(32 cases)and unstable plaque group(25 cases).ResultsThe median value of Lp-PLA2 was higher in EH patients with CAS[258(98～589)ng/ml]than that in EH patients[102(59～195)ng/ml]and in control subjects[68(10～153)ng/ml](P＜0.01).The area under the ROC curve(AUC)was 0.971.When cutoff value of the Lp-PLA2 was 177.5 ng/ml,the diagnostic sensitivity,specificity,positive predictive value,negative predictive value and accuracy rate were 85.3%(64/75),97.1%(102/105), 95.5%(64/67),90.3%(102/113),92.2%(166/180).The median value of Lp-PLA2 were 169(98～265)ng/ml, 249(145～364)ng/ml,372(259～589)in EH patients with CAS in non-plaque group,stable plaque group and unstable plaue group,respectively.There was statistically significant difference among the three groups.ConclusionLp-PLA2 detection has significance for prediction of early CAS in patients with EH,and can provide a positive reference value for early diagnosis and intervention of CAS.

Essential hypertension;Carotid atherosclerosis;Lipoprotein associated phospholipaseA2

R544.1

A

1003—6350（2015）03—0380—03

10.3969/j.issn.1003-6350.2015.03.0136

2014-06-16)

陳世豪。E-mail：mandychen1999@163.com