血FFA、Hcy和Cys-C測定在糖尿病腎病早期診斷中的應用價值

陳 薇，童秀峰，黎安玲，胡漢寧

（1.武漢大學中南醫院檢驗科，湖北 武漢 430071；2.鄂州市梁子湖區醫院檢驗科，湖北 鄂州 436060）

血FFA、Hcy和Cys-C測定在糖尿病腎病早期診斷中的應用價值

陳 薇1，童秀峰2，黎安玲1，胡漢寧1

（1.武漢大學中南醫院檢驗科，湖北 武漢 430071；2.鄂州市梁子湖區醫院檢驗科，湖北 鄂州 436060）

目的 研究游離脂肪酸(FFA)、同型半胱氨酸(Hcy)、胱抑素C(Cys-C)等指標血清水平與2型糖尿病(T2DM)各階段的關系以及應用價值。方法選擇T2DM患者150例，根據24 h尿微量白蛋白排泄率(UAER)分為單純糖尿病組(SDM組)54例、早期糖尿病腎病期組(EDN組)56例和臨床糖尿病腎病期組(CDN組)40例，同時選擇同期進行健康體檢確定為健康者42例作為對照組。所有研究對象均測定血清中FFA、Hcy、Cys-C等指標含量，采用方差分析和應用Pearson相關性分析對各指標進行統計學分析。結果CDN組、EDN組血清中FFA、Hcy、CysC水平均高于SDM組和對照組(P＜0.05)，且血清中FFA、Hcy、CysC水平CDN組＞EDN組＞SDM組＞對照組，各組間比較差異均具有統計學意義(P＜0.05)；T2DM患者血清FFA、Hcy、CysC水平與UAER呈正相關(r= 0.718，0.417，0.361；P＜0.05)。結論糖尿病患者FFA、Hcy、CysC水平與糖尿病腎病的發展進程有關，各項指標的聯合檢測對早期診斷糖尿病腎病有重要的臨床應用價值。

糖尿病腎病；游離脂肪酸；同型半胱氨酸；胱抑素C

2型糖尿病(T2DM)是由遺傳和環境因素相互作用的常見慢性代謝綜合征，是人類最為普遍的內分泌疾病。然而糖尿病腎病(DN)是糖尿病常見的并發癥之一，DN晚期患者可出現腎功能衰竭，嚴重者危及患者的生命，DM患者如能早期發現腎損傷在可逆期進行干預治療能延緩病情的發展，由此可見DN的早期診斷至關重要。FFA是反映脂代謝紊亂的一個關鍵指標[1]，研究表明，FFA濃度的升高與T2DM的易感性[2]密切相關，也有研究報道[3-5]Hcy和Cys-C水平是衡量腎小球濾過功能的特異性指標。據此，本研究檢測分析T2DM患者血清中FFA、Hcy、Cys-C和尿微量白蛋白的排泄率(UAER)等指標，分析上述指標在T2DM患者DN發生過程中早期診斷的應用價值。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇2012年3月至2013年12月在本院內分泌科、腎內科就診并確診為DM或DN病的患者150例，入選患者均符合1999年WHO糖尿病診斷標準及Mogensen于1983年提出糖尿病腎病分期標準。排除腫瘤、感染、自身免疫性疾病、原發性腎病、近期使用腎毒性藥物和心肝腎等疾病。根據UAER進行分組，UAER≤30 mg/24 h者確定為單純T2DM組(SDM組)，共54例，其中男性32例，女性22例，年齡平均(55.7±5.98)歲；UAER30～300 mg/24 h者確定為早期糖尿病腎病組(EDN組)，共56例，其中男性32例，女性24例，年齡平均(61.39±9.79)歲；UAER＞300 mg/24 h為臨床糖尿病腎病組(CDN組)，共40例，其中男性17例，女性23例，年齡平均(60.30±10.21)歲。同時選擇同期進行健康體檢確定為健康者作為對照組，共42例，其中男性25例，女性17例，年齡平均(57.30±6.71)歲。各組間性別、年齡比較差異均無統計學意義(P＞0.05)，具有可比性。各患者組檢測前12 h均不服用降糖降脂藥物。

1.2 觀察指標與檢測方法

1.2.1 血標本采集及相關指標測定方法 所有研究對象均空腹12 h后采集靜脈血3 ml，1 h內分離血清。以酶法測定血清FFA，試劑由日本積水醫療株式會社提供；以循環酶法測定血清Hcy，試劑由四川邁克生物科技有限公司提供；以免疫增強比濁法檢測血清Cys-C，試劑由上海景源醫療器械有限公司提供；以酶法檢測血中尿素氮(BUN)和肌酐(Cr)，試劑由寧波瑞源醫療有限公式提供。上述各指標檢測均采用美國貝克曼-AU5400全自動生化分析儀。

1.2.2 尿標本的收集及UAER測定方法 受檢者留取24 h尿總量，以甲苯防腐，混勻尿液標本，測量并記錄24 h尿量，取20 ml測定微量白蛋白(UmAlb)含量，計算UAER[UAER=UmAlb(mg/L)×24 h尿總量(L)]，UmAlb含量采用德國西門子BNP全自動特種蛋白分析儀及原裝試劑檢測。

1.3 統計學方法 所有數據均應用SPSS17.0統計軟件進行統計學處理，對計量資料進行正態性檢驗，正態分布計量資料以均數±標準差(±s)表示。多組間均數比較采用方差分析，并在此基礎上進行LSD兩兩比較分析。各檢測指標間的相關性采用Pearson相關性分析。以P＜0.05為差異具有統計學意義。

2 結 果

2.1 各組檢測FFA、Hcy、CysC等指標水平的比較 CDN組血清中各指標水平均高于其他各組(P＜0.05)；EDN組血清中FFA、Hcy、CysC水平以及UAER均高于SDM組和對照組(P＜0.05)；SDM組血清中FFA、Hcy、CysC水平以及UAER高于對照組(P＜0.05)；各組間UAER、血清FFA、Hcy、CysC水平呈梯度升高；血清BUN、Cr水平僅在CDN組出現升高，SDM組與EDN組間均無變化(P＞0.05)，對腎損傷診斷敏感性差。組間方差分析與LSD兩兩比較分析詳見表1。

表1 各組FFA、HCY、Cys-C等指標水平的比較(±s)

表1 各組FFA、HCY、Cys-C等指標水平的比較(±s)

注:a與對照組比較，P＜0.05；b與單純DM組比較，P＜0.05；c與早期DN組比較，P＜0.05。

組別對照組(n=42) SDM組(n=54) EDN組(n=56) CDN組(n=40)F值P值Cr(μmol/L) 64.45±12.33 68.80±19.46 70.18±30.6 159.3±23.6abc15.89＜0.05 UAER(mg/24 h) 9.79±8.1 19.03±7.1ac158.1±129.3ab407.8±89.6abc198.5＜0.05 FFA(μmol/L) 378.3±117.1 535.6±149.5ac629.1±251.1ab750.5±251.1abc25.83＜0.05 Hcy(μmol/L) 7.99±1.7 11.2±2.2ac14.9±3.7ab18.17±4.1abc9.03＜0.05 CysC(mg/L) 0.75±0.45 0.97±0.45ac1.65±0.37ab2.35±0.37abc57.73＜0.05 BUN(mmol/L) 4.35±0.66 4.51±1.00 5.01±0.98 6.35±1.41abc3.67＜0.05

2.2 Pearson相關性分析 匯總各組所有T2DM病患者各指標進行相關分析：以血清中FFA、Hcy、CysC、UAER、Cr為因變量，以UAER為自變量，分別進行Pearson相關性分析，結果顯示FFA、Hcy、CysC分別與UAER呈正相關(r=0.718，0.417，0.361，P＜0.05)。

3 討論

DN是糖尿病發展進程中最為常見的并發癥之一，其早期病情呈隱匿狀態不易被發現，DN診斷與分期標準規定[6-7]，當UAER＞30 mg/24 h時則認為存在腎損傷，并將UAER 30～300 mg/24 h作為DN早期診斷的主要檢查指標，此階段如能得到及時的干預治療腎損傷可以發生逆轉，然而UAER持續＞300 mg/24 h或出現常規蛋白尿，則導致不可逆性的腎損傷，最終導致腎功能衰竭[8]，由此可見DN早期診斷非常重要。以往臨床上常規腎功能檢測主要是以UAER、Cr作為觀察指標，了解患者腎功能的損傷情況，但在早期腎損傷時血中UAER、Cr不易發生改變，仍可處在正常水平，只有在嚴重腎小球損傷，出現濾過功能障礙才可出現異常，一般腎小球濾過率降低50%以下時，其濃度才明顯升高[9]，從而導致最佳時機的治療時機被延誤。

FFA是機體脂肪分解的產物，生理狀態下處在較低的水平，病理性升高[10]的狀態下FFA對細胞膜具有很強的毒性作用，由于能增強細胞因子毒性，引起血管損傷，抑制外周葡萄糖的利用，促進糖異生，并與胰島素抵抗密切相關；故此FFA比其他血脂指標更早也更明顯地反映機體脂代謝紊亂水平以及對腎臟血管內壁細胞的毒性作用。表明FFA可能通過氧化應激反應參與了DN患者腎臟的早期損傷過程。本研究結果顯示，糖尿病各組患者血中的FFA水平均高于正常對照者(P＜0.05)，值得注意的是SDM組與對照組間出現的統計學差異意義較大，認為SDM組患者已經出現腎損傷，此時呈隱匿狀態。Cys-C是體內有核細胞產生，且穩定的釋放進入血中，Cys-C可經腎小球自由的濾過而被清除，在腎近曲小管進行重吸收。但重吸收后不進入血液，而是完全被代謝分解，因此，其血中濃度完全由腎小球濾過功能決定，不依賴任何外來因素，以及年齡、性別、體重指數等其他因素的影響，由此可見是一種理想的反映腎小球濾過率變化的具有同源性的標志物，是可以用來替代血Cr監測的一種內源性生物指標[11]。

研究結果表明，EDN患者血清CysC水平顯著高于SDM組，但此時的血UAER、Cr與對照組比較無顯著變化，說明CysC水平升高同樣是DM患者早期腎損害的篩查指標。Hcy是蛋氨酸代謝的中間產物，高Hcy血能促進糖尿病微血管并發癥的發生和發展，同時Hcy產生超氧化物質或過氧化物質，加快脂質過氧化作用，導致這些氧化物質在血管內皮細胞內堆積增加，當出現在腎臟微血管時則可直接引起腎組織損害和凋亡，通過細胞因子及炎癥過程，促發慢性腎病進展[12]。有研究發現血中Hcy水平每增高5 mmol/L，UAER出現的危險性增加30%[13]。本研究表明各組間Hcy水平變化與FFA水平變化一致，說明Hcy檢測也是有利于腎損傷的早期診斷。

本次研究通過對EDN組和CDN組患者各指標進行相關分析結果顯示UAER與FFA、Hcy、Cys-C相互之間均具有高度的正相關性(P＜0.01)，各指標之間有著密切的聯系，其相關程度隨病程發展而增高，而UAER與BUN、Cr之間只是在CDN階段具有相關性(P＜0.05)，表明不同分期DN患者UAER、FFA、Hcy、Cys-C各指標之間均存在著緊密的關聯性，各指標之間預示可能存在促進DN病程發展的共同因素，表明了多因素相互作用致病的結果，證實了FFA、Hcy、Cys-C的水平變化在病程發展中起著重要的作用。

綜上所述，DN患者血清FFA、Hcy、CysC水平顯著升高，比傳統腎功能檢測指標UAER、Cr出現更早，且與UAER水平變化顯著正相關，所以定期聯合監測FFA、Hcy、CysC，有利于對DN的早期診斷和早期治療。

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Application value of serum FFA,Hcy and Cys-C levels in diagnosing diabetic nephropathy at early stage.

CHEN Wei1,TONG Xiu-feng2,LI An-ling1,HU Han-ning1.1.Department of Clinical Laboratory,Zhongnan Hospital of Wuhan University,Wuhan 430071,Hubei,CHINA;2.Department of Clinical Laboratory,Liangzihu Hospital of Ezhou, Ezhou 436060,Hubei,CHINA

ObjectiveTo establish the relationship between indexes of serum free fatty acids(FFA),homocysteine(Hcy)and Cystatin-C(Cys-C)levels with Type 2 diabetes mellitus(T2DM)at each stage,and to determine their application values.MethodsOne hundred and fifty T2DM patients were selected and divided into three groups according to the levels of urinary albumin excretion rates(UAER):simple diabetic mellitus group(SDM group,n= 54),early diabetic nephropathy group(EDN group,n=56),clinical diabetes nephropathy group(CDN group,n=40). Forty-two healthy subjects of the same period determined by physical examination were enrolled as the control group. FFA,Hcy and Cys-C and other indexes in serum were determined for all subjects.T-test and variance analysis and Pearson correlation analysis were applied to make statistical analysis of all indexes.ResultsSerum FFA,Hcy,Cys C levels in CDN group and EDN group were significantly higher than SDM group and the control group(P＜0.05),and the levels from high to low was CDN group,EDN group,SDM group,the control group,with statistically significant difference between any two groups(P＜0.05).In T2DM patients,the FFA,Hcy,Cys C levels were found positively correlated with UAER(r=0.718,0.417,0.361;P＜0.05).ConclusionThe FFA,Hcy and CysC levels of T2DM patients are related with the development process of diabetic nephropathy.Joint detection of all indexes has significant clinical application value in the early diagnosis of diabetic nephropathy.

Diabetic nephropathy;Free fatty acid;Homocysteine;Cystatin C

R587.2

A

1003—6350（2015）03—0375—03

10.3969/j.issn.1003-6350.2015.03.0134

2014-06-18)

湖北省自然科學基金(編號：2012FFB04411)

胡漢寧。E-mail：648250627@qq.com