卵巢腫瘤患者血清胱抑素C表達水平及臨床意義

鄭淑華，黃瑞玉，穆小萍，盧春敏

(廣東省婦幼保健院檢驗科，廣東 廣州 511400)

卵巢腫瘤患者血清胱抑素C表達水平及臨床意義

鄭淑華，黃瑞玉，穆小萍，盧春敏

(廣東省婦幼保健院檢驗科，廣東 廣州 511400)

目的 檢測卵巢腫瘤患者血清胱抑素C的表達水平，分析其發生變化的原因及臨床意義。方法收集40例卵巢癌患者、40例卵巢良性腫瘤患者和40例健康體檢婦女的血清標本，采用乳膠增強免疫透射比濁法分別對標本進行血清胱抑素C的檢測，總體均值比較采用單因素方差分析，組間均值兩兩比較采用LSD分析。結果卵巢癌患者血清胱抑素C水平均比卵巢良性腫瘤患者和健康體檢婦女的血清水平顯著升高，差異均有顯著統計學意義(P＜0.01)，而卵巢良性腫瘤者與健康體檢者比較則差異無統計學意義(P＞0.05)。結論卵巢癌患者血清胱抑素C水平顯著升高，提示胱抑素C參與了卵巢癌的發生發展及轉歸的過程。

卵巢腫瘤；侵襲；胱抑素C

胱抑素C(cystatin C，Cys C)屬于半胱氨酸蛋白酶抑制劑超家族的成員，其生理功能可抑制半胱氨酸蛋白酶(如CatB、H、L和X)的活性，從而保護細胞免受不適當的內源性或外源性蛋白酶的水解，并參與細胞內外蛋白水解過程的調控[1-2]。胱抑素C被認為與腫瘤細胞的增殖、分化和遷移有關，卵巢腫瘤組織內蛋白酶抑制劑表達量的變化與腫瘤細胞向外浸潤與轉移有著非常密切的關系[3]。本文旨在檢測胱抑素C在卵巢良惡性腫瘤患者血清中的表達情況，探討其在卵巢癌發生發展和侵襲過程中的臨床意義。

1 資料與方法

1.1 一般資料 收集2012年1月至2013年10月在我院婦科進行手術的卵巢腫瘤患者80例，經手術后病理確診為卵巢癌和卵巢良性腫瘤各40例，均排除其他生理性和病理性原因影響胱抑素C濃度變化，患者年齡40～56歲，同時收集相同年齡階段的健康體檢婦女血清標本40例。

1.2 方法 上述三組研究對象均在早晨空腹抽血，立即離心分離血清，采用西門子AD1800全自動生化分析儀分別檢測血清Cys C、肌酐、空腹血糖、膽固醇和甘油三酯水平。Cys C檢測方法為膠乳增強免疫透射比濁法，試劑及校準品購自四川邁克公司，肌酐、空腹血糖、膽固醇和甘油三酯均采用氧化酶法，試劑及校準品均購自北京Human公司。

1.3 統計學方法 應用SPSS19.0統計軟件進行數據分析，所有計量數據以均值±標準差(±s)表示，總體均值比較采用單因素方差分析，組間均值兩兩比較采用LSD方法，以P＜0.05為差異具有統計學意義。

2 結 果

2.1 三組受試者血清各項指標檢測結果 研究對象各項指標檢測結果均在本實驗室提供的參考范圍內，可提示指標正常，排除由其他疾病影響患者血清胱抑素C水平的變化，見表1。

表1 三組受試者的血清各項指標檢測結果(±s)

表1 三組受試者的血清各項指標檢測結果(±s)

組別 空腹血糖(mmol/L)膽固醇(mmol/L)甘油三酯(mmol/L)肌酐(μmol/L)健康體檢組卵巢良性腫瘤組卵巢癌組4.37±0.19 4.59±0.23 4.51±0.17 4.18±0.21 4.12±0.13 4.37±0.16 0.93±0.36 1.06±0.27 1.17±0.21 53.08±5.91 49.89±6.07 54.75±5.29

2.2 三組受試者血清胱抑素C水平比較 卵巢癌組患者血清胱抑素C水平為(2.06±0.19)mg/L，而卵巢良性腫瘤組患者和健康體檢組婦女血清胱抑素C水平分別為(0.83±0.13)mg/L和(0.78±0.12)mg/L，組間均值兩兩結果比較顯示，卵巢癌組血清胱抑素C水平比后兩組明顯升高，差異有顯著統計學意義(P＜0.01)，而卵巢良性腫瘤組與健康體檢組比較則差異無統計學意義(P＞0.05)。

2.3 三組受試者的血清胱抑素C水平分布頻率及均值分布 三組受試者胱抑素C水平分布頻率見圖1，三組受試者的胱抑素C水平均值分布見圖2。

圖1 三組受試者血清Cys C水平分布頻率（mg/L）

圖2 三組受試者血清Cys C水平均值分布圖(mg/L，±2s)

3 討論

卵巢惡性腫瘤是女性生殖器官常見的惡性腫瘤之一，嚴重威脅著婦女生命安全。近年來，隨著腫瘤侵襲和轉移機制的深入研究，已發現半胱氨酸內源性抑制劑的Cystatin家族成員與腫瘤的侵襲和轉移密切相關[3]，胱抑素C(cystatin C，Cys C)抗腫瘤轉移作用的研究正日益受到人們關注。Cys C屬半胱氨酸蛋白酶抑制劑超家族成員，分子量僅為13 kDa的非糖基化分子，包含120個氨基酸殘基，由機體有核細胞恒定產生，與性別、年齡、肌肉量、飲食無關[1-2]。Cys C是一種蛋白酶抑制劑，儲存于組織內，能通過與半胱氨酸蛋白酶(如CatB、H、L和X)結合而抑制其活性，從而保護機體細胞免受內源性或外源性蛋白酶的水解，并參與細胞內外蛋白水解的調控過程[3-4]。目前已發現多種腫瘤的患者組織及血清中出現各種蛋白酶及其抑制劑的異常表達，均與腫瘤的發展與轉移相關，組織蛋白酶與其抑制劑之間平衡狀態的失調已被認為與腫瘤的惡變和轉移密切相關[3-4]。

近年來研究發現，Cys C與腫瘤浸潤和轉移有關，在卵巢囊液中，Cys C檢測結果顯示惡性腫瘤患者比良性腫瘤患者要明顯高得多[5]，血清Cys C被認為是與惡性腫瘤細胞增殖分化和浸潤轉移密切相關的一項指標。在卵巢癌腫瘤組織中，細胞外胱氨酸蛋白酶含量明顯增高，而細胞內抑制劑則無變化或僅有輕度升高，出現卵巢惡性腫瘤組織中胱氨酸蛋白酶與其抑制劑分泌不平衡的現象，隨之機體產生應激反應，使Cys C水平相應升高，以抑制腫瘤組織中升高的胱氨酸蛋白酶的水解活性，從而抑制卵巢腫瘤細胞的生長、侵襲和遠處轉移[6-7]。

為了解Cys C在卵巢腫瘤患者血清中的表達情況，以及分析其與卵巢腫瘤良惡性的關系，本資料收集相同例數的卵巢癌和卵巢良性腫瘤患者，通過檢測其血清Cys C水平，并與正常健康體檢婦女比較，發現卵巢癌患者血清中Cys C的濃度明顯高于卵巢良性腫瘤患者和健康體檢婦女，差異有顯著統計學意義(P＜0.01)，并且與其他學者研究結果一致[8]。表明卵巢癌細胞超表達Cys C蛋白質編碼基因，在卵巢癌發展過程中胱氨酸蛋白酶與其抑制劑分泌出現失衡現象，從而促進卵巢癌細胞的生長侵襲和遠處轉移[9]。卵巢癌腫瘤組織中Cys C的高表達，可能是由于機體反饋調節機制的作用，在卵巢癌的發生發展過程中，卵巢腫瘤組織細胞及其微環境大量表達各類半胱氨酸組織蛋白酶，導致細胞內溶酶體中各類半胱氨酸組織蛋白酶類分泌釋放出來，并與腫瘤細胞表面結合，發揮生物學功能，溶解組織蛋白，引起腫瘤細胞生長、遷徙、侵襲、血管發生和轉移[9]，而腫瘤組織中半胱氨酸蛋白酶上調表達會反饋性引起Cys C表達的增多，于是Cys C發揮其抑制功能抑制了半胱氨酸蛋白酶的活性，使其無法對正常細胞和細胞外基質進行降解和破壞作用，從而降低了卵巢癌細胞向外擴散和侵襲的能力[10]。

由此可見，細胞外半胱氨酸組織蛋白酶類與半胱氨酸蛋白酶抑制劑C水平的平衡對卵巢腫瘤患者來說非常重要，Cys C能抑制細胞內外半胱氨酸蛋白酶的水解活性，在卵巢癌腫瘤細胞的生長、血管生成、浸潤和轉移中起重要作用，。血清Cys C雖非卵巢腫瘤特異性標志物，但作為腫瘤生化輔助診斷指標仍有一定的應用價值，若結合其他相關卵巢腫瘤標志物檢測，可提高陽性檢出率，有望成為臨床卵巢癌診斷和預后檢測的指標。

[1]Ognibene A,Mannucci E,Caldini A,et al.Cystatin C reference values and aging[J].Clin Biochem,2006,39:658-661.

[2]Weinert LS,Prates AB,do Amaral FB,et al.Gender does not influence cystatin C concentrations in healthy volunteers[J].Clin Chem Lab Med,2010,48:405-408.

[3]Mohamed MM,Sloane BF.Sloane.Cysteine cathepsins:multifunctional enzymes in cancer[J].Nature Reviews,2006,6(10):764-775.

[4]Rakashanda S,Rana F,Rafiq S,et al.Role of proteases in cancer:A review[J].Biotechnology and Molecular Biology Review,2012,7 (4):90-101.

[5]Eva K,Leon F,Chris M,et al.Cathepsins B,L and cystatin C in cyst Xuid of ovarian tumors[J].Cancer Res Clin Oncol,2010,136: 771-778.

[6]Kolwijck E,Kos J,Obermajer N,et al.The balance between extracellular cathepsins and cystatin C is of importance for ovarian cancer[J].Eur J Clin Invest,2010,40(7):591-599.

[7]Elena AG,Valentina AL,Ivan VB,et al.Evaluation of serum procathepsin B,cystatin B and cystatin C as possible biomarkers of ovarian cancer[J].Int J Circumpolar Health,2013,doi:10.3402/ijch. v72i0.21215.

[8]孫繼興,楊雅靜,趙 剛,等.惡性腫瘤患者血清中胱抑素C水平測定及臨床相關研究[J].職業與健康,2010,26(17): 2030-2031.

[9]Nishikawa H,Ozaki Y,Nakanishi T,et al.The role of cathepsin B and cystatin C in the mechanisms of invasion by ovarian cancer[J]. Gynecol Oncol,2004,92(3):881-886.

[10]Keppler D.Towards novel anti-cancer strategies based on cystatin function[J].Cancer Lett,2006,235:159-176.

Variance of serum cystatin C levels in patients with ovarian cancer and its significance.

ZHENG Shu-hua, HUANG Rui-yu,MU Xiao-ping,LU Chun-min.Department of Clinial Laboratory,Guangdong Women and Children Hospital,Guangzhou 511400,Guangdong,CHINA

ObjectiveTo determine the levels of cystatin C in patients with ovarian cancer,and to analyze the reason of variance and its significance.MethodsForty ovarian cancer patients,40 ovarian benign tumor patients,and 40 healthy individuals were included in the study.Serum cystatin C was detected by the method of Emulsion Enhanced Turbidimetric Immuno-Assay.All data were statistically analyzed using the One-Way ANOVA and LSD method.ResultsThe levels of cystatin C in ovarian cancer group were significantly higher than those in both ovarian benign tumor group and healthy group(P＜0.01).And there was no statistically significant difference between data of the ovarian benign tumor group and healthy group(P＞0.05).ConclusionThe significant increase of cystatin C level in patients with ovarian cancer indicates that cystatin C is actually involved in the development of ovarian cancer.

Ovarian cancer;Invasion;Cystatin C

R737.31

A

1003—6350（2015）17—2551—03

10.3969/j.issn.1003-6350.2015.17.0924

2014-12-21)

鄭淑華。E-mail：489611421@qq.com